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奧林巴斯生化分析儀應(yīng)用
及問題解析胡遠(yuǎn)明廣州醫(yī)學(xué)院第四附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科生化分析儀的分類連續(xù)流動(dòng)式離心式分立式(功能最強(qiáng),速度最快,應(yīng)用最廣)干片式生化分析儀的結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)樣品處理系統(tǒng)光學(xué)測(cè)量系統(tǒng)加樣系統(tǒng)清洗系統(tǒng)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)錯(cuò)誤數(shù)據(jù)的主要來源分析儀器加樣系統(tǒng)比色系統(tǒng)溫育系統(tǒng)其它環(huán)境水溫度標(biāo)本操作技術(shù)問題數(shù)據(jù)試劑是否在有效期內(nèi)交叉污染其它關(guān)鍵點(diǎn)問題數(shù)據(jù)的收集問題數(shù)據(jù)的實(shí)時(shí)監(jiān)視問題數(shù)據(jù)分析趨勢(shì)?何時(shí)發(fā)生?出現(xiàn)的頻率?問題數(shù)據(jù)的分析步驟0‐100%檢查(診斷菜單)比色系統(tǒng)水試驗(yàn)(樣品和試劑
水)比色系統(tǒng)與儀器全部的運(yùn)行狀況試劑試驗(yàn)(樣品
水,試劑)試劑、加注試劑系統(tǒng)和其它精密度檢查,定標(biāo)及質(zhì)控結(jié)果的檢查必要的數(shù)據(jù)問題數(shù)據(jù)(原始數(shù)據(jù),最好有打印結(jié)果)反應(yīng)曲線(最小二乘法)定標(biāo)追蹤及因數(shù)試劑空白結(jié)果質(zhì)控?cái)?shù)據(jù),質(zhì)控圖保養(yǎng)記錄(注射器,光源燈泡,等等)試劑/定標(biāo)液/質(zhì)控的批號(hào)有關(guān)最小二乘法的理解y=f(x),實(shí)質(zhì)就是平方差最小化的函數(shù)按插值函數(shù)的方法論證問題分析過程中的一些有用提示水的質(zhì)量生化分析儀使用的水的質(zhì)量是極其重要的。一般的純水機(jī)都有:反滲裝置、離子交換、超微過濾和紫外線消毒。
質(zhì)量不好的水會(huì)有以下影響1)與通常不一樣的PH值而影響酶類測(cè)定2)以下項(xiàng)目對(duì)水最為敏感: Ca
(OSR6113)
Mg(OSR6178) Iron(OSR6186)3)細(xì)菌會(huì)在管道與閥中生長(zhǎng),使管道變黑和閥堵塞水的溫度
儀器控制水的溫度AU600/640 R1針–水
27–28度 R2針–水40–50度AU400 R針–水27–28度
(500瓦循環(huán)加熱系統(tǒng))沖洗站:42.5–60度以下的項(xiàng)目受沖洗水的溫度影響
不正確的沖洗水溫度對(duì)常規(guī)的生化項(xiàng)目影響最為敏感的是:LDH-OSR6126,OSR6127,OSR6128結(jié)果明顯偏低其它受影響的酶是:
ALP(OSR6104),
ALT(OSR6107),AMY(OSR6106)等等。-永久使用的硬質(zhì)玻璃比色杯改進(jìn)的干式浴系統(tǒng)可使溫度可穩(wěn)定在
37*C+/-0.1循環(huán)的恒溫液鋁合金支架溫育系統(tǒng)沖洗系統(tǒng)清洗劑→清洗劑→溫水
→溫水→溫水
→溫水→吸干→烘干?比色杯沖洗頭?樣品/試劑針沖洗站?經(jīng)八步?jīng)_洗后比色杯殘留水小于1uL?在沖洗時(shí)內(nèi)部與外部同時(shí)沖洗發(fā)生在我科的實(shí)例2006年底:Mg的測(cè)量每天有20~40%的出現(xiàn)異常高值Cu的異常波動(dòng)問題解決手工徹底清洗比色杯清洗儀器水箱清洗所有相關(guān)管路
清洗劑的濃度維護(hù)保養(yǎng)中正確的使用清洗劑對(duì)于儀器和某些特殊的項(xiàng)目十分關(guān)鍵。按廠家的要求(AU400/640)每三個(gè)月更換蠕動(dòng)泵,每天觀察清洗劑的消耗量以確保足夠的清洗劑濃度。問題與思考每天開機(jī)觀察什么每天結(jié)束工作時(shí)應(yīng)做的事(回顧性質(zhì)量控制)報(bào)警信息、觀察加樣針、觀察濃縮清洗液的用量、觀察清洗單元的液流
不正確的清洗劑濃度會(huì)有以下的影響按通常的經(jīng)驗(yàn),CRP、ASO和鐵蛋白這類乳膠比濁法的實(shí)驗(yàn)最為敏感。長(zhǎng)期使用不正確的清洗劑會(huì)使比色杯變臟,沖洗頭和一些閥門堵塞如何檢查?
