耳聾是一種嚴(yán)重影響人類(lèi)生活質(zhì)量的常見(jiàn)先天性疾病，它可以由單一基因突變或不同基因的復(fù)合突變引起，也可由環(huán)境因素（如醫(yī)療因素，環(huán)境暴露，創(chuàng)傷，藥物等）或基因和環(huán)境兩者共同作用而致。在世界范圍內(nèi)，每1000名新生兒中就有1名先天性耳聾患兒，50%患兒的耳聾與遺傳因素有關(guān)（Morton,1991）。非綜合征耳聾是最常見(jiàn)的感音神經(jīng)性聾，占遺傳性耳聾的70%，可以分為常染色體顯性（DFNA，15%~20%）、常染色體隱性（DFNB，80%）、性連鎖（DFNX-linked，1%）和線(xiàn)粒體遺傳性耳聾（1%）四類(lèi)。迄今為止，共有114個(gè)耳聾位點(diǎn)見(jiàn)諸報(bào)道（54個(gè)為常染色體顯性位點(diǎn)，60個(gè)為常染色體隱性位點(diǎn)）。40余個(gè)感音神經(jīng)性耳聾基因和更多的綜合征耳聾基因被克?。╤ttp://webhost.ua.ac.be/hhh/）。據(jù)中國(guó)殘疾人聯(lián)合會(huì)網(wǎng)站統(tǒng)計(jì)，中國(guó)6000萬(wàn)殘疾人口中2100萬(wàn)為聽(tīng)力殘疾者。盡管近年來(lái)遺傳性耳聾分子病因?qū)W研究領(lǐng)域有許多重要進(jìn)展，但中國(guó)耳聾人群的遺傳學(xué)研究仍相對(duì)貧乏，大量的問(wèn)題亟待解決。本文回顧中國(guó)人群中GJB2和其他耳聾基因突變的發(fā)病率，對(duì)中國(guó)13億人口耳聾基因突變率作初步推斷。耳聾的發(fā)病情況有可能成為中國(guó)重要的公共健康問(wèn)題。非綜合征性耳聾GJB2連接蛋白26（connexin26）異常被公認(rèn)為耳聾最常見(jiàn)的病因。GJB2編碼的連接蛋白26表達(dá)于耳蝸，在耳蝸毛細(xì)胞K+循環(huán)中發(fā)揮重要作用。GJB2突變可導(dǎo)致DFNB1和DFNA3,是遺傳性耳聾最常見(jiàn)的原因（Cohnetal.,1999；Fuseetal.,1999；Kelleyetal.,1998）。在非綜合征性耳聾病人中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了100多種GJB2突變類(lèi)型，這些突變?cè)诓煌N族人群中的發(fā)生頻率和分布情況差異很大。在美國(guó)、歐洲、澳大利亞和以色列，50%的耳聾由GJB2突變導(dǎo)致，在其他國(guó)家的耳聾人群中也有報(bào)道。值得注意的是，35delG在北歐、南歐及美國(guó)的高加索人種中占所有GJB2突變的70%，上述人群35delG的突變攜帶率為1.3%~2.8%（Gasparinietal.，2000；Greenetal.，1999）。GJB2的另一突變167delT在猶太耳聾人群中占所有病理性突變的40%（Sobeetal.，2000），在北歐猶太人中167delT的突變攜帶率為4%（Morelletal.1998）。在東亞（中國(guó)，日本，韓國(guó)）GJB2235delC是最常見(jiàn)的突變，而R143W和W24X分別是加納和印度、吉普賽人群中發(fā)生率最高的突變（）。我們?cè)?18名中國(guó)非綜合征性耳聾先證者（60名為耳聾散發(fā)病例，58名來(lái)自耳聾多發(fā)家庭）中檢測(cè)GJB2，發(fā)現(xiàn)235delC、299-300delAT、35delG和V37I等4種突變，而對(duì)照組150名聽(tīng)力正常的中國(guó)人中未找到上述突變。