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酵母菌類絮凝劑產(chǎn)生菌的最佳培養(yǎng)條件姓名:蘇婷婷院(系):制藥與環(huán)境工程系專業(yè):食品生物技術(shù)1331學(xué)號:1303071109實訓(xùn)地點:實B313指導(dǎo)老師:李夏何靜2015年10月全文目錄摘要:本文以釀酒酵母作為微生物絮凝劑產(chǎn)生菌,干制的甜葉菊苷為實驗原料,研究甜葉菊苷提取液絮凝劑處理方法。采用單因素實驗,尋找甜葉菊苷提取液絮凝工藝中溶液PH值、絮凝溫度、酵母菌量和絮凝時間4個因素進(jìn)行評價,尋找甜葉菊苷提取液的最佳絮凝條件。關(guān)鍵詞:甜葉菊苷、絮凝劑、提取液制備甜葉菊浸提液用研缽講干制的甜葉菊磨成細(xì)粉,稱取10g至于200ml沸水中加熱40分鐘,用紗布過濾,濾液保存,將濾渣置入130ml沸水中加熱20分鐘,用紗布過濾,過濾后的濾液保存。濾渣置于130ml沸水中煮20分鐘,過濾。三次過濾的溶液為樣液。(樣液貫穿整個實驗有必要還是需要滅菌處理121.3攝氏度下高壓蒸汽滅菌20分鐘)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基制備1.25g牛肉膏、2.5g蛋白胨、1.25gNaCI、250ml水將PH調(diào)至7.0~7.5在121.3攝氏度下高壓蒸汽滅菌20分鐘酵母菌溶液的制備稱取2g酵母粉、5g葡萄糖、100ml無菌水酵母菌培養(yǎng)將酵母菌溶液在酒精燈火焰旁置入牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中,放在37攝氏度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時測得甜葉菊的吸光度吸光度1.3361.3391.342甜葉菊吸光度為1.3392.將甜葉菊苷的濾液取3ml分別放置于編號A、B的試管中:A試管中加入2ml酵母菌的代謝產(chǎn)物B試管中加入2ml酵母菌本身分別離心處理測出吸光度吸光度A0.395B0.3813.與化學(xué)絮凝劑的對比三氯化鐵FeCl3·6H2O(測得化學(xué)絮凝劑的吸光度為0.354)對金屬(尤其對鐵器)腐蝕性大,對混凝土亦腐蝕,對塑料管也會因發(fā)熱而引起變形不受溫度影響,礬花結(jié)得大,沉淀速度快,效果較好易溶解,易混合,渣滓少適用最佳pH值為6.0~8.4單因素實驗A/B/C/DPH對甜葉菊苷絮凝的影響取甜葉菊甙浸提液10mL,加入絮凝劑測得有絮凝效果的酵母菌部分,在水浴50℃下絮凝30min,絮凝溶液的pH分別為3、4、5、6、7、8、9絮凝結(jié)束后取清液進(jìn)行蒽酮比色,檢測絮凝后溶液中甜葉菊甙的含量,考察pH對甜葉菊甙浸提液絮凝效果的影響。PH3456789吸光度1.3090.5740.3770.4610.7070.8151.499澄清度 B.溫度對甜葉菊苷絮凝的影響取甜葉菊甙浸提液10mL,加入絮凝劑測得有絮凝效果的酵母菌部分,在水浴50℃下絮凝30min,水浴溫度分別為455055606570℃條件下絮凝30min。絮凝結(jié)束后取清液進(jìn)行吸光度測定,檢測絮凝后溶液中的甜葉菊甙的含量,考察絮凝溫度對甜葉菊甙浸提液絮凝效果的影響。溫度(℃)455055606570吸光度1.9391.7371.8071.8501.8921.877澄清度C.酵母菌量對甜葉菊苷的絮凝的影響取甜葉菊甙浸提液10mL,分別加入1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0絮凝劑測得有絮凝效果的酵母菌部分,在水浴50℃下絮凝30min,在絮凝溶液。絮凝結(jié)束后取清液進(jìn)行吸光度測定,檢測該溶液中的甜葉菊甙含量,考察絮凝劑用量對甜葉菊甙浸提液絮凝效果的影響。酵母菌的量 1.01.52.02.53.03.54.0吸光度1.3491.0850.9770.9600.8000.9090.867澄清度 D.絮凝時間對甜葉菊苷絮凝的影響取甜葉菊甙浸提液10mL,加入絮凝劑測得有絮凝效果的酵母菌部分,在水浴60℃下絮凝,絮凝沉淀反應(yīng)時間分別為30、60、90、120、150min,做絮凝實驗。絮凝結(jié)束后取清液進(jìn)行吸光度測定,檢測絮凝后溶液中的甜葉菊甙含量,考察絮凝時間對甜葉菊甙浸提液絮凝效果的影響。絮凝時間(min)20406080100120140160吸光度1.4371.5861.0081.0320.6880.7120.8940.809澄清度 正交試驗(四因素三水平)A因素:PHA1=4A2=5A3=6B因素:溫度B1=48B2=50B3=52C因素:酵母菌量C1=2.8C2=3.0C3=3.2D因素:時間D1=90D2=100D3=110甜葉菊的吸光度為1.307(第二次配置的溶液)酵母菌溶液吸光度0.187(第二次配置的溶液) PH溫度酵母菌量時間吸光度A1B1C1D14482.8900.976A1B2C2D24503.01000.986A1B3C3D34523.21100.910A2B1C2D35483.01100.841A2B2C3D15503.2900.791A2B3C1D25522.81001.078A3B1C3D26483.21000.771A3B2C1D36502.81100.782A3B3C2D16523.0900.731K1K2K3k1k2k3極差R主次順序優(yōu)水平優(yōu)組合與化學(xué)絮凝劑的對比三氯化鐵FeCl3·6H2O對金屬(尤其對鐵器)腐蝕性大,對混凝土亦腐蝕,對塑料管也會因發(fā)熱而引起變形不受溫度影響,礬花結(jié)得大,沉淀速度快,效果較好易溶解,易混合,渣滓少適用最佳pH值為6.0~8.4微生物絮凝比表面積大,轉(zhuǎn)化能力強(qiáng)、繁殖速率快,易變異、分布廣生產(chǎn)周期短,效率高。抑郁
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