取儀器稀釋好的用于沖洗比色杯與攪拌棒的清洗液測(cè)定Na離子,其濃度應(yīng)在25-35mmol/L我室發(fā)生的實(shí)例2008三月份連續(xù)四天出現(xiàn)離子(ca,mg,cu,fe)定標(biāo)波動(dòng),LPS定標(biāo)不成功抽濃縮清洗液的風(fēng)琴泵不工作觀察清洗單元的清洗液出水孔無泡沫故障解決修理泵W2清洗/w1清洗(酸堿交替)為什么蠕動(dòng)泵管非常重要?蠕動(dòng)泵管是用來把濃的清洗液稀釋成應(yīng)用液來清洗比色杯與攪拌棒蠕動(dòng)泵管變壞問題數(shù)據(jù)QC超出范圍清洗液的濃度變得不穩(wěn)定
管道布置圖
MixBar1stwashingCuvetteWash1st&2ndStepPPtubemakeDilutedDetergentforwashingSelectmenu(A)ANLMaintenanceSelectmenu(G)ReplaceDetergentTube新舊蠕動(dòng)泵管對(duì)比舊蠕動(dòng)泵管使用超過了三個(gè)月新蠕動(dòng)泵管每3
個(gè)月蠕動(dòng)泵對(duì)ISE的影響K,NA,CL交替出現(xiàn)定標(biāo)失敗定標(biāo)斜率出現(xiàn)整體下降之勢(shì)測(cè)量結(jié)果時(shí)好時(shí)壞我科遇到的實(shí)例K,Na,Cl交替出現(xiàn)定標(biāo)斜率為02008年八月三個(gè)電極之斜率都低于38AU400相關(guān)的實(shí)例清洗液的稀釋靠蠕動(dòng)泵抽液,時(shí)間過長(zhǎng)后抽液量減少,杯越來越臟,B增大,負(fù)值增多ALT,RF,ASO,CRP有問題的攪拌棒在階段保養(yǎng)時(shí)應(yīng)仔細(xì)檢查每一個(gè)部分,其中攪拌棒是非常重要的。應(yīng)檢查攪拌棒有無破損(特富龍涂層)或彎曲,這些通常的操作不當(dāng)造成的,所以在清潔儀器時(shí)應(yīng)特別注意。有問題的攪拌棒會(huì)有以下影響
鐵(Iron)的不飽合鐵(UIBC)最先受到影響通常有問題的攪拌棒會(huì)影響結(jié)果的重復(fù)性攪拌棒的兩部沖洗?2-stepwashofmixingbars?Contaminationfree?CompletemixingwithscrewbarMixingWashwithdetergentWashwithD.I.water有問題攪拌棒對(duì)結(jié)果的影響
每三個(gè)結(jié)果出現(xiàn)的低值(AU600)有問題的攪拌棒在結(jié)果上的表現(xiàn)使測(cè)量曲線出現(xiàn)較多的波浪狀使結(jié)果如CO2,alt,等出現(xiàn)*攜帶污染出現(xiàn)增加(Mg,Cu,)樣品針的重復(fù)性測(cè)試首先做一個(gè)病人的混合血清做2微升的項(xiàng)目如血糖或白蛋白,每個(gè)項(xiàng)項(xiàng)目測(cè)定20次用輔助功能菜單統(tǒng)計(jì)CV%
血糖或白蛋白的CV通常會(huì)小于1%
如果CV大于1%請(qǐng)清潔或更換樣品針注射器樣品針Dummy樣品(5ul)樣品(1to50ul)氣泡(4ul)除氣水多余的樣品(5ul)樣品分配注射器試劑針試劑分配氣泡(5ul+5ul)試劑(25to300ul)氣泡(5ul)除氣水多余的試劑(5ul)問題?樣品管加樣后出現(xiàn)較多的氣泡?比色杯檢查的涵義完成“Photo-cal”后,請(qǐng)檢查
Cuvettecondition
有無臟比色杯??