27名（22.9%）先證者僅攜帶1個(gè)GJB2突變。在這一人群中未找到GJB2第一外顯子上的突變及GJB6342kb的大片段缺失。235delC是最常見(jiàn)的突變類(lèi)型，等位基因頻率20.3%。在耳聾多發(fā)和單發(fā)家庭的先證者中235delC分別占病理性基因突變的80%和67%（Liuetal.,2002）。Liu等（2002）的研究進(jìn)一步證實(shí)在GJB2突變致聾的中國(guó)人群中235delC是比例最高的病理突變。這些結(jié)果提示，GJB2突變是中國(guó)人散發(fā)性先天性耳聾的主要病因。與西方國(guó)家不同，235delC而不是35delG是中國(guó)聾人中最常見(jiàn)的致病突變。

VanLaer等(2001)認(rèn)為GJB235delG在白種人中的高攜帶率是始祖效應(yīng)的結(jié)果，北歐猶太人中的GJB2167delT也被認(rèn)為由始祖效應(yīng)導(dǎo)致(Morelletal.,1998)，但是在235delC突變占很高比例的亞洲人群中35delG和167delT的發(fā)生率很低。在日本(Fuseetal.，1999；Abeetal.，2000;Kudoetal.,2000)、韓國(guó)(Parketal.，2000)和中國(guó)(Liuetal.，2002)，235delC在人群中的攜帶率為1.0%~1.3%，占所有GJB2病理性等位基因的80%。然而，在南亞(印度、巴基斯坦、孟加拉、斯里蘭卡)尚未發(fā)現(xiàn)35delC突變，南亞國(guó)家中W24X和W77X是GJB2常見(jiàn)的突變類(lèi)型(Kelselletal.,1997；Scottetal.，1998)。Ohtsuka等(2003)認(rèn)為235delC突變?cè)谌毡镜牧餍袘?yīng)歸為始祖效應(yīng)。我們認(rèn)為，235delC在東亞的高發(fā)最好用始祖效應(yīng)來(lái)解釋?zhuān)皇菬狳c(diǎn)突變，并且所有東亞人群的235delC都來(lái)源于共同的祖先(Yanetal.,2003)。GJB6GJB6位于13號(hào)染色體上，與GJB2緊鄰，它與耳聾的關(guān)系最早于1999年被揭示。GJB6最常見(jiàn)的突變是342kb的大片段缺失，342kb純合缺失或與GJB2單雜合突變共存的雜合缺失會(huì)導(dǎo)致感音神經(jīng)性耳聾。美國(guó)20%的耳聾人群中攜帶GJB6突變(delCastilloetal.,2003)。GJB6的大片段缺失最高占DFNB1等位基因的10%左右，其等位基因頻率隨種族的不同有著很大的變異。GJB6和GJB2共同表達(dá)于耳蝸，它們可以在細(xì)胞膜上形成由多個(gè)亞單位組成的半通道，并作為一個(gè)整體在內(nèi)耳K+調(diào)控中發(fā)揮作用。GJB6342kb大片段缺失(GJB6-D13S1830)發(fā)生率較高的國(guó)家為西班牙、法國(guó)、英國(guó)、以色列、巴西(占所有DFNB1等位基因的5.9%~9.7%)，其次是美國(guó)、比利時(shí)和澳大利亞(占DFNB1等位基因的1.3%~4.5%)，在意大利南部很少見(jiàn)(delCastilloetal.,2003)，但Gualandi(2004)報(bào)道意大利北部地區(qū)與其他歐洲國(guó)家發(fā)生率相近。此外，在德國(guó)和土耳其(Bolz，2004；Tekinetal.，2003；Uyguneretal.，2003)也發(fā)現(xiàn)了這一缺失，而在奧地利和中國(guó)(Guntheretal.