2023學(xué)年高考生物模擬試卷注意事項(xiàng):1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號碼填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2．答題時請按要求用筆。3．請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試卷上答題無效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列關(guān)于人類與環(huán)境的敘述錯誤的是（）A．溫室效應(yīng)會引起永凍土融化 B．植樹造林是防治酸雨最有效的方法C．工業(yè)用水封閉化屬于水體污染治理的措施 D．大氣中臭氧層減少會使人體免疫功能減退2．早在19世紀(jì)末有醫(yī)生發(fā)現(xiàn)，癌癥患者手術(shù)后意外感染釀膿鏈球菌，其免疫功能增強(qiáng)、存活時間延長，從而開啟了"癌癥免疫療法”的大門。"癌癥免疫療法”是指通過自身免疫系統(tǒng)來抗擊癌細(xì)胞的療法。下列相關(guān)敘述正確的是A．患者免疫功能增強(qiáng)是因?yàn)獒勀撴溓蚓秩氚┘?xì)胞使其裂解死亡B．釀膿鏈球菌激活患者的非特異性免疫功能從而消滅癌細(xì)胞C．癌癥免疫療法主要是通過增強(qiáng)患者的細(xì)胞免疫功能來殺死癌細(xì)胞D．癌癥免疫療法通過改變癌細(xì)胞的遺傳信息來達(dá)到治療目的3．下圖是水稻花粉母細(xì)胞進(jìn)行分裂不同時期的顯微照片，據(jù)此判斷下列說法錯誤的是：（）A．圖A到D是減數(shù)分裂I，圖E和F為減數(shù)分裂IIB．有絲分裂會發(fā)生圖B和圖D所示的基因重組C．有絲分裂會發(fā)生圖E到F過程中染色體數(shù)目的加倍D．水稻花粉母細(xì)胞通過如圖分裂方式形成配子4．下列與生物進(jìn)化相關(guān)的說法正確的是A．種群基因型頻率發(fā)生改變一定會引起生物的進(jìn)化B．種群之間的生殖隔離必須經(jīng)長時間的地理隔離才能實(shí)現(xiàn)C．物種之間的共同進(jìn)化都是通過物種之間的生存斗爭實(shí)現(xiàn)的D．基因頻率改變的快慢與其控制的性狀和環(huán)境適應(yīng)的程度有關(guān)5．肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)分為格里菲斯的體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和艾弗里的體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A．格里菲斯認(rèn)為加熱殺死的S型細(xì)菌中含有某種基因使R型活細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型活細(xì)菌B．格里菲斯體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)沒有證明DNA是遺傳物質(zhì)C．艾弗里認(rèn)為DNA是使R型細(xì)菌產(chǎn)生穩(wěn)定遺傳變化的物質(zhì)，即DNA是遺傳物質(zhì)，而蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì)D．艾弗里最關(guān)鍵的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路是設(shè)法把DNA與蛋白質(zhì)分開，單獨(dú)地、直接地去觀察DNA或蛋白質(zhì)的作用。6．下列有關(guān)生命科學(xué)研究方法與發(fā)展過程的敘述，錯誤的是（）A．孟德爾對分離現(xiàn)象的解釋屬于假說—演繹法中的“作出假說”B．艾弗里、赫爾希與蔡斯等人探究DNA是遺傳物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路相似C．沃森和克里克研究DNA分子結(jié)構(gòu)時，主要運(yùn)用了數(shù)學(xué)模型建構(gòu)的方法D．科學(xué)家在證實(shí)DNA復(fù)制方式的實(shí)驗(yàn)中運(yùn)用了密度梯度離心法7．把一個細(xì)胞中的磷脂分子全部提取出來，在空氣和水界面上將它們鋪成單分子層(假定單分子間距離適當(dāng)且相等)。推測在下列細(xì)胞中，空氣和水界面上磷脂單分子層的表面積與原細(xì)胞的表面積之比最大和最小的細(xì)胞分別是()①洋蔥根尖成熟區(qū)表皮細(xì)胞②蛙的紅細(xì)胞③人體漿細(xì)胞④乳酸菌細(xì)胞⑤酵母菌細(xì)胞A．①②B．③④C．③②D．⑤④8．（10分）某DNA分子片段中共含有3000個堿基，其中腺嘌呤占35%?，F(xiàn)將該DNA分子片段用15N同位素標(biāo)記過的四種游離脫氧核苷酸為原料復(fù)制3次，將全部復(fù)制產(chǎn)物進(jìn)行密度梯度離心，得到圖甲結(jié)果；如果將全部復(fù)制產(chǎn)物加入解旋酶處理后再離心，則得到圖乙結(jié)果。下列有關(guān)分析正確的是（）A．X層與Y層中DNA分子質(zhì)量比大于1：3 B．Y層中含15N標(biāo)記的鳥嘌呤有3600個C．第二次復(fù)制結(jié)束時，含14N的DNA分子占1/2 D．W層與Z層的核苷酸數(shù)之比是4∶1二、非選擇題9．