二、鏈球菌屬（一）概念鏈球菌屬為觸酶陰性，兼性厭氧，呈圓形或卵圓形的革蘭陽性球菌，在液體培養(yǎng)基中生長時(shí)易形成長鏈而表現(xiàn)為沉淀生長（但肺炎鏈球菌為混濁生長）。（二）生物學(xué)特性形態(tài)與染色：革蘭染色陽性。菌體呈圓形，直徑為0.8?1.0|Jm,呈鏈狀排列，在液體培養(yǎng)基中易成長鏈。在膿汁標(biāo)本中為短鏈，成雙或單個(gè)散在。無鞭毛、無芽胞、某些菌株在血清肉湯中可有莢膜。培養(yǎng)特性：本屬細(xì)菌大多為需氧或兼性厭氧菌，少數(shù)微需氧及專性厭氧。營養(yǎng)要求較高，在含有腹水的培養(yǎng)基上生長良好。最適溫度為35°C?37°C，最適pH為7.4?7.6，在5%C02環(huán)境下生長更好。在血瓊脂平板上，經(jīng)35C18?24h培養(yǎng)后可形成灰白色、圓形、凸起、直徑為0.1?0.75mm細(xì)小菌落，菌落周圍出現(xiàn)不同溶血環(huán)。生化反應(yīng)：本屬細(xì)菌觸酶試驗(yàn)陰性（與葡萄球菌屬鑒別）桿菌肽（S）Optochin耐藥(-)CAMP試驗(yàn)，馬尿酸水解試驗(yàn)（-）〈膽汁溶解（-）與肺炎舞球菌鑒分類（1）根據(jù)溶血能力分類：利用鏈球菌在血平板上溶血情況分為三類，1）甲型（a）溶血性鏈球菌：又稱草綠色鏈球菌。本菌為條件致病菌。桿菌肽（S）Optochin耐藥(-)CAMP試驗(yàn)，馬尿酸水解試驗(yàn)（-）〈膽汁溶解（-）與肺炎舞球菌鑒2）乙型（8）溶血性鏈球菌：通稱溶血性鏈球菌，透明溶血環(huán)。該型細(xì)菌致病性最強(qiáng)，常引起人和動(dòng)物多種疾病。3）丙型（丫）鏈球菌：無溶血環(huán)。一般無致病性。（2）根據(jù)鏈球菌細(xì)胞壁抗原（即C抗原）分類：即常用Lancefield血清分型法，將鏈球菌分為A、B、C、D……T等18個(gè)群（其中I和J缺），對人類有致病性的90%屬A群，B、C、D、G群鏈球菌感染較少見。

對理化因素的抵抗力：不強(qiáng)。（三）致病性A群鏈球菌：'風(fēng)濕熟（關(guān)節(jié)，心臟）變態(tài)反應(yīng)性疾病＜腎小球腎炎'風(fēng)濕熟（關(guān)節(jié)，心臟）變態(tài)反應(yīng)性疾?。疾菥G色鏈球菌：屬條件致病菌，常與亞急性心內(nèi)膜炎相關(guān)。B群鏈球菌：是新生兒肺炎、腦膜炎和敗血癥的病原體。D群鏈球菌：引起呼吸道和泌尿道感染。治療原則：A群鏈球菌感染，青霉素G被列為首選。B群鏈球菌常采用青霉素G和一種氨基糖苷類合用。（四）微生物學(xué)檢驗(yàn)方法與原理標(biāo)本采集：不同疾病采集不同標(biāo)本。檢驗(yàn)方法及鑒定（1）直接鏡檢：革蘭染色，鏡檢。如符合鏈球菌的形態(tài)特征可初報(bào)。（2）直接檢測抗原。（3）分離培養(yǎng)：血液標(biāo)本，以無菌操作取兩份血液各8?10ml，分別注入肉湯培養(yǎng)基，分別置需氧和厭氧環(huán)境中增菌，有細(xì)菌生長，然后分別接種于兩個(gè)血平板，置需氧和厭氧環(huán)境中培養(yǎng)。膿汁和咽拭標(biāo)本接種血平板并涂片染色鏡檢，若形態(tài)酷似鏈球菌，并革蘭陽性，可初報(bào)。上述的培養(yǎng)物經(jīng)35°C18?24h培養(yǎng)后，觀察菌落特征和溶血情況。鏈球菌的菌落通常較小，透明或半透明，似針尖大小、凸起，菌落周圍可出現(xiàn)a-溶血或p-溶血，也可不出

