雙基限時(shí)練(四)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)一、選擇題1．有關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是()A．是碳源的物質(zhì)不可能同時(shí)是氮源B．凡是碳源均提供能量C．除水以外的無(wú)機(jī)物只提供無(wú)機(jī)鹽D．無(wú)機(jī)氮源也能提供能量2．不同微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要各不相同。下列有關(guān)一種以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)微生物營(yíng)養(yǎng)描述中不正確的是()A．氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮素B．碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì)C．無(wú)機(jī)鹽是該微生物不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)D．水是該微生物的營(yíng)養(yǎng)要素之一3．下列操作與滅菌無(wú)關(guān)的是()A．接種前用火焰灼燒接種環(huán)B．接種前用酒精擦拭雙手C．培養(yǎng)基在50℃D．接種在酒精燈的火焰旁完成4．對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌或消毒方法依次是()①化學(xué)消毒②灼燒滅菌③干熱滅菌④紫外線(xiàn)滅菌⑤高壓蒸汽滅菌⑥巴氏消毒法A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤5．獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是()A．將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌B．用平板劃線(xiàn)法或稀釋涂布平板法接種菌種C．適宜條件下培養(yǎng)D．防止外來(lái)雜菌的污染6．有關(guān)稀釋涂布平板法，敘述錯(cuò)誤的是()A．首先將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋B．然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面C．適宜條件下培養(yǎng)D．結(jié)果都可在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落7．有關(guān)倒平板操作錯(cuò)誤的是()A．將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上B．使打開(kāi)的錐形瓶瓶口迅速通過(guò)火焰C．將培養(yǎng)皿打開(kāi)，培養(yǎng)皿蓋倒放在桌面上D．等待平板冷卻凝固后需要倒過(guò)來(lái)放置8．將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基都放入37℃A．對(duì)比觀(guān)察培養(yǎng)基有沒(méi)有被微生物利用B．對(duì)比分析培養(yǎng)基上是否生有雜菌C．沒(méi)必要放入未接種的培養(yǎng)基D．為了下次接種時(shí)再使用9．急性腸胃炎、手足口病分別是由細(xì)菌和病毒通過(guò)消化道進(jìn)入人體導(dǎo)致的，因此檢測(cè)飲用水中的細(xì)菌含量和病毒含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施。檢測(cè)水中大腸桿菌的含量時(shí)，通常將水樣進(jìn)行系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊乃畼臃謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種方法稱(chēng)為()A．稀釋涂布平板法 B．平板劃線(xiàn)法C．顯微鏡直接觀(guān)察法 D．目測(cè)估計(jì)法10．金黃色葡萄球菌有很強(qiáng)的致病力，常引起骨髓炎等，還可能引起食物中毒，下述實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的做法錯(cuò)誤的是()A．對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理B．帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后才能倒掉C．帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)加熱后才能倒掉D．接種后雙手必須經(jīng)肥皂洗凈，再用75%的酒精棉球擦拭11．下表是關(guān)于四種生物能源、碳源、氮源、新陳代謝類(lèi)型的描述。下列描述正確的一組生物是()硝化細(xì)菌乳酸菌根瘤菌衣藻能源氧氣、NH3分解乳酸固定N2利用光能碳源CO2糖類(lèi)糖類(lèi)CO2氮源NH3N2N2NOeq\o\al(－,3)代謝類(lèi)型自養(yǎng)需氧型異養(yǎng)厭氧型異養(yǎng)需氧型自養(yǎng)需氧型A.硝化細(xì)菌和乳酸菌 B．乳酸菌與根瘤菌C．根瘤菌與衣藻 D．硝化細(xì)菌與衣藻12．若在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入瓊脂這一理想的凝固劑，對(duì)這一說(shuō)法不正確的是()A．不被所培養(yǎng)的微生物分解利用，對(duì)所培養(yǎng)的微生物無(wú)毒害作用B．在微生物生長(zhǎng)溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài)C．瓊脂凝固點(diǎn)溫度低，利于微生物的生長(zhǎng)D．凝固劑在滅菌過(guò)程中不會(huì)被破壞，透明度好，凝固力強(qiáng)13．關(guān)于滅菌和消毒的不正確理解是()A．滅菌是指殺滅環(huán)境中一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子B．