（10分）研究人員利用基因工程借助大腸桿菌生產(chǎn)人的生長激素?；卮鹣铝袉栴}。（1）借助PCR技術(shù)可在短時間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因，原因之一是利用了____酶。（2）要使目的基因在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并表達(dá)，需要借助質(zhì)粒載體，原因是______。將目的基因?qū)氪竽c桿菌，常用____處理細(xì)胞，使其成為感受態(tài)。（3）研究人員在大腸桿菌提取液中未能檢測到生長激素，但在細(xì)胞中檢測到生長激素基因，推測可能是轉(zhuǎn)錄或翻譯過程出錯，通過實(shí)驗(yàn)進(jìn)行判斷的方法及預(yù)期結(jié)果是________。（4）能否利用基因工程通過大腸桿菌直接生產(chǎn)人體細(xì)胞膜上的糖蛋白？請做出判斷并說明理由_________。10．（14分）CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯是一種對靶向基因進(jìn)行特定DNA修飾的技術(shù)，其原理是由一個向?qū)NA（sgRNA）分子引導(dǎo)Cas9蛋白到一個特定的基因位點(diǎn)進(jìn)行切割。受此機(jī)制啟發(fā)，科學(xué)家們通過設(shè)計(jì)sgRNA中堿基的識別序列，即可人為選擇DNA上的任一目標(biāo)位點(diǎn)進(jìn)行切割（見下圖）。（1）從CRISPR/Cas9系統(tǒng)作用示意圖看，能夠行使特異性識別DNA序列并切割特定位點(diǎn)功能的分子是___________，其類似于基因工程中__________的作用。（2）CCR5基因是人體的正?；颍渚幋a的細(xì)胞膜通道蛋白CCR5是HIV入侵T淋巴細(xì)胞的主要輔助受體之一?？蒲腥藛T依據(jù)_____________的部分序列設(shè)計(jì)sgRNA序列，導(dǎo)入骨髓_________細(xì)胞中，構(gòu)建sgRNA-Cas9復(fù)合體，以實(shí)現(xiàn)對CCR5基因的定向切割，變異的CCR5蛋白無法裝配到細(xì)胞膜上，即可有效阻止HIV侵染新分化生成的T淋巴細(xì)胞。試分析與上述過程最接近的現(xiàn)代生物科技是________________。（3）CRISRP/Cas9基因編輯技術(shù)有時存在編輯對象出錯而造成脫靶，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)sgRNA的序列越短脫靶率越高。試分析脫靶最可能的原因是____________________________。（4）通過上述介紹，CRISPR/Cas9系統(tǒng)的基因編輯技術(shù)在______________等方面有廣闊的應(yīng)用前景。（至少答出兩點(diǎn)）11．（14分）森林生態(tài)系統(tǒng)主要以高大的喬木為主，同時擁有豐富的其他動植物資源，物種多樣性程度較高。回答下列問題：（1）森林生態(tài)系統(tǒng)中的苔蘚、油松、松鼠、紅隼等全部生物共同構(gòu)成了________________，其除了明顯的垂直結(jié)構(gòu)，有利于提高利用陽光等資源的能力之外，還具有_________結(jié)構(gòu)。其中油松等植物因體型大、數(shù)量多、生命力強(qiáng)而成為該地的________________。（2）若要調(diào)查該地區(qū)的物種數(shù)量，依據(jù)甲圖可知選取樣方的最佳面積為______________。（3）森林生態(tài)系統(tǒng)中的部分地區(qū)人工林純度較高，容易出現(xiàn)蟲災(zāi)。圖乙所示為林業(yè)部門對某次害蟲生物防治過程中種群數(shù)量變化的調(diào)查結(jié)果，由圖可知，該防治依據(jù)的原理是_______________，導(dǎo)致害蟲種群數(shù)量下降的直接原因是________________。12．下表是某山區(qū)在農(nóng)田退耕后，第1．10及20年的群落變化。請回答下列問題。類型1年群落10年群落20年群落優(yōu)勢種物種數(shù)優(yōu)勢種物種數(shù)優(yōu)勢種物種數(shù)草本青蒿262418灌木9馬桑1613喬木111松樹23（1）20年間，發(fā)生在退耕農(nóng)田上的群落演替經(jīng)歷了__________三個階段。從表中數(shù)據(jù)可以看出，群落演替的實(shí)質(zhì)是____________________。（2）20年間，該生態(tài)系統(tǒng)的物種豐富度__________(填增大、減小或不變)。在用樣方法調(diào)查優(yōu)勢種的種群密度時，為減小調(diào)查誤差，應(yīng)注意____________________(答出兩點(diǎn)即可)。（3）20年間，退耕農(nóng)田上的植物群落在垂直方向上分層現(xiàn)象越來越明顯，這種變化提高了__________。（4）我國提出大力推進(jìn)生態(tài)文明建設(shè)，解決生態(tài)系統(tǒng)退化問題。請從生態(tài)功能的角度分析，退耕還林的意義是____________________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

