2021/7/18星期日1醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第1頁!

第二章酶與細胞的固定化

固定化生物技術——

通過化學或物理的手段將酶或游離細胞定位于限定的空間區(qū)域內(nèi)，使其保持活性并可反復利用。2021/7/18星期日2醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第2頁!1.酶是蛋白質(zhì)，穩(wěn)定性差（熱、酸堿、有機溶劑對其有影響）。2.不能回收，也使產(chǎn)物中混雜酶蛋白。3.分離純化困難。

游離酶的缺點：2021/7/18星期日3醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第3頁!什么是固定化酶？水溶性酶水不溶性載體水不溶性酶（固定化酶）固定化技術2021/7/18星期日4醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第4頁!

2.固定化細胞（immobilizedcell）固定在載體上并在一定空間范圍內(nèi)進行生命活動（生長、繁殖、新陳代謝）的細胞。2021/7/18星期日5醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第5頁!3.固定化原生質(zhì)體意義：(1)固定化原生質(zhì)體去除了細胞壁的擴散障礙，有利于氧的傳遞，營養(yǎng)成分的吸收和胞內(nèi)產(chǎn)物的分泌。(2)原生質(zhì)體不穩(wěn)定，容易破裂，固定化后，由于載體的保護作用，穩(wěn)定性提高。2021/7/18星期日6醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第6頁!

依據(jù)帶電的酶或細胞和載體之間的靜電作用，使酶吸附于惰性固體的表面或離子交換劑上。1.吸附法（adsorption）2021/7/18星期日7醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第7頁!優(yōu)點：條件溫和，操作簡便，酶活力損失少。缺點：結(jié)合力弱，易解吸附。2021/7/18星期日8醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第8頁!1）載體：親水載體優(yōu)于疏水載體

如:天然高分子衍生物:

纖維素葡聚糖凝膠親和性好，機械性能差瓊脂糖合成聚合物：聚丙烯酰胺 聚苯乙烯機械性能好，但有疏水結(jié)構(gòu)尼龍2021/7/18星期日9醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第9頁!

常用的偶聯(lián)反應有：重氮化法、疊氮法、溴化氰法、烷基化法等。2021/7/18星期日10醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第10頁!3.交聯(lián)法（crosslinking）借助雙功能試劑使酶分子之間發(fā)生交聯(lián)的固定化方法。雙功能試劑：

常用的是戊二醛

O

O H—C—CH2—CH2—

CH2—

C—H2021/7/18星期日11醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第11頁!

交聯(lián)反應既能發(fā)生在分子間，也可發(fā)生在分子內(nèi)。酶濃度低時，交聯(lián)發(fā)生在分子內(nèi)，酶仍保持溶解狀態(tài)。酶濃度高時，交聯(lián)發(fā)生在分子間，酶變?yōu)椴蝗軕B(tài)。2021/7/18星期日12醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第12頁!4.包埋法（entrapment）

將酶用物理的方法包埋在各種載體（高聚物）內(nèi)。分為：網(wǎng)格型：將酶包埋在高分子凝膠細微網(wǎng)格中。微囊型：將酶包埋在高分子半透膜中。2021/7/18星期日13醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第13頁!海藻酸鈣凝膠包埋法：滴至海藻酸鈉溶液＋E(orcell)CaCl2溶液中IE(orIC)

角叉菜膠包埋法：滴至角叉菜膠＋E(orcell)KCl

溶液中IE(orIC)聚丙烯酰胺凝膠包埋法：

APAcr+Bis+E(orcell)IE(orIC)TEMED2021/7/18星期日14醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第14頁!

與網(wǎng)格型包埋法相比，微囊型包埋法的優(yōu)點：1）固定化酶顆粒小，有利于底物和產(chǎn)物擴散。2）半透膜能阻止蛋白質(zhì)分子滲漏和進入，注入體內(nèi)既可避免引起免疫過敏反應，也可使酶免遭蛋白水解酶的降解，具有較大的醫(yī)學價值。缺點：反應條件要求高,制備成本也較高。

2021/7/18星期日15醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第15頁!