，2003；Liuetal.，2002)尚未見(jiàn)到報(bào)道。GJB3GJB3定位于人類(lèi)染色體1p33-p35，編碼有270個(gè)氨基酸的連接蛋白31(connexin31)。GJB3突變既可導(dǎo)致DFNA又可導(dǎo)致DFNB。GJB3于1998年由夏家輝等研究中國(guó)兩個(gè)常染色體顯性遺傳非綜合征性耳聾的家系時(shí)定位并克隆。GJB3的錯(cuò)義突變E183K和無(wú)義突變R180X被認(rèn)為與高頻聽(tīng)力下降有關(guān)?？紤]到GJB3突變可以導(dǎo)致DFNA，為了解這些突變是否會(huì)導(dǎo)致DFNB，我們?cè)?5個(gè)中國(guó)DFNB家系中檢測(cè)了GJB3。其中有2個(gè)家系的成員攜帶GJB3復(fù)合雜合突變。序列分析證實(shí)兩個(gè)家系均攜帶開(kāi)放閱讀框架內(nèi)3bp的缺失(423-425delATT)，導(dǎo)致141密碼子上的異亮氨酸缺失；另一等位基因上的突變?yōu)?23A-G，導(dǎo)致141密碼子上的異亮氨酸被纈氨酸取代。這兩個(gè)突變都可改變第3跨膜區(qū)(M3)保守的?螺旋環(huán)的結(jié)構(gòu)并使連接蛋白結(jié)構(gòu)發(fā)生異常。上述結(jié)果證明GJB3和GJB2一樣，都能導(dǎo)致常染色體顯性和隱性非綜合征性耳聾(Liuetal.，2000)。

DFNB2(MYO7A)研究發(fā)現(xiàn)，幾個(gè)不常見(jiàn)的肌球蛋白基因突變可以導(dǎo)致人類(lèi)和小鼠的聽(tīng)力損害。肌球蛋白Wa(MYO7A)是一種不常見(jiàn)的肌球蛋白類(lèi)型，由保守的頭、頸、尾區(qū)組成，包繞肌動(dòng)蛋白并水解三磷酸腺苷提供運(yùn)動(dòng)所需能量。這些不常見(jiàn)的肌球蛋白發(fā)揮不同的作用，如細(xì)胞內(nèi)吞、離子通道調(diào)控、鈣調(diào)蛋白的定位、內(nèi)耳毛細(xì)胞靜纖毛的錨接、胞漿內(nèi)小囊泡和顆粒的運(yùn)動(dòng)等。MYO7A定位于染色體11q13.5，其突變導(dǎo)致Usher綜合征1B型。同時(shí)它還與常染色體顯性和隱性非綜合征耳聾有關(guān)。我們?cè)?個(gè)DFNA11家系受累成員中發(fā)現(xiàn)MYO7A22號(hào)外顯子上框架內(nèi)9bp的缺失(Liu,1997a)。我們還在來(lái)自中國(guó)四川省的8個(gè)常染色體隱性非綜合征耳聾家系中的2個(gè)家系發(fā)現(xiàn)MYO7A突變。在1個(gè)家系中，3個(gè)受累的同胞均攜帶R244P純合突變。進(jìn)一步在1個(gè)常染色體隱性遺傳非綜合征耳聾中國(guó)家系的2個(gè)同胞中檢測(cè)到復(fù)合雜合突變，其中一個(gè)等位基因上為第3內(nèi)含子的剪切點(diǎn)突變IVS3-2A-G，另一個(gè)為等位基因第28號(hào)外顯子上的插入突變1199insT，導(dǎo)致閱讀框架移位，終止密碼子提前出現(xiàn)。綜合征性耳聾Usher綜合征IC型Usher綜合征是一種遺傳性疾病，表現(xiàn)為出生時(shí)或出生后不久的中度至極重度感音神經(jīng)性耳聾和視網(wǎng)膜色素變性導(dǎo)致的漸進(jìn)性視力障礙。它是聾盲病的主要致病原因。在美國(guó)有1~1.5萬(wàn)人患有Usher綜合征。據(jù)估計(jì)，50%聾盲病人由Usher綜合征導(dǎo)致(Boughmanetal.,1983)，18%的視網(wǎng)膜色素變性患者、3%~6%的先天性耳聾患者診斷為Usher綜合征(Vernon,1969)。