二者實(shí)質(zhì)上是相同的C．接種環(huán)用灼燒法滅菌D．常用滅菌法有加熱法、紫外線(xiàn)法、化學(xué)藥品法等14．為了保持菌種的純凈需要進(jìn)行菌種的保藏，下列有關(guān)敘述不正確的是()A．對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法B．臨時(shí)保藏的菌種一般是接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上C．臨時(shí)保藏的菌種容易被污染或產(chǎn)生變異D．對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用－4℃15.如圖是微生物平板劃線(xiàn)示意圖，劃線(xiàn)的順序?yàn)?→2→3→4→5。下列操作方法正確的是()A．操作前不用做任何處理B．劃線(xiàn)操作必須在火焰上進(jìn)行C．在5區(qū)域中才可以得到所需菌落D．在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線(xiàn)前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌二、非選擇題16．下表為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的成分列表，據(jù)此回答：成分牛肉膏蛋白胨NaClH2O含量0.5g1g0.5g100mL(1)蛋白胨在培養(yǎng)基中的作用是________________________________________________________________________。(2)要用此材料配制觀(guān)察細(xì)菌菌落狀況的培養(yǎng)基，還需添加的成分是________，如________。(3)表中各成分含量確定的原則是________________________________________________________________________。(4)培養(yǎng)基配制好后，分裝前應(yīng)進(jìn)行的工作是________。(5)從配制培養(yǎng)基直到培養(yǎng)完成，所采用的預(yù)防雜菌污染的方法是________________________________________________________________________。(6)在培養(yǎng)基凝固前要擱置斜面，目的是________________________________________________________________________。17．在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)一種廣泛使用的除草劑(含氮有機(jī)化合物)在土壤中不易降解，長(zhǎng)期使用可污染土壤。為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，可按下面程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌(已知該除草劑在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明。)(1)制備土壤浸出液時(shí)，為避免菌體濃度過(guò)高，需將浸出液進(jìn)行________處理。(2)要從長(zhǎng)期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，從物理性質(zhì)、用途方面來(lái)看，上述培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基的特點(diǎn)是________。(3)在劃線(xiàn)培養(yǎng)時(shí)，只有很少菌落出現(xiàn)，大部分細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)的主要原因是________________________________或有氧條件抑制了這些細(xì)菌的生長(zhǎng)。(4)在固體培養(yǎng)基上形成的菌落中，無(wú)透明帶菌落利用的氮源主要是________，有透明帶菌落利用的氮源主要是________，據(jù)此可篩選出目的菌。(5)科研人員用放射線(xiàn)處理該細(xì)菌獲得兩個(gè)突變株A和B，然后對(duì)突變株A和B進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下表所示：接種的菌種一般培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)處理及結(jié)果A不生長(zhǎng)添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲，能生長(zhǎng)B不生長(zhǎng)添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙，能生長(zhǎng)A＋B能生長(zhǎng)不添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲、乙就能生長(zhǎng)突變株A不能在一般培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的原因是________________________。突變株A和B混合在一起接種于一般培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)的最可能原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。18．2022年諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予兩位澳大利亞的醫(yī)生馬歇爾和沃倫，以表彰他們發(fā)現(xiàn)幽門(mén)螺桿菌及其在胃炎等疾病中所起的作用。(1)1974年沃倫在一份胃黏膜活體標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)有無(wú)數(shù)的細(xì)菌緊貼著胃黏膜上皮，這種細(xì)菌就是幽門(mén)螺桿菌，其繁殖方式是________，胃黏膜上皮細(xì)胞與細(xì)菌細(xì)胞結(jié)構(gòu)相比，主要區(qū)別是前者無(wú)________。