ICS 65.020.01CCSB38

DB61陜 西 省 地 方 標 準DB61/T1517—2021靈芝固體菌種生產技術規(guī)范TechnicalspecificationforproductionofGanodermalucidumsolidspawn20212021121720220117陜西省市場監(jiān)督管理局發(fā)布DB61/T1517-2021DB61/T1517-2021DB61/T1517-2021DB61/T1517-2021目 次前言 II范圍 1規(guī)范性引用文件 1術語和定義 1生產條件 2生產工藝 2菌種生產檔案 4附錄A（規(guī)范性）常用培養(yǎng)基及其配方 5附錄B（規(guī)范性）常用原種和栽培種培養(yǎng)基及其配方 6參考文獻 7II前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由陜西省農業(yè)農村廳提出并歸口。本文件起草單位：陜西省微生物研究所、柞水縣科技開發(fā)中心、寧強縣真菌研究所、陜西中科菌業(yè)科技有限公司。本文件由陜西省微生物研究所負責解釋。本文件首次發(fā)布。聯(lián)系信息如下：單位：陜西省微生物研究所電話址：陜西省西安市西影路76號郵編：710043IIII靈芝固體菌種生產技術規(guī)范范圍本文件規(guī)定了靈芝固體菌種生產的術語和定義、生產條件、生產工藝、菌種生產檔案的要求。本文件適用于靈芝固體菌種的生產。規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單適用于本文件。GB/T12728 食用菌術語NY/T528 食用菌菌種生產技術規(guī)程NY/T1742 食用菌菌種通用技術要求術語和定義GB/T12728GB/T12728界定的術語和定義適用于本文件。3.1母種stockculture經各種方法選育得到的具有結實性的菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物，也稱一級種、試管種。[來源：GB/T12728——2006，2.5.7]3.2原種pre-culturespawn由母種移植、擴大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物，也稱二級種。[來源：GB/T12728—2006，2.5.8]3.3栽培種spawn[來源：GB/T12728—2006，2.5.9]3.4固體菌種solidspawn生長在固體培養(yǎng)料上的菌種。1[來源：GB/T12728—2006，2.5.31]生產條件技術人員應按照《食用菌菌種管理辦法》的規(guī)定配備生產技術人員和檢驗人員。生產環(huán)境要求應符合NY/T528中4.2的規(guī)定。廠房設置和布局應符合NY/T528中4.3的規(guī)定?；驹O備應配備稱量用具、蒸煮設備、母種培養(yǎng)基分裝設備、拌料機、裝袋機、高壓滅菌和常壓滅菌設備、發(fā)電機、種源應符合NY/T528中4.5的規(guī)定。應符合NY/T528中4.5的規(guī)定。5生產工藝菌種分類固體菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）、栽培種（三級種）。母種生產應符合NY/T528中4.7.1.2的規(guī)定。備料見附錄A。培養(yǎng)基配料、分裝選無青皮未發(fā)芽的新鮮馬鈴薯洗凈去皮稱取200g切成薄片或小塊加水1200mL煮沸20min～30煮至熟而不爛用先預濕的4層紗布過濾濾液中加入20g葡萄糖攪拌溶化再加入20 g瓊脂邊煮邊攪拌至瓊脂全部溶化。加水定容至1000mL。分裝量為試管長度的1/5～1/4，管口保持干凈，最后塞上試管塞。將分裝好的試管直立放入內鍋，用牛皮紙或報紙包住試管塞。高壓滅菌2121℃滅菌30min。冷卻滅菌結束，自然降壓至零。斜面培養(yǎng)基制備降溫至50℃～60℃，將試管的一端斜放在1cm高的木條上擺出斜面，斜面頂端距試管口不少于5cm。斜面擺放完畢應迅速覆蓋棉布。滅菌效果檢查隨機抽取母種培養(yǎng)基總數(shù)的3%～5%，置于28℃～35℃恒溫條件培養(yǎng)48h，無微生物長出，即為滅菌合格。接種接種場地和工具的消毒按照NY/T528中4.7.7.2和4.7.7.3的規(guī)定對接種場地和工具嚴格消毒。接種操作應符合NY/T528中4.7.7的規(guī)定。培養(yǎng)培養(yǎng)溫度控制在23℃～26℃，通風避光培養(yǎng)。檢驗應符合NY/T1742中5.2.1的規(guī)定。原種、栽培種生產容器應符合NY/T528中4.7.1.3和4.7.1.4的規(guī)定。培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基配制見附錄B。所用原材料應符合NY/T528中4.7.2的規(guī)定。消毒應符合NY/T528中4.7.7.2和4.7.7.3的規(guī)定。接種應符合NY/T528中4.7.7的規(guī)定。培養(yǎng)培養(yǎng)溫度22℃～25℃，空氣相對濕度60%～70%，通風避光培養(yǎng)。35.3.6檢查第4d～5d、第7d～9d、第11d～12d逐袋（瓶）檢查，并及時剔除未萌發(fā)、已污染、生長不良等菌袋（瓶）。5.4留樣應符合NY/T528中4.7.13的規(guī)定。6菌種生產檔案應按照《食用菌菌種管理辦法》的規(guī)定，建立和保存菌種生產檔案。44附錄A（規(guī)范性）常用培養(yǎng)基及其配方PDA培養(yǎng)基（馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基）馬鈴薯200g（用浸出汁），葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000mL。CPDA培養(yǎng)基（綜合馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基）馬鈴薯200g（用浸出汁），葡萄糖20g，瓊脂20g，磷酸二氫鉀2g，硫酸鎂0.5g，水1000mL。加富馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基馬鈴薯200用浸出汁葡萄糖2010.5520mg，水1000mL。馬鈴薯麩皮葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基馬鈴薯馬鈴薯200g（用浸出汁），麩皮50g（用浸出汁），葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000mL。5附錄B（規(guī)范性）常用原種和栽培種培養(yǎng)基及其配方雜木屑棉籽殼培養(yǎng)基雜木屑40％，棉籽殼40％，麩皮18％，石膏1％，蔗糖1％，料水比1:1.2～1:1.4。木屑培養(yǎng)基雜木屑78％，麩皮20％，蔗糖1％，石膏1％，料水比1:1.2～1:1.4。木屑培養(yǎng)基雜木屑78％，麩皮13％，玉米粉7％，蔗糖1％，石膏1％，料水比1:1.2～1:1.4。棉籽殼培養(yǎng)基棉籽殼棉籽殼88％，麩