現(xiàn)溶血。然后取可疑菌落經(jīng)涂片、染色鏡檢證實(shí)。甲型溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌可產(chǎn)生a-溶血，它們的菌落形態(tài)非常相似，應(yīng)予以區(qū)別。豬鏈球菌在羊血平板上為a溶血，在兔血平板上呈p溶血。（4）鑒定：見生化反應(yīng)。三、肺炎鏈球菌（一）概念肺炎鏈球菌屬鏈球菌科，鏈球菌屬。（二）生物學(xué)特性形態(tài)與染色：革蘭陽性，呈矛頭狀，成雙排列，球菌。有莢膜（在人或動(dòng)物體內(nèi)易形成），無鞭毛，無芽胞。培養(yǎng)特性：需氧或兼性厭氧。最適的溫度為35°C?37°C，最適的pH7.6?8.0。營養(yǎng)要求較高。在血瓊脂平板上可形成臍狀菌落，周圍有草綠色溶血圈。在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)時(shí)間過長，可因產(chǎn)生自溶，培養(yǎng)液可變澄清，管底沉淀。生化反應(yīng)：菊糖、膽汁溶解試驗(yàn)陽性、0ptochin敏感試驗(yàn)陽性。（與草綠色鏈球菌的鑒別。）（三）致病性致病物質(zhì)：莢膜。所致疾病主要有大葉性肺炎、支氣管炎。（四）微生物學(xué)檢驗(yàn)方法與原理標(biāo)本米集試驗(yàn)方法及鑒定（1）直接涂片檢查：經(jīng)革蘭染色，鏡檢見革蘭陽性矛尖狀雙球菌。（2）分離培養(yǎng)：血液、腦脊液需增菌培養(yǎng)，經(jīng)葡萄糖硫酸鎂肉湯增菌后，肺炎鏈球菌可呈均勻混濁，而且有綠色熒光。無須增菌培養(yǎng)的膿汁或腦脊液沉渣接種于血瓊脂，置5%?10%C02環(huán)境中，經(jīng)35C18?24h培養(yǎng)后觀察茵落，并取可疑菌落作進(jìn)一步鑒定。（3）鑒定試驗(yàn)1）膽汁溶解試驗(yàn)：陽性。2）菊糖發(fā)酵試驗(yàn)：陽性。3）動(dòng)物試驗(yàn)：小白鼠對肺炎鏈球菌極為敏感。4）莢膜腫脹試驗(yàn)：陽性。

5）0ptochin敏感試驗(yàn)：陽性。6）快速乳膠凝集試驗(yàn)陽性。四、腸球菌屬（一）概念腸球菌屬是腸道的正常棲居菌。（二）生物學(xué)形狀為革蘭陽性，成雙或短鏈狀排列的卵圓形球菌，無芽胞，無莢膜，部分腸球菌有稀疏鞭毛。營養(yǎng)要求高，需氧及兼性厭氧，在膽汁七葉苷和含6.5%NaCl培養(yǎng)基中可以生長（此點(diǎn)可與鏈球菌鑒別）。在血平板上主要表現(xiàn)為Y-和a-溶血。觸酶陰性，多數(shù)腸球菌能水解毗咯烷酮-8-萘基酰胺（PYR）。與同科鏈球菌的顯著區(qū)別在于腸球菌能在高鹽（6.5%NaCl）、高堿（pH9.6）、40%膽汁培養(yǎng)基上和10°C?45°C環(huán)境下生長，并對許多抗菌藥物表現(xiàn)為固有耐藥。目前，腸球菌是革蘭陽性菌中僅次于葡萄球菌屬的重要醫(yī)院感染病原菌，其所致感染中最常見的為尿路感染，其次為腹部和盆腔等部位的創(chuàng)傷和外科術(shù)后感染。臨床上分離率最高的是糞腸球菌，其次是屎腸球菌。糞腸球菌的某些菌株在馬血、兔血平板上出現(xiàn)8溶血。（三）微生物學(xué)檢查方法與原理合理采取相應(yīng)標(biāo)本，如尿液、膿汁、膽汁、分泌物或血液等，以直接涂片進(jìn)行初步檢查。分離培養(yǎng)后，挑取可疑菌落，進(jìn)行涂片、染色、鏡檢、觸酶試驗(yàn)、膽汁七葉苷試驗(yàn)和6.5%NaCl耐受試驗(yàn)，可鑒定到屬。如鑒定到種還需進(jìn)行必要的生化試驗(yàn)。對具有臨床意義的腸球菌應(yīng)進(jìn)行體外藥敏試驗(yàn)，一般要測試對8-內(nèi)酰胺類尤其是青霉素類（如青霉素、氨芐西林）、萬古霉素和氨基糖甙類（如慶大霉素）的敏感性，耐萬古霉素腸球菌（VRE）國外檢出率較國內(nèi)高。（四）治療原則治療腸球菌感染一般采用8-內(nèi)酰胺類和氨基糖甙類聯(lián)合治療。五、奈瑟菌屬奈瑟菌屬為一大群革蘭陰性雙球菌，無鞭毛，無芽胞，有菌毛。專性需氧，氧化酶陽性。本屬主要有9個(gè)種。其中對人致病的是腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。（一）腦膜炎奈瑟菌概念腦膜炎奈瑟菌簡稱腦膜炎球菌，是引起流行性腦脊髓膜炎（簡稱流腦）的病原體。生物學(xué)特性