吸附法共價偶聯(lián)法交聯(lián)法包埋法

酶的四種固定化方法2021/7/18星期日16醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第16頁!2021/7/18星期日17醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第17頁!分類方式固定化細胞分類方式固定化細胞細胞類型微生物植物動物生理狀態(tài)死細胞:完整細胞,細胞碎片,細胞器活細胞:增殖細胞,靜止細胞,饑餓細胞（二）細胞的固定化方法

1.固定化細胞的分類2021/7/18星期日18醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第18頁!

例如：葡萄糖異構(gòu)酶(白色鏈霉菌)，是一種胞內(nèi)酶。在50--80℃加熱10分鐘，使菌體自溶作用的酶失活，而葡萄糖異構(gòu)酶仍然保持活性，長期使用酶活力不減少。2021/7/18星期日19醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第19頁!實驗：

2.4%左右的卡拉膠，70℃溶解,再冷卻到42℃,+10%左右的細菌菌體(預熱到42℃）

迅速混合均勻

4℃冰箱放置大約30min

取出后切成3×3mm的小顆粒

2021/7/18星期日20醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第20頁!

第二節(jié)

固定化酶和固定化細胞的性質(zhì)與表征一、固定化酶的性質(zhì)

影響酶催化活性的因素

1.構(gòu)象改變或立體屏蔽以及微擾

2.分配效應和擴散限制效應2021/7/18星期日21醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第21頁!2021/7/18星期日22醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第22頁!

可能的原因：①固定化增加了酶活性構(gòu)象的牢固程度，可防止酶分子伸展變形；②抑制酶的自身降解。③固定化部分阻擋了外界不利因素對酶的侵襲。2021/7/18星期日23醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第23頁!

（三）酶的最適溫度

最適溫度與酶穩(wěn)定性有關。多數(shù)酶固定化后熱穩(wěn)定性上升，最適溫度也上升（有例外）。

（四）酶的最適pH

帶負電荷載體：最適pH向堿性偏移。帶正電荷載體：最適pH向酸性偏移。2021/7/18星期日24醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第24頁!

固定化酶的表觀米氏常數(shù)Km隨載體的帶電性能變化。固定化載體與底物電荷相反,固定化酶的表觀Km值降低。固定化載體與底物電荷相同,固定化酶的表觀Km值顯著增加。（五）酶的動力學特征2021/7/18星期日25醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第25頁!

與固定化酶相比，固定化細胞的情況比較復雜。（1）有活性升高的現(xiàn)象。（2）穩(wěn)定性的增加。（3）最適溫度和最適pH常保持不變。二、固定化細胞的性質(zhì)

2021/7/18星期日26醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第26頁!

(三)偶聯(lián)率及相對活力

偶聯(lián)率=(加入蛋白活力一上清液蛋白活力)/加入蛋白活力×100%活力回收=固定化酶總活力/加入酶的總活力×100%相對活力=固定化酶總活力/(加入酶的總活力-上清液中未偶聯(lián)酶活力)×100%2021/7/18星期日27醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第27頁!不同固定化方法的比較carriersRecoveryofenzymeactivity(%)Agar54.0po1yacrvlamldel5.24Gelatin40.77carragheenan69.13Glutaraldehyde02021/7/18星期日28醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第28頁!泵儲罐反應產(chǎn)物離心機消旋反應器固定化酶柱子晶體L-AlaL-AlaA-D-AlaA-L-AlaA-D-Ala2021/7/18星期日29醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第29頁!二、固定化酶在醫(yī)學上的應用

1.消血栓：纖溶酶是異源蛋白質(zhì)，在人體內(nèi)引起免疫反應，無法長期使用。酶的不穩(wěn)定性使其在較短的時間內(nèi)失活。用包埋法制備的酶固定化技術可克服上述弊端，酶在囊中不能漏出，小分子物質(zhì)能自由進出。2021/7/18星期日30醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第30頁!2021/7/18星期日31醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第31頁!SensitiveandspecificRapidSimpleBiosensor2021/7/18星期日32醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第32頁!