(2)不同微生物有各自的代謝特點(diǎn)，人們常據(jù)此分離鑒別不同種類(lèi)的微生物。實(shí)驗(yàn)室有兩個(gè)菌種：胱氨酸依賴(lài)型細(xì)菌(無(wú)胱氨酸不能生長(zhǎng))，甲基營(yíng)養(yǎng)細(xì)菌(只能利用甲醇、甲烷作碳源)，但試管上標(biāo)簽脫落。某同學(xué)的鑒別思路是配制3個(gè)培養(yǎng)基，只接種其中的任一菌種，根據(jù)生長(zhǎng)狀況將其鑒別出來(lái)，另一種自然鑒別出來(lái)。請(qǐng)根據(jù)這一思路完成實(shí)驗(yàn)方案。實(shí)驗(yàn)步驟：第一步：在兩個(gè)菌種的試管上分別標(biāo)記A、B；第二步：配制不含胱氨酸和甲基營(yíng)養(yǎng)物的培養(yǎng)基，分別倒入3個(gè)培養(yǎng)皿中，標(biāo)上1、2、3，________________________________________________________________________________________________________________________________________________；第三步：______________________________________________________________________________________________________________________________________________。結(jié)果分析：①_______________________________________________________________________________________________________________________________________________。②________________________________________________________________________________________________________________________________________________。和其他微生物的培養(yǎng)一樣，第二步和第三步中都應(yīng)注意________操作，否則將導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。(3)第二步中倒平板及對(duì)菌種純化的說(shuō)法正確的是()A．倒平板時(shí)左手將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿蓋打開(kāi)，右手將錐形瓶中培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿(約10～20mL)，左手立即蓋上培養(yǎng)皿蓋B．使用已滅菌的接種環(huán)，使用完后不需要再滅菌C．稀釋涂布平板時(shí)要將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面D．涂布器用火焰灼燒滅菌19．人們觀(guān)察發(fā)現(xiàn)，在青霉菌生長(zhǎng)之處，很難找到金黃色葡萄球菌等細(xì)菌，針對(duì)此現(xiàn)象，有人提出了化學(xué)拮抗的觀(guān)點(diǎn)，即青霉菌產(chǎn)生了一種化學(xué)物質(zhì)抑制金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)繁殖。試設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)探究青霉菌與金黃色葡萄球菌之間是否存在這種關(guān)系。(1)你的實(shí)驗(yàn)假設(shè)是________________________________________________________________________。(2)主要實(shí)驗(yàn)步驟：①制備適合細(xì)菌的培養(yǎng)基兩份，并編號(hào)A和B，向A中接種青霉菌，并將A、B培養(yǎng)基置于適宜溫度下培養(yǎng)；②____________________________________________________；③____________________________________________________；④觀(guān)察________________________________________________。(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果預(yù)測(cè)與分析：①________________________________________________________________________________________________________________________________________________；②________________________________________________________________________________________________________________________________________________。參考答案雙基限時(shí)練(四)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)一、選擇題1．解析對(duì)于異養(yǎng)微生物而言，含C、H、O、N的有機(jī)化合物既是碳源又是氮源；CO2是自養(yǎng)細(xì)菌的碳源但并不提供能量；CO2和N2是無(wú)機(jī)物可作為微生物的碳源和氮源；硝化細(xì)菌的氮源是氨，同時(shí)氨氧化也是硝化細(xì)菌的能量來(lái)源。答案D2．解析自養(yǎng)微生物碳源為無(wú)機(jī)物，不能作為能源，能源應(yīng)是光能(如光合細(xì)菌)或氧化無(wú)機(jī)物釋放的化學(xué)能(如硝化細(xì)菌)。答案B3．解析接種用具、器皿、空氣、及操作者手上、衣服等都帶有微生物，都有污染的可能，都要進(jìn)行消毒與滅菌。培養(yǎng)基在50℃答案C4．