形態(tài)與染色：為革蘭陰性雙球菌，菌體呈腎形，成對排列，坦面相對，菌體直徑0.6?1.5“m,在患者的腦脊液中位于中性粒細(xì)胞內(nèi)。培養(yǎng)特性：營養(yǎng)要求高，屬苛養(yǎng)菌，必須在含有血清或含有多種氨基酸，無機(jī)鹽等物質(zhì)的培養(yǎng)基上生長良好。生化反應(yīng)：絕大多數(shù)菌株能分解葡萄糖和麥芽糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣(因淋病奈瑟菌不分解麥芽糖，借此與之鑒別)，觸酶試驗(yàn)陽性，氧化酶試驗(yàn)陽性?？乖胺中停褐饕兴姆N抗原：莢膜多糖群特異性抗原、外膜蛋白型特異性抗原、脂多糖抗原及核蛋白抗原。根據(jù)群特異性莢膜多糖抗原不同，采用凝集反應(yīng)和瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)可將本菌分為A、B、C、D、X、Y、Z、1916、29E和W135等。目前，對人致病的主要是A群。偶見8群、C群及1916群引起散發(fā)病例。臨床意義致病物質(zhì)：菌毛，莢膜，內(nèi)毒素。所致疾?。耗X膜炎奈瑟菌是流行性腦脊髓膜炎的病原菌。主要表現(xiàn)發(fā)熱，皮膚瘀斑，腦膜刺激癥狀。存在于攜帶者或病人的鼻咽部，借飛沫經(jīng)空氣傳播，冬末春初為流行高峰。微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集：血液；瘀斑滲出液；腦脊液；鼻咽分泌物。因本菌能產(chǎn)生自溶酶，易自溶，故采集的標(biāo)本不宜置冰箱，應(yīng)立即送檢。檢驗(yàn)方法及鑒定：直接涂片檢查：取腦脊液離心后沉淀物涂片或刺破瘀斑血印片，干燥固定后革蘭染色。若發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞內(nèi)(或胞外)革蘭陰性雙球菌，呈腎形成對排列，可初報(bào)。分離培養(yǎng)：將標(biāo)本葡萄糖肉湯增菌培養(yǎng)液直接接種于血瓊脂平板、巧克力瓊脂或EPV瓊脂，置5%?10%C02環(huán)境中，35°C培養(yǎng)18?24h后可見圓形、灰褐色、濕潤、光滑、邊緣整齊、直徑1?2mm的小菌落，經(jīng)涂片證實(shí)為草蘭陰性雙球菌，并進(jìn)一步根據(jù)相應(yīng)的生化反應(yīng)等試驗(yàn)予以鑒定。鑒定：①細(xì)菌染色形態(tài)；②氧化酶試驗(yàn)陽性；③觸酶試驗(yàn)陽性；④分解葡萄糖、麥芽糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；⑤莢膜多糖抗原直接凝集試驗(yàn)。治療原則：青霉素G為首選，三代頭孢對腦膜炎奈瑟菌也具有很強(qiáng)的抗菌活性。青霉素過敏的病人可考慮選用三代頭孢或氯霉素。(二)淋病奈瑟菌概念：淋病奈瑟菌簡稱淋球菌，是淋病的病原體，人類是其唯一的天然宿主和傳染源。生物學(xué)特性(1)形態(tài)與染色：本菌的形態(tài)與腦膜炎奈瑟菌很相似。在膿汁標(biāo)本中，此菌通常位于中性

