中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB5009198—2016

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食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)

貝類中失憶性貝類毒素的測定

2016-12-23發(fā)布2017-06-23實(shí)施

中華人民共和國國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會發(fā)布

國家食品藥品監(jiān)督管理總局

GB5009198—2016

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前言

本標(biāo)準(zhǔn)代替貝類記憶喪失性貝類毒素軟骨藻酸的測定

GB/T5009.198—2003《》、SN/T1070—

進(jìn)出口貝類中記憶喪失性貝類毒素檢驗(yàn)方法進(jìn)出口貝類中軟骨藻酸的檢測

2002《》、SN/T1867—2007《

方法液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法貝類中失憶性貝類毒素檢驗(yàn)方法酶聯(lián)免疫吸附

-》、SN/T2663—2010《

法

》。

本標(biāo)準(zhǔn)與相比主要變化如下

GB/T5009.198—2003,:

標(biāo)準(zhǔn)名稱修改為食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)貝類中失憶性貝類毒素的測定

———“”;

修改了固相萃取條件

———;

改變了流動相

———;

增加了酶聯(lián)免疫吸附法

———;

增加了液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法

———-。

Ⅰ

GB5009198—2016

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食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)

貝類中失憶性貝類毒素的測定

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了貝類中失憶性貝類毒素測定的酶聯(lián)免疫吸附法液相色譜法和液相色譜串聯(lián)質(zhì)

、-

譜法

。

本標(biāo)準(zhǔn)中酶聯(lián)免疫吸附法適用于貝類及其制品中失憶性貝類毒素的測定液相色譜法和液相色譜

,-

串聯(lián)質(zhì)譜法適用于貝類及其制品不包括鹽漬制品中失憶性貝類毒素軟骨藻酸的測定

()(DA)。

酶聯(lián)免疫吸附法

2原理

本方法測定基礎(chǔ)是競爭性酶聯(lián)免疫反應(yīng)酶標(biāo)板上包被有針對軟骨藻酸抗體的捕捉抗體加入抗軟

,,

骨藻酸抗體標(biāo)準(zhǔn)液或樣品溶液及軟骨藻酸酶標(biāo)記物游離的失憶性貝類毒素與軟骨藻酸酶標(biāo)記物競爭

、,

軟骨藻酸抗體同時軟骨藻酸抗體與捕捉抗體連接沒有結(jié)合的酶標(biāo)記物在洗滌步驟中被除去將酶

,。。

基質(zhì)和顯色劑加入到微孔中并且孵育結(jié)合的酶標(biāo)記物將無色的發(fā)色劑轉(zhuǎn)化為藍(lán)色的產(chǎn)物加入反應(yīng)

。。

終止液后使顏色由藍(lán)轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色在測量微孔溶液的吸光度值試樣中失憶性貝類毒素的含

。450nm,

量與吸光度值成反比按繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線定量計(jì)算

,。

3試劑和材料

除非另有說明本方法所用試劑均為分析純水為規(guī)定的一級水

,,GB/T6682。

31試劑

.

311甲醇

..(CH3OH)。

312十二水合磷酸氫二鈉

..(Na2HPO4·12H2O)。

313氯化鈉

..(NaCl)。

314氯化鉀

..(KCl)。

315磷酸二氫鉀

..(KH2PO4)。

316吐溫

..-20(C58H114O26)。

317抗抗體

..DA。

318牛血清白蛋白

..(BSA)。

319酶標(biāo)記物

..DA。

3110過氧化氫

..