（1）臭氧層破壞原因：空氣中的氟利昂等物質(zhì)的大量排放；危害：臭氧層破壞后，到達(dá)地球表面的紫外線將增加，給人類健康和生態(tài)環(huán)境帶來危害（2）酸雨形成原因：主要是硫和氮的氧化物溶于雨水而降落至土壤或水體中，酸雨的pH＜5.6（3）水污染表現(xiàn)：富營養(yǎng)化；結(jié)果：若表現(xiàn)在海洋中稱為赤潮，若表現(xiàn)在湖泊等淡水流域稱為水華?！驹斀狻緼、溫室效應(yīng)會引起全球氣候變暖，永凍土將會融化，造成廣大區(qū)域內(nèi)凍土公路、鐵路和民用建筑的破壞，A正確；B、植樹造林是防治溫室效應(yīng)最有效的措施；防治酸雨最有效的辦法是限制二氧化硫和一氧化氮的排放量，或者從燃料中把這些物質(zhì)去掉，B錯誤；C、嚴(yán)格控制污染源、發(fā)展生產(chǎn)工藝無害化、工業(yè)用水封閉化、采用無水造紙法、無水印染法和建立污水處理廠等措施均屬于水體污染治理的措施，C正確；D、臭氧能吸收對人體和生物有致癌和殺傷作用的紫外線、X射線和γ射線，從而保護(hù)人類和其他生物免受短波輻射的傷害，大氣中臭氧層減少會使人體免疫功能減退，D正確。故選B?！军c(diǎn)睛】本題考查全球性生態(tài)環(huán)境問題，要求考生識記全球性生態(tài)環(huán)境問題的類型、產(chǎn)生原因、危害及緩解措施等基礎(chǔ)知識，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。2、C【解析】

