微生物無菌技術(shù)及儀器備

使用和維護(hù)2010.10~2010.1212/14/2022

微生物包括細(xì)菌、病毒、真菌以及一些小型的原生動(dòng)物等在內(nèi)的一大類生物群體，個(gè)體微小，與人類生活密切相關(guān)。廣泛涉及健康、醫(yī)藥、工農(nóng)業(yè)、環(huán)保等諸多領(lǐng)域。23發(fā)酵工程基因工程細(xì)胞工程酶工程微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)4微生物無菌技術(shù)及儀器設(shè)備使用和維護(hù)混合菌種的分離菌種保存及細(xì)菌形態(tài)觀察酵母菌的形態(tài)觀察及微生物直接計(jì)數(shù)霉菌的形態(tài)觀察葡萄酒的釀制實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目5實(shí)驗(yàn)要求1．課前認(rèn)真預(yù)習(xí)，明確本次實(shí)驗(yàn)的目的、要求、內(nèi)容、方法及步驟2．提前5-10min進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，檢查實(shí)驗(yàn)所需物品是否齊全，做好實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作。3．實(shí)驗(yàn)時(shí)嚴(yán)肅認(rèn)真，根據(jù)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)要求進(jìn)行操作，仔細(xì)觀察和記錄，并進(jìn)行獨(dú)立思考，按時(shí)完成實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和實(shí)驗(yàn)報(bào)告。4．保持實(shí)驗(yàn)室安靜，實(shí)驗(yàn)時(shí)不得隨意走動(dòng)和談笑。室內(nèi)嚴(yán)禁吸煙、不允許在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)接聽手機(jī)65．保持實(shí)驗(yàn)室清潔整齊，書包、衣帽等應(yīng)放在指定位置，不能置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上；一切實(shí)驗(yàn)用具用完后擦洗干凈，放回原處。6．愛護(hù)實(shí)驗(yàn)室一切儀器設(shè)備，珍惜藥品及一切消耗用品，節(jié)約水、電。7．實(shí)驗(yàn)完畢后，值日生值日。值日工作范圍包括：關(guān)閉水、電、門、窗；查看水池，實(shí)驗(yàn)臺(tái)，桌椅，地面是否干凈整齊；最后在值日生記錄本上登記值日情況，再交于老師簽字后方可離開。（各班負(fù)責(zé)人分配值日生，并將名單交給老師處一份備案。）7考核辦法實(shí)驗(yàn)習(xí)慣10％：

遲到1次扣1分，早退扣1分，不穿實(shí)驗(yàn)服者扣1分，不寫預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)報(bào)告扣5分，值日生必須最后走，早走者扣1分。實(shí)驗(yàn)報(bào)告20％：自己歸納總結(jié)，格式規(guī)范。按時(shí)交報(bào)告，遲交報(bào)告者要扣分。實(shí)驗(yàn)操作30%：

實(shí)驗(yàn)思路清晰，各項(xiàng)操作都能認(rèn)真練習(xí)并熟練掌握，各組員之間協(xié)調(diào)合理，配合得當(dāng)。實(shí)驗(yàn)考試成績(jī)30％：筆試（實(shí)驗(yàn)結(jié)束1至2周后考試）預(yù)習(xí)報(bào)告

10％：