比色杯有無劃痕??CuvettecheckSelect“CuvetteStatus”CuvettecheckRecommendRangeMean
0.03Abs.0.10Pressthis比色杯檢查有以下三種檢查方法:MeancheckAbsorbancecheckCuvettecheck如果有任何問題會(huì)有以下顯示:Meancheck
RedcolorAbsorbancecheck
BluecolorCuvettecheck
Greencolor檢查有問題的比色杯ErrorCuvette(DirtyCuvette)什么是MeanCheck?OpticalDensity(OD)ofeachCuvetteMean-0.03+0.03Morethan+/-0.03OutofRangeDirtyCuvette什么是AbsorbanceCheck?PreviousPhotocalDataDirtyCuvetteNEWPhotocalDataMorethan+/-0.100OutofRangeOpticalDensity(OD)ofpreviousPhotocal0.100比色杯檢查如果發(fā)現(xiàn)有任何問題的比色杯請(qǐng)清洗或更換比色杯燈泡狀況的檢查在做完P(guān)hoto-cal以后清做燈泡狀況檢查.Selectmenu(P)PhotocalMonitorSelectoneCuvette100%range0.01to1.7Photcaldata0%range-5to25BrightDarkMax:1.7Min:0.01何時(shí)更換燈泡?PhotocalData:超過
1.7當(dāng)出現(xiàn)“LampDark”的報(bào)警時(shí)速率法的很多項(xiàng)目尤其是340nm波長(zhǎng)的項(xiàng)目出現(xiàn)
“*”的報(bào)警標(biāo)志反應(yīng)曲線出現(xiàn)波浪狀改變—換燈泡試一試CKMB>CK會(huì)出現(xiàn)在什么情況?國(guó)內(nèi)及國(guó)外的很多報(bào)道有上述現(xiàn)象,只要CKMB的升高不是由溶血造成的,CKMB大于CK,這樣的病例95%是O型或B型血的癌癥患者,原因是部分癌癥病人的免疫系統(tǒng)混亂,其中一些免疫球蛋白充當(dāng)了輔酶的作用新生兒腦部疾患腹瀉患者溶血的標(biāo)本可以測(cè)定CKMB嗎?通常測(cè)定CKMB的標(biāo)本應(yīng)避免溶血,在Olympus的試劑與儀器配合可以基本上扣除這種干擾。RBC中并不含有CKMB,但RBC中含有ADK,一般廠家會(huì)在試劑中加入抑制劑(5磷酸二腺酐AP5A)來抑制ADK的作用,但抑制率僅有95-97%,也就是說有3-5%沒有被抑制,對(duì)于正常的標(biāo)本只升高0-6U/L,極端標(biāo)本可能會(huì)到35U/L,只要應(yīng)用雙速率法,就可以扣除ADK的干擾CKMB測(cè)定的反應(yīng)方程式CKMB的測(cè)定
CK磷酸肌酸+ADP-------肌酸+ATPHKATP+葡萄糖-----------葡萄糖-6-磷酸+ADP
葡萄糖-6-磷酸脫氫酶葡萄糖-6-磷酸+NADP------------------------6-磷酸葡萄糖酸+NADPH+HADK(腺苷酸激酶)會(huì)干擾這個(gè)反應(yīng)
ADK2ADP---------------ATP+AMPADK存在于肝、腎、RBC、血小板中輕微溶血的CKMB反應(yīng)曲線如何發(fā)現(xiàn)交叉污染?交叉污染通常來自于四個(gè)方面:樣品針試劑針攪拌棒比色杯其中最為主要與常見的是:試劑針與攪拌棒如何發(fā)現(xiàn)試劑之間的交叉污染首先制做一份混合血清(分到十個(gè)樣品杯中)如懷疑A項(xiàng)目影響B(tài)項(xiàng)目這十份樣品按如下方法做:
樣品號(hào):12345678910ABBBBABBBB
針棒AU2700的一個(gè)分析實(shí)例
給一新項(xiàng)目定標(biāo)時(shí),報(bào)警ACALincomplete,為什么?最可能有以下幾種原因:定標(biāo)液位置不正確定標(biāo)液所用的容器不規(guī)則(離心管)試劑量不足(舊版試劑小于2毫升)沒有定標(biāo)申請(qǐng)而放入空白(藍(lán))架和或定標(biāo)(黃)架新上了一個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,定標(biāo)不通過,報(bào)警CalibrationError,是什么原因?在定標(biāo)過程中如果有任何報(bào)警,將會(huì)定標(biāo)失敗定標(biāo)過程中定標(biāo)液不
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