葡萄糖酶電極

酶電極示意圖?－D－葡萄糖＋O2 D－葡萄糖酸－1，5－內(nèi)酯＋H2O2半透膜酶膠層感應電極2021/7/18星期日33醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第33頁!繼酶傳感器（enzymesensor）后，又出現(xiàn)：細胞器傳感器（cellorganellesensor）組織傳感器（tissuesensor）微生物傳感器（microbesensor）免疫傳感器（immunosensor）2021/7/18星期日34醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第34頁!2021/7/18星期日35醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第35頁!

換能器(Transducer)

將識別元件上進行的生化反應中消耗或生成的化學物質(zhì)，或產(chǎn)生的光或熱等轉(zhuǎn)換為電信號，并呈現(xiàn)一定的比例關系。2021/7/18星期日36醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第36頁!酶傳感器工作原理示意圖酶傳感器主要由固定化酶膜和變換器組成：固定化酶膜：選擇性地“識別”并催化被檢測物質(zhì)發(fā)生化學反應；變換器：把催化反應中底物或產(chǎn)物的變量轉(zhuǎn)換成電信號，通過儀表顯示出來。

2021/7/18星期日37醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第37頁!2）酶傳感器的應用

水質(zhì)監(jiān)測

用化學法測定酚時，硫化物、油類等可干擾其測定。從馬鈴薯中提純、經(jīng)吸附交聯(lián)得到的固定化多酚氧化酶與氧電極構(gòu)成酚傳感器，可檢測大多數(shù)酚類化合物。2021/7/18星期日38醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第38頁!醫(yī)療方面葡萄糖傳感器和血糖測定儀

用葡萄糖氧化酶（glucoseoxidase,GOD）制成葡萄糖傳感器，可測定血液中葡萄糖濃度。2021/7/18星期日39醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第39頁!SBA-50型單電極生物傳感分析儀2021/7/18星期日40醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第40頁!食品鮮度魚鮮度傳感器在日本、加拿大等國廣泛用于魚類鮮度的測定。魚死后體內(nèi)ATP經(jīng)酶解依次形成ADP、AMP、IMP、肌苷、次黃嘌呤和尿酸。鮮度可用K值表示：K=肌苷+次黃嘌呤/ATP+ADP+AMP+IMP+肌苷+次黃嘌呤+尿酸2021/7/18星期日41醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第41頁!肉鮮度傳感器肉類在腐敗過程中會產(chǎn)生各種胺類，故胺類測定能反映肉類的新鮮程度。用腐胺氧化酶與過氧化氫電極構(gòu)成多胺生物傳感器，或用單胺氧化酶膜和氧電極組成的酶傳感器測定肉在貯藏過程中的鮮度。2021/7/18星期日42醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第42頁!(1)將適宜的酶與抗原或抗體結(jié)合在一起。制成酶標抗體（或酶標抗原）；(2)將酶標抗體（或酶標抗原）與樣品中的待測抗原（或抗體）混合，通過免疫反應二者即可特異性地結(jié)合在一起，形成酶－抗體－抗原復合物。通過酶催化反應的速度即可測定復合物中酶的含量，進而測出樣品中的待測抗原（或抗體）的量。

2.酶聯(lián)免疫測定

2021/7/18星期日43醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第43頁!一、固定化酶和固定化細胞的定義及特點

1.固定化酶(immobilizedenzyme)

固定在載體上并在一定空間范圍內(nèi)進行催化反應的酶。

節(jié)酶與細胞的固定化2021/7/18星期日44醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第44頁!優(yōu)點：(1)可提高穩(wěn)定性。(2)能回收，易與產(chǎn)物分離，可反復使用。缺點：(1)存在擴散限制。適于催化小分子物質(zhì)。(2)酶活性下降。2021/7/18星期日45醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第45頁!