遲到、早退、缺一次實(shí)驗(yàn)以上者或考試不及格者均不能得優(yōu)秀，缺兩次實(shí)驗(yàn)的不能得良好，缺該課程1/3以上者或不參加實(shí)驗(yàn)考試者，均沒有實(shí)驗(yàn)成績(jī)。8實(shí)驗(yàn)報(bào)告的格式：（1）實(shí)驗(yàn)名稱（2）實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?）實(shí)驗(yàn)原理（4）實(shí)驗(yàn)步驟（5）實(shí)驗(yàn)結(jié)果9實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握包扎常用器材；2.掌握和運(yùn)用微生物實(shí)驗(yàn)中常用的儀器和設(shè)備10微生物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)操作基本本技術(shù)制作棉塞和和包扎常用用的實(shí)驗(yàn)器器材（視頻頻）培養(yǎng)皿、移移液管、錐錐形瓶、試試管111）棉塞的制用途：①避免雜菌侵入②保證良好的通氣性能。2）舊報(bào)紙包扎扎：演示用途：①防止滅菌時(shí)時(shí)水蒸氣打打濕棉塞②②減緩培養(yǎng)基基水分的蒸蒸發(fā)。12常用儀器設(shè)設(shè)備使用原原理及操作作滅菌鍋搖床（水浴浴、氣?。┡囵B(yǎng)箱無菌工作臺(tái)臺(tái)13滅菌鍋14適用于醫(yī)療療衛(wèi)生事業(yè)業(yè)，科研，，農(nóng)業(yè)等單單位，對(duì)醫(yī)醫(yī)療器械，，敷料，玻玻璃器皿，，溶液培養(yǎng)養(yǎng)基等進(jìn)行行消毒滅菌菌。供微生物學(xué)學(xué)實(shí)驗(yàn)、細(xì)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)實(shí)驗(yàn)、發(fā)發(fā)酵學(xué)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)、分子生生物實(shí)驗(yàn)等等學(xué)科使用用。15原理及使用用方法原理高壓蒸汽滅滅菌是將待待滅菌的物物品放在一一個(gè)密閉的的加壓滅菌菌鍋內(nèi)，通通過加熱，，使滅菌鍋鍋隔套間的的水沸騰而而產(chǎn)生蒸汽汽,待水蒸蒸汽急劇地地將鍋內(nèi)的的冷空氣從從排氣閥中中驅(qū)盡，然然后關(guān)閉排排氣閥，繼繼續(xù)加熱，，此時(shí)由于于蒸汽不能能溢出，而而增加了滅滅菌器內(nèi)的的壓力，從從而使沸點(diǎn)點(diǎn)增高，得得到高于100℃的的溫度。導(dǎo)導(dǎo)致菌體蛋蛋白質(zhì)凝固固變性而達(dá)達(dá)到滅菌的的目的。16使用方法：：一.開蓋向左轉(zhuǎn)動(dòng)手手輪數(shù)圈，，直至轉(zhuǎn)動(dòng)動(dòng)到頂，使使鍋蓋充分分提起，拉拉起左立柱柱上的保險(xiǎn)險(xiǎn)銷，向右右推開橫梁梁移開鍋蓋蓋。二.通電接通電源，，將控制面面板上的電電源開關(guān)按按至ON處處，此時(shí)欠欠壓蜂鳴器器響，顯示示本機(jī)鍋內(nèi)內(nèi)無壓力（（當(dāng)鍋內(nèi)壓壓力升至約約0.03Mpa時(shí)時(shí)蜂鳴器自自動(dòng)關(guān)閉）），控制面面板上的缺缺水位燈和和低水位燈燈均亮。低低水位（LOW紅燈燈）亮，蒸蒸發(fā)鍋內(nèi)屬屬斷水狀態(tài)態(tài)，缺水位位（LACK黃燈））亮，顯示示電源已正正常輸入本本機(jī)。17三.加水第一次使用用時(shí)加入約約8L的的純水，觀觀察控制面面板上的缺缺水位燈和和低水位燈燈相繼滅，，繼續(xù)加水水至高水位位燈（HIGH綠燈燈）亮，每每次使用時(shí)時(shí)需要補(bǔ)充充適量是純純水使高水水位燈亮。。