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文檔簡介

1.實驗?zāi)康?/p>

學(xué)習(xí)試管凝集試驗的操作與觀察結(jié)果的方法,了解其臨床意義。掌握血清凝集效價的定義。實驗五、試管凝集試驗

2.實驗原理

顆粒性抗原在適當(dāng)?shù)碾娊赓|(zhì)條件下與一定比例的抗體可以發(fā)生特異性的結(jié)合,即凝集試驗.抗原與不同稀釋度的抗體在試管內(nèi)直接結(jié)合而出現(xiàn)的凝集現(xiàn)象稱為試管凝集試驗,該方法多用于半定量試驗。原則上是用定量抗原懸液與一系列遞倍稀釋的受檢血清混合,在保溫靜置后觀察結(jié)果,以判定受檢血清中有無相應(yīng)抗體及其效價。

3.實驗器材--略

4.實驗方法(1)所有試管各加入0.5ml生理鹽水,取第1支試管加入0.5ml抗體(溶血素)?;靹?吸取0.5ml混合液加入到第2管,混勻再吸取0.5ml混合液加入到第3管,依次類推至第5管,棄去0.5ml混合液,第6管不加抗體.(2)加一定量的已知抗原(0.5ml,2%SRBC)。

(3)37℃孵育12h,使抗原和抗體充分反應(yīng)。

(4)觀察每支試管內(nèi)抗原的凝集程度,通常以產(chǎn)生明顯凝集(++)現(xiàn)象的最高血清稀釋度為血清中抗體的效價。

結(jié)果分析:

凝集分5級,強(qiáng)弱判定以“+”號表示如下:++++——很強(qiáng),抗原全部凝集,液體澄清,輕搖有大片凝集塊。+++——強(qiáng),抗原絕大部分凝集。液體有輕度混濁,凝集塊較小。++——中等強(qiáng)度,抗原部分凝集于管底,液體半澄清,凝集塊小。+——弱,抗原僅少量凝集,液體混濁。-——不凝集,液體混濁與對照管相似。5.注意事項:(1)試管凝集試驗敏感性不高,特異性受檢抗原不穩(wěn)定、易自凝的影響,如果電解質(zhì)濃度和pH不適當(dāng),也可引起非特異性凝集,出現(xiàn)假陽性。(2)臨床上,試管凝集試驗主要用已知抗原測定受檢血清

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