中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅５４１３．１６—２０１０

食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

嬰幼兒食品和乳品中葉酸

（葉酸鹽活性）的測(cè)定

犖犪狋犻狅狀犪犾犳狅狅犱狊犪犳犲狋狔狊狋犪狀犱犪狉犱

犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犳狅犾犻犮犪犮犻犱（犳狅犾犪狋犲犪犮狋犻狏犻狋狔）犻狀犳狅狅犱狊犳狅狉犻狀犳犪狀狋狊犪狀犱

狔狅狌狀犵犮犺犻犾犱狉犲狀，犿犻犾犽犪狀犱犿犻犾犽狆狉狅犱狌犮狋狊

２０１００３２６發(fā)布２０１００６０１實(shí)施

中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部發(fā)布

書

犌犅５４１３．１６—２０１０

前言

本標(biāo)準(zhǔn)代替ＧＢ／Ｔ５４１３．１６—１９９７《嬰幼兒配方食品和乳粉葉酸（葉酸鹽活性）測(cè)定》。

本標(biāo)準(zhǔn)與ＧＢ／Ｔ５４１３．１６—１９９７相比，主要變化如下：

———對(duì)磷酸鹽緩沖液作了調(diào)整；

———增加了米粉的處理方法；

———增加了光密度法測(cè)定步驟。

本標(biāo)準(zhǔn)所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為：

———ＧＢ５４１３—１９８５、ＧＢ／Ｔ５４１３．１６—１９９７。

Ⅰ

書

犌犅５４１３．１６—２０１０

食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

嬰幼兒食品和乳品中葉酸

（葉酸鹽活性）的測(cè)定

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了嬰幼兒食品和乳品中葉酸（葉酸鹽活性）的測(cè)定方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于嬰幼兒食品和乳品中葉酸（葉酸鹽活性）的測(cè)定。

２規(guī)范性引用文件

本標(biāo)準(zhǔn)中引用的文件對(duì)于本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版

本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

３原理

利用干酪乳桿菌（犔犪犮狋狅犫犪犮犻犾犾狌狊犮犪狊犲犻）ＡＴＣＣ７４６９對(duì)葉酸的特異性，在含有葉酸的樣品中生長(zhǎng)產(chǎn)生

的酸度和形成的光密度來測(cè)定葉酸的含量。

４試劑和材料

除非另有規(guī)定，本方法所用試劑均為分析純，水為ＧＢ／Ｔ６６８２規(guī)定的二級(jí)水。

４．１雞胰腺：稱?。保埃埃恚绺稍锏碾u胰腺，加２０ｍＬ蒸餾水，攪拌１５ｍｉｎ，離心１０ｍｉｎ（３０００轉(zhuǎn)／分鐘），

取上清液，臨用前配制。

４．２０．９％生理鹽水：稱?。梗埃缏然c溶解于１０００ｍＬ水中，分裝于具塞試管中，每管１０ｍＬ，１２１℃

滅菌１５ｍｉｎ。每周準(zhǔn)備一次。

４．３磷酸鹽緩沖液。

４．３．１磷酸鹽緩沖液Ⅰ（０．０５ｍｏｌ／Ｌ）：稱取５．８５ｇ磷酸二氫鉀，１．２２ｇ磷酸氫二鉀，用１０００ｍＬ水溶

解。臨用前按０．５ｇ／１００ｍＬ加入抗壞血酸。

４．３．２磷酸鹽緩沖液Ⅱ（用于谷物及谷物制品前處理）：稱取１４．２ｇ磷酸氫二鈉，用１０００ｍＬ水溶解。

臨用前按１．０ｇ／１００ｍＬ加入抗壞血酸，用氫氧化鈉溶液Ａ（４．１６）調(diào)ｐＨ至７．８±０．１。

４．３．３磷酸鹽緩沖液Ⅲ（用于谷物及谷物制品測(cè)試）：稱取１４．２ｇ磷酸氫二鈉，用１０００ｍＬ水溶解。

臨用前按１．０ｇ／１００ｍＬ加入抗壞血酸，用氫氧化鈉溶液Ａ（４．１６）調(diào)ｐＨ至６．８±０．１。

４．３．４磷酸鹽緩沖液Ⅳ（０．１ｍｏｌ／Ｌ）（用于谷物及谷物制品標(biāo)準(zhǔn)溶液制備）：溶解１３．６１ｇ磷酸二氫鉀

于水中稀釋到１０００ｍＬ。用氫氧化鉀溶液（４．１０）調(diào)ｐＨ至７．０±０．１。

４．４葉酸標(biāo)準(zhǔn)品。

４．５氨水（１０．８％）。

４．６甲苯（Ｃ７Ｈ８