在斯堪的納維亞半島和美國(guó)，Usher綜合征的發(fā)病率分別為3/10萬(wàn)人、4.4/10萬(wàn)人(Hallgren,1959;Boughmanetal.,1983)。Usher綜合征的臨床表現(xiàn)和遺傳學(xué)表現(xiàn)均有多樣性的特點(diǎn)。根據(jù)耳聾、視網(wǎng)膜色素變性發(fā)生時(shí)間和是否存在前庭功能障礙將Usher綜合征分為3個(gè)臨床亞型(KeatsandCorey,)。Usher綜合征I型(USH1)是以極重度先天性耳聾、前庭反射消失和漸進(jìn)性視網(wǎng)膜色素變性為特征的常染色體隱性遺傳性耳聾。在發(fā)達(dá)國(guó)家，Usher綜合征是盲聾病最常見(jiàn)的病因。目前至少定位了11個(gè)與Usher綜合征有關(guān)的位點(diǎn)，其中8個(gè)已被克隆(Ahmedetal.，2003)。有5個(gè)不同的基因與Usher綜合征I型有關(guān)：USH1B由編碼肌球蛋白Wa的MYO7A突變導(dǎo)致(Weiletal.,1995)；USH1C由編碼harmonin的基因突變導(dǎo)致，harmonin是一種包含PDZ結(jié)構(gòu)域的蛋白(Verpyetal.，2000；Bitner-Glindziczetal.，)；USH1D和USH1F分別由編碼鈣粘蛋白23(cadherin23)及原鈣粘蛋白15(protocadherin15)的基因突變導(dǎo)致(Bolzetal.，2001;Borketal.，2001；Ahmedetal.，2001;Alagramametal.,2001)；USH1G由編碼支架蛋白的基因突變導(dǎo)致，這個(gè)蛋白包含三個(gè)聯(lián)接蛋白結(jié)構(gòu)域和一SAM結(jié)構(gòu)域，其C末端為一結(jié)合I類(lèi)PDZ基序(motif)的三肽(Weiletal.，2003)。

編碼harmonin的USH1C包含28個(gè)編碼外顯子，長(zhǎng)51kb。其中8個(gè)外顯子間存在選擇性剪切，由此形成harmonin的三種異構(gòu)體。通過(guò)研究路易斯安那州Acadian的一個(gè)家系，將USH1C定位于染色體11p(Keatetal.,1994;Verpyetal.，2000；Bitner-Glindziczetal.，2000)。最主要的一種harmonin異構(gòu)體包含552個(gè)氨基酸和3個(gè)PDZ區(qū)域。Verpy等(2000)提出USH1C突變可能是DFNB18的病因，DFNB18也定位在染色體的11p。我們?cè)?2個(gè)中國(guó)非綜合征隱性耳聾家系里發(fā)現(xiàn)1個(gè)沒(méi)有視網(wǎng)膜色素變性的家系，其USH1C選擇性剪切的外顯子D上有C-G突變，導(dǎo)致harmonin蛋白608位的精氨酸被脯氨酸取代，這一區(qū)域富含脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸。提示USH1C突變能引起非綜合征耳聾(Ouyangetal.，2000)。Usher綜合征II型Usher綜合征11型(USH2)是最常見(jiàn)的類(lèi)型，占Usher綜合征的70%。這類(lèi)病人一般患有重度耳聾，但前庭功能正常。目前認(rèn)為3個(gè)位點(diǎn)與Usher綜合征II型有關(guān)，其中2個(gè)已被克隆(Eudyetal.,1998;Westonetal.,2004)。