1、免疫是指正常機(jī)體所具有的識別“自己”排除“非己”的能力。免疫分為非特異性免疫和特異性免疫。2、免疫系統(tǒng)具有防衛(wèi)、監(jiān)控和清除功能。免疫系統(tǒng)監(jiān)控并清除體內(nèi)衰老或因其他因素而被破壞的細(xì)胞，以及癌變的細(xì)胞?！驹斀狻緼、患者免疫功能增強(qiáng)是因?yàn)獒勀撴溓蚓秩雽?dǎo)致免疫功能增強(qiáng)，效應(yīng)T細(xì)胞攻擊癌細(xì)胞，A錯誤；B、釀膿鏈球菌激活患者的特異性免疫功能從而消滅癌細(xì)胞，錯誤；C、由題意可知，癌癥免疫療法主要是通過增強(qiáng)患者的細(xì)胞免疫功能來殺死癌細(xì)胞，C正確；D、癌癥免疫療法通過直接殺死癌細(xì)胞來達(dá)到治療目的，D錯誤。故選C。3、B【解析】

分析圖示可知，A細(xì)胞為減數(shù)第一次分裂前期，B細(xì)胞為同源染色體聯(lián)會形成的四分體時期，C細(xì)胞為減數(shù)第一次分裂中期，同源染色體排列在赤道板兩側(cè)，D細(xì)胞為同源染色體分離的減數(shù)第一次分裂后期，E細(xì)胞為減數(shù)第二次分裂中期，染色體著絲點(diǎn)排列在赤道板上，F(xiàn)細(xì)胞為減數(shù)第二次分裂后期，著絲點(diǎn)分裂，染色單體分離?！驹斀狻緼、根據(jù)上述分析可知，圖A到D是減數(shù)第一次分裂過程，圖E和F為減數(shù)第二分裂圖像，A正確；B、圖B和圖D為減數(shù)分裂，不是有絲分裂，四分體時期的交叉互換和減數(shù)第一次分裂后期非同源染色體的自由組合都會導(dǎo)致基因重組，B錯誤；C、圖E到F過程為著絲點(diǎn)分裂過程，有絲分裂后期也會發(fā)生著絲點(diǎn)斷裂，姐妹染色單體分離，染色體加倍現(xiàn)象，C正確；D、水稻花粉母細(xì)胞通過如圖的減數(shù)分裂方式形成配子，D正確。故選B。4、D【解析】

I、現(xiàn)代生物進(jìn)化理論認(rèn)為：生物進(jìn)化的實(shí)質(zhì)是種群基因頻率的改變，變異為生物進(jìn)化提供原材料，自然選擇通過定向改變種群的基因頻率而使生物朝著一定的方向進(jìn)化。II、隔離是新物種形成的必要條件，包括地理隔離和生殖隔離，地理隔離是指同一種生物由于地理上的障礙而分成不同的種群，使得種群間不能發(fā)生基因交流的現(xiàn)象，生殖隔離是指由于各方面的原因，使親緣關(guān)系接近的類群之間在自然條件下不交配，即使能交配也不能產(chǎn)生后代或不能產(chǎn)生可育性后代的現(xiàn)象，新物種的形成不一定會經(jīng)過地理隔離，但一定會經(jīng)過生殖隔離?！驹斀狻糠N群基因頻率的改變一定引起生物的進(jìn)化，并非基因型頻率的改變，A錯誤；生殖隔離的產(chǎn)生不一定需要地理隔離，例如植物的多倍體的產(chǎn)生,沒有經(jīng)過地理隔離,只是由于環(huán)境的問題導(dǎo)致了染色體加倍，B錯誤；物種之間的共同進(jìn)化是通過不同物種之間或生物與無機(jī)環(huán)境之間的生存斗爭實(shí)現(xiàn)的，C錯誤；基因頻率改變的快慢與其控制的性狀和環(huán)境適應(yīng)的程度有關(guān)，D正確；故選D?！军c(diǎn)睛】本題的知識點(diǎn)是生物進(jìn)化的實(shí)質(zhì)，自然選擇與生物進(jìn)化的關(guān)系，旨在考查學(xué)生對現(xiàn)代生物進(jìn)化理論內(nèi)容的理解和掌握。5、A【解析】

肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)包括格里菲斯體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和艾弗里體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，其中格里菲斯體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明S型細(xì)菌中存在某種“轉(zhuǎn)化因子”，能將R型細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型細(xì)菌；艾弗里體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明DNA是遺傳物質(zhì)。【詳解】A、格里菲斯認(rèn)為加熱殺死的S型細(xì)菌中含有某種轉(zhuǎn)化因子使R型活細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型活細(xì)菌，A錯誤；B、格里菲斯體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)沒有證明DNA是遺傳物質(zhì)，B正確；C、艾弗里實(shí)驗(yàn)證明了DNA是遺傳物質(zhì)，而蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì)，C正確；D、艾弗里最關(guān)鍵的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路是設(shè)法把DNA與蛋白質(zhì)分開，單獨(dú)地、直接地去觀察DNA或蛋白質(zhì)的作用，D正確。故選A。6、C【解析】

1、孟德爾發(fā)現(xiàn)遺傳定律用了假說-演繹法，其基本步驟：提出問題→作出假說→演繹推理→實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證（測交實(shí)驗(yàn)）→得出結(jié)論。

2、肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)包括格里菲思體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和艾弗里體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，其中格里菲斯體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明S型細(xì)菌中存在某種“轉(zhuǎn)化因子”，能將R型細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型細(xì)菌；艾弗里體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明DNA是遺傳物質(zhì)。

3、T2噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)步驟：分別用35S或32P標(biāo)記噬菌體→噬菌體與大腸桿菌混合培養(yǎng)→噬菌體侵染未被標(biāo)記的細(xì)菌→在攪拌器中攪拌，然后離心，檢測上清液和沉淀物中的放射性物質(zhì)。