優(yōu)越性：

(1)降低成本，省去酶的分離純化工作;(2)既可作為單一酶，也可作為復合酶系完成部分代謝過程。局限性：(1)細胞內(nèi)多種酶的存在，會形成不需要的副產(chǎn)物。(2)細胞膜、細胞壁和載體都存在著擴散限制作用。2021/7/18星期日46醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第46頁!

二、固定化方法固定化方法（一）酶的固定化方法吸附法共價偶聯(lián)法交聯(lián)法包埋法網(wǎng)格型微囊型離子交換吸附物理吸附法2021/7/18星期日47醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第47頁!根據(jù)吸附劑的特點分:1）物理吸附法（physicaladsortion）作用力：氫鍵、疏水鍵常用載體：氧化鋁、硅藻土、多孔陶瓷、多孔玻璃、硅膠、羥基磷灰石、纖維素、活性碳等。2）離子結(jié)合法（ionbinding）作用力：離子鍵常用載體：DEAE-纖維素、DEAE-葡聚糖凝膠、CM-纖維素2021/7/18星期日48醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第48頁!

借助共價鍵將酶的活性非必需側(cè)鏈基團和載體的功能基團進行偶聯(lián)。2.共價偶聯(lián)法（covalentbindingorcovalentcoupling）

2021/7/18星期日49醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第49頁!2）偶聯(lián)方法：偶聯(lián)成功與否取決于： 載體：功能基團：芳香氨基，羧基，羧甲基等。酶分子:側(cè)鏈非必需基團：羧基，巰基，羥基，酚基，咪唑基。 2021/7/18星期日50醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第50頁!優(yōu)點：酶與載體結(jié)合牢固，不會輕易脫落，可連續(xù)使用。缺點：反應條件較激烈，易影響酶的空間構(gòu)象而影響酶的催化活性。

2021/7/18星期日51醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第51頁!

戊二醛有兩個醛基，均可與酶或蛋白質(zhì)的游離氨基反應,使酶蛋白交聯(lián)。

此法與共價偶聯(lián)法利用的均是共價鍵，不同之處：交聯(lián)法不使用載體。2021/7/18星期日52醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第52頁!

缺點：(1)反應條件激烈，酶分子的多個基團被交聯(lián)，酶活力損失大。(2)制備的固定化酶顆粒較小，給使用帶來不便。

2021/7/18星期日53醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第53頁!1）網(wǎng)格型包埋法（gel(lattic)entrapment）又稱凝膠包埋法凝膠包埋條件酶活性強度天然凝膠瓊脂、海藻酸鈣、角叉菜膠、明膠溫和不變差合成凝膠聚丙烯酰胺、光交聯(lián)樹脂聚合反應部分失活高使用的多孔載體及其特點2021/7/18星期日54醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第54頁!2）微囊型包埋法（microencapsulation）

又稱半透膜包埋法將一定量酶液包在半透性的高分子微孔膜內(nèi)。半透膜：直徑幾十微米到幾百微米，厚約25nm。半透膜孔徑<酶分子孔徑，小于半透膜孔徑的小分子底物和產(chǎn)物可以自由進出，被稱為“人工細胞”。2021/7/18星期日55醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第55頁!

包埋法是目前應用最多的一種較理想的方法，與其它固定化方法相比：優(yōu)點：不與酶蛋白氨基酸殘基反應，很少改變酶的高級結(jié)構(gòu)，酶活回收率高。缺點：只適合作用于小分子底物和產(chǎn)物的酶。2021/7/18星期日56醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第56頁!2021/7/18星期日57醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第57頁!固定化方法吸附法包埋法共價結(jié)合法交聯(lián)法物理吸附法離子吸附法制備難易易易較難難較難結(jié)合程度弱中等強強強活力回收高，酶易流失高高低中等再生可能可能不能不能不能費用低低低高中等底物專一性不變不變不變可變可變各種固定化方法的優(yōu)缺點比較2021/7/18星期日58醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第58頁!