如加水過過多的發(fā)現(xiàn)現(xiàn)內(nèi)膽中有有存水時(shí)，，應(yīng)開啟下下排氣閥放放去內(nèi)膽中中的多余水水量。四.堆放將包扎滅菌菌的物品放放入滅菌筐筐內(nèi)，各包包之間留有有空隙。18五.密封把橫梁推向向左立柱內(nèi)內(nèi)，橫梁必必須全部推推入立柱槽槽內(nèi)，手動(dòng)動(dòng)保險(xiǎn)銷自自動(dòng)下落鎖鎖住橫梁。。并將手輪輪向左旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)，使鍋蓋蓋向下壓緊緊鍋體，加加力使之充充分密合，，致使密封封開關(guān)處于于聯(lián)通狀態(tài)態(tài)。當(dāng)連鎖鎖燈亮?xí)r，，顯示容器器密封到位位。六.溫度、、時(shí)間的設(shè)設(shè)定設(shè)定溫度1.按動(dòng)一一下確認(rèn)鍵鍵，綠色數(shù)數(shù)顯在閃爍爍表示可以以進(jìn)行設(shè)定定狀態(tài)。2.按動(dòng)增增加鍵△或是減少鍵鍵▽，將溫度上調(diào)調(diào)或下調(diào)，，設(shè)定所需需溫度后再再按一下確確認(rèn)鍵。19設(shè)定時(shí)間1.按一下下確認(rèn)鍵將將溫度顯示示切換成時(shí)時(shí)間顯示狀狀態(tài)，綠色色數(shù)顯在閃閃爍表示可可以進(jìn)行設(shè)設(shè)定狀態(tài)，，前兩位為為小時(shí)，后后兩位為分分鐘。2.按動(dòng)動(dòng)增加鍵△或是減少鍵鍵▽，將溫度上調(diào)調(diào)或下調(diào)，，設(shè)定所需需溫度后再再按一下確確認(rèn)鍵。七.滅菌八.干燥需要迅速干干燥的物品品需要打開開安全閥或或?qū)⑴牌排潘y向左左旋轉(zhuǎn)至““開”位置置。九.啟蓋向左轉(zhuǎn)動(dòng)手手輪數(shù)圈，，直至轉(zhuǎn)動(dòng)動(dòng)到頂，使使鍋蓋充分分提起，拉拉起左立柱柱上的保險(xiǎn)險(xiǎn)銷，向右右推開橫梁梁移開鍋蓋蓋。20注意事項(xiàng)1.堆放滅滅菌物品時(shí)時(shí)，嚴(yán)禁堵堵塞安全閥閥和放氣閥閥的出氣孔孔，必須留留出空位保保證其空氣氣暢通，否否則安全閥閥和放氣閥閥因出氣堵堵塞不能工工作，造成成事故。2.滅菌液液體時(shí)，應(yīng)應(yīng)將液體灌灌裝在硬制制的耐熱玻玻璃瓶中，，以不超過過3/4體體積為好，，瓶口選用用棉花紗塞塞，切勿使使用未打孔孔的橡膠或或軟木塞。。3.滅菌液液體結(jié)束時(shí)時(shí)，不準(zhǔn)立立即釋放蒸蒸汽，必須須待壓力表表指針回零零位方可放放余汽。214.對(duì)不同同類型、不不同滅菌物物要求的物物品，如敷敷料和液體體等，切勿勿放在一起起滅菌，以以免造成損損失。5.滅菌終終了時(shí)，若若壓力表指指針已回復(fù)復(fù)零位，而而蓋不易開開啟時(shí)，則則可將放氣氣閥摘子置置于放氣方方汽。使外外界空氣進(jìn)進(jìn)入滅菌器器內(nèi)，真空空消除后，，蓋即可開開啟。6.平時(shí)應(yīng)應(yīng)將設(shè)備保保持清潔和和干燥，方方可延長(zhǎng)使使用年限，，橡膠密封封圈使用日日久會(huì)老化化，應(yīng)定期期更換。22搖床（氣浴浴、水?。┱袷幤鳎〒u搖床）是生生物、醫(yī)藥藥、衛(wèi)生等等行業(yè)用于于微生物細(xì)細(xì)胞組織生生長(zhǎng)的理想想培養(yǎng)裝置置。供微生物實(shí)實(shí)驗(yàn)、發(fā)酵酵學(xué)實(shí)驗(yàn)以以及植物細(xì)細(xì)胞培養(yǎng)。。目的：為了了增加空氣氣與發(fā)酵液液的接觸面面積，同時(shí)時(shí)可以是發(fā)發(fā)酵液保持持良好的混混合狀態(tài)。。