4、沃森和克里克用建構(gòu)物理模型的方法研究DNA的結(jié)構(gòu)。

5、薩頓運(yùn)用類比推理的方法提出基因在染色體的假說，摩爾根運(yùn)用假說演繹法證明基因在染色體上。【詳解】A、孟德爾對分離現(xiàn)象的解釋屬于假說-演繹法中的“作出假說”，A正確；

B、艾弗里、赫爾希與蔡斯等探究DNA是遺傳物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路相似，都是將物質(zhì)分開，單獨(dú)觀察它們的作用，B正確；

C、沃森和克里克研究DNA分子結(jié)構(gòu)時，主要運(yùn)用了物理模型建構(gòu)的方法，C錯誤；

D、科學(xué)家在證實(shí)DNA復(fù)制方式的實(shí)驗(yàn)中運(yùn)用了密度梯度離心法，D正確。

故選C。【點(diǎn)睛】本題考查人們對遺傳物質(zhì)的探究歷程，對于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)采用的方法、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象及結(jié)論等，需要考生在平時的學(xué)習(xí)過程中注意積累。7、B【解析】

1.洋蔥根尖成熟區(qū)表皮細(xì)胞、蛙的紅細(xì)胞、酵母菌細(xì)胞和人體漿細(xì)胞都是真核細(xì)胞，乳酸菌細(xì)胞是原核細(xì)胞，真核細(xì)胞具有細(xì)胞膜、核膜和細(xì)胞器膜，而原核細(xì)胞只有細(xì)胞膜。2.人體漿細(xì)胞能分泌大量的抗體，因此其細(xì)胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體多，膜面積大?！驹斀狻苛字瑔畏肿訉拥谋砻娣e與原細(xì)胞表面積之比最大的細(xì)胞特征是細(xì)胞相對比較小，而且細(xì)胞中生物膜結(jié)構(gòu)豐富。題干所列的幾種細(xì)胞中，人體漿細(xì)胞主要產(chǎn)生抗體，細(xì)胞中有豐富的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，符合此特點(diǎn)。乳酸菌細(xì)胞僅具有細(xì)胞膜，細(xì)胞內(nèi)沒有膜結(jié)構(gòu)，是幾種細(xì)胞中磷脂單分子層的表面積與原細(xì)胞表面積之比最小的細(xì)胞，A、C、D不合題意，B符合題意?！军c(diǎn)睛】本題考查生物膜系統(tǒng)、原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)的異同，要求考生識記原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)的異同，明確原核細(xì)胞的生物膜只有細(xì)胞膜；識記細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能，明確漿細(xì)胞具有較強(qiáng)的分泌功能，細(xì)胞中的膜結(jié)構(gòu)多，膜面積大。8、C【解析】

根據(jù)題意和圖示分析可知：DNA分子中含有3000個堿基，腺嘌呤占35%，則A=T=1050個，G=C=450個；DNA分子以15N同位素標(biāo)記的游離脫氧核苷酸為原料復(fù)制3次，得8個DNA分子，其中2個含有14N和15N，6個只含15N。由于DNA分子為雙鏈結(jié)構(gòu)，所以加入解旋酶再離心，共得到2個含有14N的DNA單鏈，14個含有15N的DNA單鏈?！驹斀狻緼、據(jù)分析可知，X層為2個含有14N和15N的DNA分子，Y層為6個只含15N的DNA分子，因此X層與Y層中DNA分子質(zhì)量比小于1：3，A錯誤；B、Y層為6個只含15N的DNA分子，一個DNA分子含有鳥嘌呤450個，則Y層中含15N標(biāo)記的鳥嘌呤共有450×6=2700個，B錯誤；C、DNA是半保留復(fù)制，第二次復(fù)制結(jié)束，得到的4個DNA分子中2個含有14N，因此含14N的DNA分子占1/2，C正確；D、W層有14條核苷酸鏈，Z層有2條核苷酸鏈，W層與Z層的核苷酸數(shù)之比是7∶1，D錯誤。故選C。二、非選擇題9、Taq（耐高溫的DNA聚合）重組質(zhì)粒能在宿主細(xì)胞中不被分解，有復(fù)制原點(diǎn)和啟動子，目的基因能被復(fù)制和表達(dá)Ca2+使用分子雜交技術(shù)檢測相應(yīng)的mRNA是否存在，若有雜交條帶出現(xiàn)說明翻譯出錯；若無雜交條帶出現(xiàn)，則說明轉(zhuǎn)錄出錯不能，因?yàn)榇竽c桿菌無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體，無法對蛋白質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步加工【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