1)直接固定法

不使用載體，借助物理（如加熱、冰凍）、化學方法（如檸檬酸、各種絮凝劑）將細胞直接固定。一般只用于單酶或少數(shù)幾種酶催化的反應。

2)吸附法

3)包埋法

2.固定化方法2021/7/18星期日59醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第59頁!

微生物細胞植物細胞動物細胞

吸附法吸附力較弱，細胞易脫落包埋法2021/7/18星期日60醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第60頁!

一般采用網(wǎng)格包埋法（即凝膠包埋法）。常用凝膠：瓊脂凝膠，海藻酸鈣凝膠，角叉菜膠和光交聯(lián)樹脂。注意：一般要加滲透壓穩(wěn)定劑，以防止原生質(zhì)體破裂。（三）原生質(zhì)體的固定化方法2021/7/18星期日61醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第61頁!2021/7/18星期日62醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第62頁!

（一）酶的活性：

通常低于天然酶（有例外）。

（二）酶的穩(wěn)定性酶的耐熱性、對變性劑、抑制劑、蛋白酶的抵抗力增加。2021/7/18星期日63醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第63頁!如：氨基?；?，70℃，15分鐘，酶失去活性。而固定化后，70℃，15分鐘，有>80%活性。2021/7/18星期日64醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第64頁!2021/7/18星期日65醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第65頁!

與自然酶基本相同。但大分子底物難于接近酶分子，導致酶的專一性發(fā)生改變。（六）酶的作用專一性

2021/7/18星期日66醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第66頁!

(一)酶(細胞)的活力

固定化酶通常呈顆粒狀，一般用于測定自然酶活力的方法改進后才能用于測定固定化酶。

(二)蛋白總量

1.雙辛可寧酸法(BCA法)2.考馬斯亮藍法

三、固定化酶（細胞）的評價指標

2021/7/18星期日67醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第67頁!

(四)半衰期

在連續(xù)測定條件下，固定化酶(細胞)的活力下降為最初活力一半所經(jīng)歷的連續(xù)工作時間，以t1/2表示。是衡量穩(wěn)定性的一項重要指標。2021/7/18星期日68醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第68頁!乙酰-DL—AlaL—Ala+乙酸 乙酰-D—Ala第三節(jié)固定化酶與固定化細胞的應用

一、在工業(yè)生產(chǎn)上的應用

1.氨基酰化酶（Aminoacylase）世界上種工業(yè)化生產(chǎn)的固定化酶2021/7/18星期日69醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第69頁!

2.葡萄糖異構(gòu)酶世界上生產(chǎn)規(guī)模最大，應用最為成功的一種固定化酶。2021/7/18星期日70醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第70頁!2.人工腎：原理：將病人血液中的尿素經(jīng)脲酶水解成氨，再用活性炭吸附。即：用固定化脲酶和微膠囊活性炭組成人工腎。2021/7/18星期日71醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第71頁!酶傳感器

固定化酶和電化學傳感器的結(jié)合。優(yōu)點：①既有不溶性酶體系的優(yōu)點，又具有電化學電極的高靈敏度；②酶的專一反應性，使其具有較高的選擇性，能夠直接在復雜試樣中進行測定。三、在分析檢測中的應用2021/7/18星期日72醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第72頁!

1967年Updike等采用酶的固定化技術，將葡萄糖氧化酶固定在疏水膜上，然后再和氧電極結(jié)合，組裝成了世界上個生物傳感器——葡萄糖氧化酶電極。2021/7/18星期日73醫(yī)學資料6酶、細胞、原生質(zhì)體固定化共84頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第73頁!GlucoseGluconicacidGlucoseoxidaseOxygenHydrogenperoxi