解析培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌；培養(yǎng)皿能耐高溫，需用干熱滅菌；接種環(huán)可用灼燒滅菌達(dá)到迅速?gòu)氐椎臏缇Ч粚?shí)驗(yàn)操作者的雙手可用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒，如用酒精擦拭雙手；空氣可用紫外線(xiàn)消毒；為不破壞其營(yíng)養(yǎng)成分，對(duì)牛奶可采用巴氏消毒法。答案A5．解析獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是無(wú)菌技術(shù)，以防止外來(lái)雜菌的污染；滅菌只是無(wú)菌技術(shù)的一個(gè)方面；接種方法和培養(yǎng)不能防止雜菌的污染。答案D6．解析用不同稀釋度的菌液接種，形成菌落情況不同，只有稀釋度足夠大，聚集在一起的微生物被分散為單個(gè)個(gè)體時(shí)，才能在培養(yǎng)基上形成單個(gè)菌落。答案D7．解析整個(gè)倒平板過(guò)程要防止外來(lái)雜菌的影響，因此，滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁，打開(kāi)的錐形瓶口要迅速通過(guò)火焰，培養(yǎng)皿不能完全打開(kāi)，只能打開(kāi)一條稍大于瓶口的縫，等平板冷卻冷凝后才可以倒過(guò)來(lái)放置。答案C8．解析實(shí)驗(yàn)中要注意設(shè)置對(duì)照組，未接種的培養(yǎng)基放入恒溫箱，通過(guò)觀(guān)察是否有菌落來(lái)檢驗(yàn)其是否被雜菌污染或滅菌是否徹底。答案B9．解析稀釋涂布平板法是指將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。答案A10．解析帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后才能倒掉，不能通過(guò)簡(jiǎn)單的加熱后就倒掉，這樣達(dá)不到滅菌效果。答案C11．解析乳酸菌不能直接利用N2，且能量來(lái)源為葡萄糖，產(chǎn)生乳酸，根瘤菌進(jìn)行生命活動(dòng)所需能量來(lái)自糖類(lèi)等的分解。答案D12．解析理想的凝固劑應(yīng)具備以下條件：不被所培養(yǎng)的微生物分解利用，在微生物生長(zhǎng)的溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài)，凝固劑的凝固點(diǎn)不能太低，否則不利于微生物的生長(zhǎng)，如瓊脂凝固點(diǎn)為40℃答案C13．解析滅菌是徹底消滅該環(huán)境中一切微生物，而消毒只是對(duì)某些微生物進(jìn)行消滅，二者實(shí)質(zhì)上有很大不同。答案B14．解析對(duì)于頻繁使用的菌種，可采用臨時(shí)保藏的方法，首先接種到試管固體斜面培養(yǎng)基上，在合適溫度下培養(yǎng)，菌落長(zhǎng)成后，置于4℃冰箱中保藏。該方法保存時(shí)間不長(zhǎng)，易被污染和變異。對(duì)于需長(zhǎng)期保存的菌種，在－20答案D15.解析每次劃線(xiàn)前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線(xiàn)結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線(xiàn)時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線(xiàn)的末端，從而通過(guò)劃線(xiàn)次數(shù)的增加，使每次劃線(xiàn)時(shí)菌種的數(shù)目減少，以便得到菌落。劃線(xiàn)后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。答案D二、非選擇題16．解析蛋白胨中含大量蛋白質(zhì)降解而成的多肽類(lèi)物質(zhì)等，因而它提供了碳源、氮源和生長(zhǎng)因子，細(xì)菌的菌落是在固體培養(yǎng)基上形成的，因此需要加凝固劑，在各個(gè)環(huán)節(jié)中都需要無(wú)菌操作，分裝前要調(diào)整pH，以滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)繁殖的需要。答案(1)提供碳源、氮源、生長(zhǎng)因子(2)凝固劑瓊脂(3)所培養(yǎng)的微生物對(duì)各營(yíng)養(yǎng)成分的需求(4)調(diào)pH(5)高壓蒸汽滅菌、灼燒接種環(huán)、酒精棉球擦手、在火焰旁接種、棉塞塞試管口(6)擴(kuò)大接種面積17．解析(1)制備土壤浸出液時(shí)，為避免菌體濃度過(guò)高，需將浸出液進(jìn)行稀釋處理。(2)從物理性質(zhì)方面來(lái)看，題圖培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，從用途方面來(lái)看，該培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，該除草劑為含氮有機(jī)化合物，降解該除草劑的細(xì)菌可以除草劑為氮源。故該培養(yǎng)基中除加入除草劑外，不再含有其他氮源，以選擇出能降解該除草劑的細(xì)菌。(3)在以該除草劑為唯一氮源的培養(yǎng)基上，不能降解該除草劑的細(xì)菌是不能生長(zhǎng)的。(4)含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明，形成透明圈是由于該除草劑被某些細(xì)菌降解。(5)突變株A的生長(zhǎng)依賴(lài)于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲，突變株B的生長(zhǎng)依賴(lài)于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙。A、B混合培養(yǎng)都能生長(zhǎng)，最可能的原因是突變株A和B互為對(duì)方提供了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。答案(1)稀釋(2)在無(wú)氮固體培養(yǎng)基中添加了該除草劑(3)培養(yǎng)