USH2A位于染色體1q，編碼分子量171kDa、含有1551個(gè)氨基酸的的蛋白u(yù)sherin(Eudyetal.,1998)。usherin主要表達(dá)于耳蝸及視網(wǎng)膜外核層的細(xì)胞中°USH2A有21個(gè)外顯子(前兩個(gè)外顯子不編碼)，長(zhǎng)105kb，這個(gè)基因上至少有30個(gè)突變。最常見(jiàn)的突變是2299delG，在美國(guó)和歐洲20%因USH2A突變致聾的病人攜帶此突變。部分USH3的病人也帶有此突變(Liuetal.,1999)。此外，2299delG還發(fā)生在最初表現(xiàn)為視網(wǎng)膜色素變性而聽(tīng)力損失很輕的病人中。另一個(gè)常見(jiàn)的USH2A突變是C759F，4.5%的非綜合征隱性視網(wǎng)膜色素變性的病人攜帶此突變(Rivoltaetal.,2000)。我們?cè)趤?lái)自英國(guó)和中國(guó)的23個(gè)Usher綜合征家系中進(jìn)行USH2A突變分析，將10個(gè)家系診斷為非典型Usher綜合征，并發(fā)現(xiàn)大多數(shù)USH2家系攜帶2299delG。在12個(gè)帶有2299delG的家系中8個(gè)(其中1個(gè)為中國(guó)家系)表現(xiàn)為典型的Usher綜合征：先天性中重度聽(tīng)力損害，正常的前庭功能，發(fā)生于青春期后的視網(wǎng)膜色素變性。另外4個(gè)家系中有4名病人攜帶2299delG，其中一名中國(guó)病人有不典型Usher綜合征的特征：漸進(jìn)性聽(tīng)力損害，前庭功能改變和視網(wǎng)膜色素變性。Pendred綜合征Pendred綜合征占遺傳性耳聾的10%(Freser1965)，這一綜合征表現(xiàn)為重度或極重度耳聾和彌漫性甲狀腺腫大，甲狀腺腫大一般發(fā)生在青春期(40%)或成年，大多數(shù)Pendred綜合征病人前庭功能異常。Everett等(1997)認(rèn)為位于染色體7q上的SLC26A4(PDS)突變可以導(dǎo)致耳聾伴甲狀腺腫的表型，Li等(1998)認(rèn)為SLC26A4(PDS)突變還可以導(dǎo)致不伴甲狀腺腫的耳聾。在50%耳聾多發(fā)的家系中可以檢測(cè)到SLC26A4突變，體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)這些突變使SLC26A4編碼的pendrin跨膜離子轉(zhuǎn)運(yùn)功能發(fā)生改變(Scott,2000)。迄今為止，在感音神經(jīng)性耳聾患者中發(fā)現(xiàn)90多種SLC26A4突變類(lèi)型，不同的人種中突變的類(lèi)型和發(fā)生頻率有很大差異(http///

pendredandbor/Pendred%20Syndrome.htm)。Park等(2003)在東亞重度或極重度耳聾先證者中進(jìn)行SLC26A4中7個(gè)外顯子的突變分析，這些先證者部分為散發(fā)病例，部分來(lái)自耳聾家系，其中86名為中國(guó)籍。86名中國(guó)先證者中5名(5.8%)攜帶3種類(lèi)型的SLC26A4突變：S252P，IVS7-2A>G，N392Y。與線(xiàn)粒體DNA突變有關(guān)的綜合征和非綜合征性耳聾線(xiàn)粒體在遺傳性和獲得性耳聾中均發(fā)揮重要作用。線(xiàn)粒體遺傳缺陷的病人中42%~70%有感音神經(jīng)性耳聾，耳聾可表現(xiàn)為綜合征性或非綜合征性(Jacobs,1997;Fischel-Ghodsian,1998，1999)。