粒細(xì)胞內(nèi)，而在慢性淋病時(shí)常位于細(xì)胞外。從患者體內(nèi)新分離的菌株可有莢膜和菌毛，經(jīng)人工培養(yǎng)后，呈卵圓形或球形，排列不規(guī)則。無芽胞和鞭毛。（2）培養(yǎng)特性：營養(yǎng)要求較高，須在含有血液、血清或多種氨基酸和無機(jī)鹽類物質(zhì)的培養(yǎng)基上生長良好。國內(nèi)常用血液瓊脂、巧克力瓊脂、EPV瓊脂等培養(yǎng)基。初次分離時(shí)，須置5%?10%C02條件下才能生長。（3）生化反應(yīng)：可發(fā)酵葡萄糖、產(chǎn)酸，但不酵解麥芽糖（常借此與腦膜炎奈瑟菌相鑒別）。氧化酶和觸酶試驗(yàn)均陽性。主要有三種抗原：菌毛蛋白抗原、脂多糖抗原和外膜蛋白抗原。對外界抵抗力極低。微生物學(xué)檢驗(yàn)（1）標(biāo)本采集：膿性分泌物，尿道拭子，宮頸口分泌物，結(jié)膜分泌物，血液。（2）檢驗(yàn)方法及鑒定：1）直接涂片檢查：收集標(biāo)本后立即涂片、革蘭染色。鏡檢時(shí)見中性粒細(xì)胞內(nèi)數(shù)對革蘭陰性雙球菌，可初報(bào)。2）分離培養(yǎng)：細(xì)菌培養(yǎng)仍是目前世界衛(wèi)生組織推薦的篩選淋病患者的唯一方法。所采集的標(biāo)本應(yīng)及時(shí)接種含有兩種以上抗生素（萬古霉素和多粘菌素等）的營養(yǎng)培養(yǎng)基（EPV）上。淋球菌對培養(yǎng)基的營養(yǎng)要求很高，且對冷、熱、干燥和消毒劑抵抗力低，故采樣后須立即接種于預(yù)溫的選擇性培養(yǎng)基和非選擇性培養(yǎng)基中，如巧克力平板，置于含5%?10%的二氧化碳環(huán)境中，35°C培養(yǎng)48h。取小而透明似水滴狀、無色素易乳化菌進(jìn)一步鑒定。3）鑒定：取可疑菌落進(jìn)行涂片，革蘭染色鏡檢，若見革蘭陰性雙球形，①生化反應(yīng)：氧化酶陽性，僅分解葡萄糖產(chǎn)酸；②免疫學(xué)方法：熒光抗體染色法、協(xié)同凝集試驗(yàn)；③核酸探針雜交法。氧化酶試驗(yàn)陽性，可初判，并進(jìn)行相關(guān)的生化反應(yīng)，如僅發(fā)酵葡萄糖而不發(fā)酵麥芽糖與蔗糖，以及30%H2O2試驗(yàn)陽性可與腦膜炎奈瑟菌等相鑒別。臨床意義：淋病奈瑟菌是常見的性傳播疾病淋病的病原菌，主要通過性接觸直接侵襲感染泌尿生殖道，口咽部及肛門直腸的黏膜。如單純性淋病、盆腔炎、淋菌型結(jié)膜炎。治療原則：一般為三代頭孢菌素，氟喹諾酮類、壯觀霉素可作為替代藥物。本章練習(xí)題：淋病奈瑟菌與腦膜炎奈瑟菌用哪項(xiàng)實(shí)驗(yàn)鑒別葡萄糖發(fā)酵試驗(yàn)麥芽糖發(fā)酵試驗(yàn)氧化酶試驗(yàn)觸酶試驗(yàn)

革蘭染色正確答案：BSPA是腸桿菌科的細(xì)菌的抗原葡萄球菌細(xì)胞壁的蛋白成分沙門菌的表面抗原核蛋白抗原鏈球菌屬表面抗原正確答案：B鑒別肺炎鏈球菌與甲型溶血性鏈球菌可用外斐試驗(yàn)肥大試驗(yàn)乳糖發(fā)酵試驗(yàn)菊糖分解試驗(yàn)血漿凝固酶試驗(yàn)正確答案：D耐甲氧西林的表皮葡萄球菌為MRSAMRSEMRSOMRNSSPA正確答案：BB群鏈球菌不引起下列哪種疾病敗血癥肺炎腦膜炎咽喉炎風(fēng)濕熱正確答案：E淋病奈瑟菌的重要致病因素是菌毛

殺白細(xì)胞素莢膜內(nèi)毒素以上都是正確答案：A引起剝脫性皮炎的細(xì)菌是肺炎球菌鏈球菌金黃色葡萄球菌腦膜炎奈瑟菌腸球菌正確答案：C一位老年患者因外傷住院治療，插導(dǎo)尿管一周后出現(xiàn)尿路感染。取尿液檢查，革蘭染色見陽性球菌，