1、目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

4、目的基因的檢測與鑒定：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）PCR技術(shù)可在短時間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因，是因?yàn)槭褂昧藷岱€(wěn)定性DNA聚合酶，即Taq酶。（2）質(zhì)粒在宿主細(xì)胞中不被分解，有復(fù)制原點(diǎn)和啟動子，用質(zhì)粒做載體可使目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)復(fù)制和表達(dá)；將目的基因?qū)氪竽c桿菌，可將大腸桿菌經(jīng)過鈣離子處理，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，易于吸收外源DNA。（3）若要驗(yàn)證是轉(zhuǎn)錄過程還是翻譯過程出錯，可以使用分子雜交技術(shù)檢測相應(yīng)的mRNA是否存在。若有雜交條帶出現(xiàn)，說明轉(zhuǎn)錄出了mRNA，則應(yīng)為翻譯出錯；若無雜交條帶出現(xiàn)，則說明轉(zhuǎn)錄出錯。（4）因?yàn)榇竽c桿菌無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體，無法對蛋白質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步加工，因此不能利用基因工程通過大腸桿菌直接生產(chǎn)人體細(xì)胞膜上的糖蛋白?！军c(diǎn)睛】本題以“借助大腸桿菌生產(chǎn)人的生長激素”為題材，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，識記PCR技術(shù)的條件、過程等，能結(jié)合題中信息準(zhǔn)確答題。10、向?qū)NA（sgRNA）分子和Cas9蛋白限制酶CCR5基因造血干蛋白質(zhì)工程其他DNA序列也含有與向?qū)NA（sgRNA）互補(bǔ)配對的序列，造成向?qū)NA（sgRNA）錯誤結(jié)合而脫靶基因治療、動植物育種（基因水平）、研究基因功能【解析】

根據(jù)題意分析可知，CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯技術(shù)是利用該基因表達(dá)系統(tǒng)中的引導(dǎo)RNA能識別并結(jié)合特定的DNA序列，從而引導(dǎo)Cas9蛋白結(jié)合到相應(yīng)位置并剪切DNA，最終實(shí)現(xiàn)對靶基因序列的編輯。由于其他DNA序列也含有與引導(dǎo)RNA互補(bǔ)配對的序列，造成引導(dǎo)RNA錯誤結(jié)合而出現(xiàn)脫靶現(xiàn)象?！驹斀狻浚?）由題干信息“向?qū)NA能識別并結(jié)合特定的DNA序列，從而引導(dǎo)Cas9蛋白結(jié)合到相應(yīng)位置并剪切DNA”，說明能夠行使特異性識別DNA序列并切割特定位點(diǎn)功能的分子是向?qū)NA（sgRNA）分子和Cas9蛋白，功能類似于基因工程中限制酶的作用。（2）根據(jù)題意，可利用Cas9酶對CCR5基因進(jìn)行編輯，因此sgRNA序列需要與CCR5基因上部分堿基互補(bǔ)配對，從而精準(zhǔn)定位到CCR5基因進(jìn)行編輯，故設(shè)計(jì)SgRNA序列時需要根據(jù)CCR5基因的核苷酸序列，導(dǎo)入骨髓造血干細(xì)胞中，構(gòu)建sgRNA-Cas9復(fù)合體，以實(shí)現(xiàn)對CCR5基因的定向切割。CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)是一種精準(zhǔn)改變目標(biāo)DNA序列的技術(shù)，與其比較接近的是蛋白質(zhì)工程。（3）CRISRP/Cas9基因編輯技術(shù)有時存在編輯對象出錯而造成“脫靶”，其原因是其它DNA序列也含有與向?qū)NA互補(bǔ)的序列，造成向?qū)NA錯誤結(jié)合而出現(xiàn)脫靶現(xiàn)象。（4）通過上述介紹，基于CRISPR/Cas9系統(tǒng)的基因編輯技術(shù)在基因治療、基因水平進(jìn)行動植物的育種、研究基因的功能等等方面有廣闊的應(yīng)用前景?！军c(diǎn)睛】本題考查了基因工程的有關(guān)知識，要求考生能夠掌握基因工程的操作步驟，識記基因工程的操作工具，能夠結(jié)合圖示以及所學(xué)知識準(zhǔn)確