23照片24原理及使用用方法原理水浴搖床：：水浴箱和和振蕩器相相結(jié)合組成成的水浴搖搖床，由水水提供水浴浴和恒溫環(huán)環(huán)境。氣浴搖床（（又稱空氣氣搖床）：：由恒溫培培養(yǎng)箱和振振蕩器相結(jié)結(jié)合生化儀儀器的，由由空氣提供供恒溫環(huán)境境。25使用方法a.將機(jī)器器背面的““斷路器““置于”““通”位置置b.將電源源開關(guān)置于于“∣”c.將旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)按鈕置于于“∣”2.旋鈕功功能按下旋鈕：：逐個(gè)進(jìn)入設(shè)設(shè)置溫度和和設(shè)定時(shí)間間界面（順順時(shí)針-增增加，逆時(shí)時(shí)針-減少少）設(shè)置轉(zhuǎn)速：：直接扭動(dòng)旋旋鈕進(jìn)行轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)速更改，，面板位置置顯示的是是設(shè)定值，，順時(shí)針撥撥動(dòng)，設(shè)置置轉(zhuǎn)速值增增加，每次次增加5，，逆時(shí)針撥撥動(dòng)，設(shè)置置轉(zhuǎn)速值減減小，每次次減少5。。2秒不操操作時(shí)系統(tǒng)統(tǒng)確認(rèn)后顯顯示實(shí)際測(cè)測(cè)得轉(zhuǎn)速。。26設(shè)置溫度：：按一下旋鈕鈕保持3秒秒鐘，設(shè)置置溫度值成成閃爍狀態(tài)態(tài)，順時(shí)針針撥動(dòng)，設(shè)設(shè)置值增加加，每次增增加0.1，逆時(shí)針針撥動(dòng)，設(shè)設(shè)置值減小小，每次減減小0.1。2秒秒不操作時(shí)時(shí)系統(tǒng)確認(rèn)認(rèn)后顯示實(shí)實(shí)際測(cè)得轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)速。設(shè)置時(shí)間：：按一下旋鈕鈕，面板上上顯示的是是當(dāng)前設(shè)置置的溫度，，再按一下下旋鈕，進(jìn)進(jìn)入時(shí)間設(shè)設(shè)定狀態(tài)順順時(shí)針撥動(dòng)動(dòng)，設(shè)置值值增加，每每次增加1，逆時(shí)針針撥動(dòng)，設(shè)設(shè)置值減小小，每次減減小1。2秒不操作作時(shí)系統(tǒng)確確認(rèn)后顯示示實(shí)際測(cè)得得轉(zhuǎn)速。27注意事項(xiàng)1.需要儀儀器進(jìn)行長(zhǎng)長(zhǎng)期運(yùn)行，，請(qǐng)將時(shí)間間設(shè)置為0.2.設(shè)備處處于在工作作狀態(tài)時(shí)嚴(yán)嚴(yán)禁把手或或物體伸入入容器壁與與搖籃的縫縫隙之間，，以免傷及及人身和破破壞設(shè)備。。3.使用前前檢查箱內(nèi)內(nèi)夾具或水水位，以確確保安全無無誤。28無菌工作臺(tái)臺(tái)29潔凈工作臺(tái)臺(tái)是一種提提供局部無無塵,無菌菌工作環(huán)境境的空氣凈凈化設(shè)備,并能將工工作區(qū)已被被污染的空空氣通過專專門的過濾濾通道人為為地控制排排放，避免免對(duì)人和環(huán)環(huán)境造成危危害，是一一種安全的的微生物專專用潔凈工工作臺(tái)。供微生物學(xué)學(xué)實(shí)驗(yàn)、分分子生物實(shí)實(shí)驗(yàn)、發(fā)酵酵學(xué)實(shí)驗(yàn)、、細(xì)胞學(xué)實(shí)實(shí)驗(yàn)等學(xué)科科。30原理及使用用方法原理通過風(fēng)機(jī)將將空氣吸入入預(yù)過濾器器，經(jīng)由靜靜壓箱進(jìn)入入高效過濾濾器過濾，，將過濾后后的空氣以以垂直或水水平氣流的的狀態(tài)送出出，使操作作區(qū)域達(dá)到到百級(jí)潔凈凈度，保證證生產(chǎn)對(duì)環(huán)環(huán)境潔凈度度的要求。。