鏈霉素的分析第一節(jié)結構與性質(zhì)第二節(jié)鑒別試驗第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查第四節(jié)含量測定主要內(nèi)容

堿性環(huán)己多元醇第一節(jié)結構與性質(zhì)1.氨基糖苷類抗生素結構：鏈霉素（streptomycin）鏈霉胍鏈霉糖N-甲基葡萄糖胺（氨基糖）鏈霉雙糖胺2.性質(zhì)（1）溶解性與堿性溶解性

-OH水溶性堿性

-NH2可與酸成鹽臨床上多用硫酸鹽（2）旋光性

各種鏈霉素鹽的分子，均含有許多手性碳原子，故都具有旋光性。一定范圍內(nèi)鏈霉素的比旋度與鏈霉素濃度的關系可繪制曲線，利用這種關系就能直接迅速測得鏈霉素的濃度。（3）穩(wěn)定性鏈霉素pH5~7.5穩(wěn)定OH-N-甲基葡萄糖胺鏈霉糖OH-麥芽酚反應坂口反應反應（4）UV鏈霉素λmax=230nm第二節(jié)鑒別試驗坂口反應麥芽酚反應N-甲基葡萄糖胺反應（一）N-甲基葡萄糖胺反應對二甲氨基苯甲醛H+櫻桃紅色（Elson-Morgan反應）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物水解水解產(chǎn)物N-甲基葡萄糖胺特有反應：對二甲氨基苯甲醛H+OH-(縮合)乙酰丙酮（二）麥芽酚反應鏈霉糖特征反應△H+紫紅色（Maltol反應）麥芽酚反應H+

Fe3+分子重排麥芽酚例硫酸鏈霉素Ch.P（2010）【鑒別】（2）取本品約20mg，加水5ml溶解后，加氫氧化鈉試液0.3ml，置水浴上加熱5分鐘,加硫酸鐵銨溶液（取硫酸鐵銨0.1g，加0.5mol/L硫酸溶液5ml使溶解）0.5ml，即顯紫紅色。（三）坂口反應鏈霉胍特征反應水解（Sakaguchi反應）橙紅色次溴酸鈉8-羥基喹啉（或α-萘酚）坂口反應+OH-例硫酸鏈霉素Ch.P（2010）【鑒別】（1）取本品約0.5mg，加水4ml溶解后，加氫氧化鈉試液2.5ml與0.1%8-羥基喹啉的乙醇溶液1ml，放冷至約15℃，加次溴酸鈉試液3滴,即顯橙紅色。（四）光譜法IR法例【鑒別】紅外光吸收圖譜Ch.P（2010）

硫酸鏈霉素（光譜集491圖）

第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查有關物質(zhì)（甘露糖鏈霉素等）的檢查2.方法HPLC1.來源發(fā)酵時菌種產(chǎn)生例硫酸鏈霉素Ch.P（2010）【檢查】有關物質(zhì)

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.15mol/L的三氟醋酸溶液為流動相，流速為每分鐘0.5ml，用蒸發(fā)光散射檢測器檢測（漂移管溫度：110℃，載氣流速：2.8L/min），取鏈霉素對照品適量，用水溶解并稀釋制成每1ml中約含鏈霉素3.5mg的溶液，置日光燈（3000Lx）下照射24小時，作為分離度試驗用溶液。取妥布霉素對照品適量，用分離度試驗用溶液溶解并稀釋制成每1ml中約含妥布霉素0.06mg的溶液，量取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。鏈霉素峰保留時間約為10～12分鐘，鏈霉素峰（相對保留時間為1.0）與相對保留時間為0.9處的雜質(zhì)峰的分離度和鏈霉素峰與妥布霉素峰的分離度分別應不小于1.2和1.5。連續(xù)進樣5次，鏈霉素峰面積的相對標準偏差應不大于2.0%。

取本品適量，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含鏈霉素3.5mg的溶液，作為供試品溶液。精密量取供試品溶液適量，加水稀釋制成每1ml中約含鏈霉素35μg、70μg和140μg的溶液，作為對照溶液（1）、（2）、（3）。照含量測定項下的色譜條件，量取對照溶液（2）10μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為滿量程的10%～20%，精密量取對照溶液（1）、（2）、（3）各10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以對照溶液濃度的對數(shù)值與相應峰面積的對數(shù)值計算回歸方程，相關系數(shù)（r）應不小于0.99。另取供試品溶液，同法測定，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2倍，用回歸方程計算，最大單一雜質(zhì)不得過2.0%，雜質(zhì)總量不得過5.0%。單一雜質(zhì)限量=C單一雜質(zhì)濃度/C主成分濃度×100%≦2.0%雜質(zhì)總量=C雜質(zhì)總濃度/C主成分濃度×100%≦5.0%微生物檢定法第四節(jié)含量測定微生物檢定法例硫酸鏈霉素Ch.P（2010）

【含量測定】精密稱