Sinnathuray(2003)認(rèn)為3%以上的感音神經(jīng)性耳聾病人中存在線(xiàn)粒體基因突變。線(xiàn)粒體DNA突變與氨基糖甙類(lèi)藥物致聾和非綜合征性耳聾有關(guān)(Fischel-Ghodsian,1999；VanCampandSmith，2000)。線(xiàn)粒體tRNAleu(UUR)上的A3243G異質(zhì)性突變可導(dǎo)致感音神經(jīng)性耳聾(GoldandRapin,1994;Sueetal.,1998)，A3243G在糖尿病人群中的發(fā)病率為1%左右。在日本和韓國(guó)的糖尿病人中也發(fā)現(xiàn)了此突變(Iwanishietal.，1995；Leeetal.,1997)。項(xiàng)坤山等(1995)和Chuang等(1995)分別報(bào)道在中國(guó)大陸和臺(tái)灣，A3243G與II型糖尿病有關(guān)。這一突變也是MELAS綜合征(線(xiàn)粒體腦肌病，乳酸酸中毒，中風(fēng)樣發(fā)作)的常見(jiàn)原因(Reardonetal.,1992;vandenOuwelandetal.1992)。線(xiàn)粒體tRNASer(UCN)(MTTS1)是與非綜合征性耳聾有關(guān)的一個(gè)熱點(diǎn)突變。這個(gè)tRNA中4個(gè)突變與耳聾有關(guān)：A7445G(Fischel-Ghodsian，1995；Reid，1994；Sevior，1998)、7472insC(Jaksch，1998；Verhoeven，1999)、T7510C(Hutchin，2000)和T7511C(Sue，1999；Ishikawa，2002；Chapiro，2002)。12SrRNA(MTRNR1是線(xiàn)粒體的另一熱點(diǎn)突變。這個(gè)rRNA中的A1555G均質(zhì)性突變與不同人種中的氨基糖甙類(lèi)藥物導(dǎo)致的感音神經(jīng)性耳聾均有關(guān)(Hutchinetal.,1993；Prezantetal.,1993；Matthijsetal.,1996；Pandyaetal.,1987；Estivilletal.,1998；delCastilloetal.,2003；Lietal.,2004a,b；Youngetal.,2005)。12SrRNA的961位點(diǎn)突變可能與氨基糖甙類(lèi)藥物性聾和非綜合征性耳聾有關(guān)(Casanoetal.,1999;Lietal.，2004a)。此外，T1095C也被認(rèn)為與耳聾有關(guān)(Lietal.,2005;Wangetal.，2005)。最近，在一中國(guó)大家系中發(fā)現(xiàn)位于12SrRNA上高度保守區(qū)域的C1494T均質(zhì)性突變可導(dǎo)致氨基糖甙類(lèi)藥物性聾和非綜合征耳聾。Li等(2005)對(duì)線(xiàn)粒體12SrRNA進(jìn)行了系統(tǒng)的突變分析，研究對(duì)象為中國(guó)散發(fā)的氨基糖甙類(lèi)藥物性聾和非綜合征性耳聾的兒童。他們發(fā)現(xiàn)，在這一人群中48%為氨基糖甙類(lèi)藥物性聾；961位點(diǎn)的突變分別占氨基糖甙類(lèi)藥物性聾和非綜合征耳聾病例的1.7%和4.4%；A1555G分別占13%和2.9%。與中國(guó)家系相關(guān)的耳聾基因與常染色體隱性遺傳性綜合征和非綜合征性耳聾分離的基因在中國(guó)人群耳聾的遺傳病因中占有很大比例。自二十世紀(jì)九十年代，耳聾基因的定位和克隆在中國(guó)逐漸開(kāi)展起來(lái)，在

多代遺傳的耳聾家系中進(jìn)行了耳聾基因的定位和突變分