31使用方法““1.作業(yè)前前準(zhǔn)備：打開位于右右下側(cè)的““總電源開開關(guān)（綠色色）”按按動(dòng)“風(fēng)機(jī)機(jī)開關(guān)”連連續(xù)按動(dòng)動(dòng)“照明/殺菌紫外外燈”。（（保持設(shè)備備運(yùn)行20min））2.正式作作業(yè)：按動(dòng)“照明明/殺菌紫紫外燈”開開啟熒光燈燈，保持風(fēng)風(fēng)機(jī)在“標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)（中速速）狀態(tài)下下運(yùn)行。3.結(jié)束作作業(yè)：保持風(fēng)機(jī)運(yùn)運(yùn)行10min后，，按動(dòng)“風(fēng)風(fēng)機(jī)開關(guān)””停止風(fēng)機(jī)機(jī)運(yùn)行按動(dòng)動(dòng)“照明開開關(guān)”或““照明/殺殺菌紫外燈燈“關(guān)閉熒熒光燈關(guān)閉閉“總電源源開關(guān)（綠綠色）”。。32注意事項(xiàng)1.新安裝裝的或長(zhǎng)期期未使用的的工作臺(tái)，，建議使用用前用超凈凈真空吸塵塵器或不產(chǎn)產(chǎn)生纖維脫脫落的物品品認(rèn)真進(jìn)行行清潔工作作。2.帶移門門工作臺(tái)操操作時(shí)，移移門開啟的的高度雖無無明確規(guī)定定，但一般般不宜開啟啟過高或關(guān)關(guān)至過低，，以免影響響風(fēng)速和潔潔凈度。3.工作臺(tái)臺(tái)面上禁止止存放無關(guān)關(guān)的物品，，以保持工工作區(qū)的潔潔凈氣流不不受干擾。。4.禁止在在工作臺(tái)面面上記錄書書寫，工作作時(shí)應(yīng)盡量量避免作明明顯干擾氣氣流的動(dòng)作作。5.禁止在在預(yù)過濾器器進(jìn)風(fēng)口部部位放置物物品，以免免擋住進(jìn)風(fēng)風(fēng)口造成進(jìn)進(jìn)風(fēng)量減少少，降低凈凈化能力。。33培養(yǎng)箱適用于生化化、生物、、醫(yī)藥、食食品加工等等行業(yè)對(duì)微微生物、細(xì)細(xì)菌等方面面的培養(yǎng)實(shí)實(shí)驗(yàn)。供微生物實(shí)實(shí)驗(yàn)、藥用用微生物實(shí)實(shí)驗(yàn)和發(fā)酵酵學(xué)實(shí)驗(yàn)課課程使用。。34培養(yǎng)箱開機(jī)通電放入培養(yǎng)物物品打開電源（（儀表顯示示盤亮并能能聽到風(fēng)機(jī)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)聲音音）控溫儀經(jīng)4秒自檢程程序后進(jìn)入入工作模式式（注：PV-測(cè)量量溫度，SV-設(shè)定定溫度）溫度設(shè)定1.按一下下OK鍵，，使PV顯顯示“SP”，SV顯示出廠廠時(shí)設(shè)定溫溫度（產(chǎn)品品出廠時(shí)設(shè)設(shè)定SV=37℃2.按←移位鍵，閃閃爍數(shù)據(jù)位位為修改位位，再按住住↓或↑，將SV顯示示的數(shù)值修修改為所需需要的工作作溫度值后后按“OK”鍵確認(rèn)認(rèn)。3.再按確確認(rèn)鍵，使使儀表返回回工作模式式，產(chǎn)品進(jìn)進(jìn)入工作狀狀態(tài)。35定時(shí)功能使使用1.按二下下OK鍵后后，PV顯顯示符號(hào)““ST”時(shí)時(shí)，SV顯顯示“O””時(shí)，產(chǎn)品品無定時(shí)功功能（出廠廠設(shè)定值））。2.當(dāng)用←、↑鍵設(shè)定時(shí)間間后（定時(shí)時(shí)設(shè)定范圍圍：1~9999分