發(fā)布發(fā)布湖北省市場監(jiān)督管理局2023030620230106Preventionandcontroltechnologyofswinedisease—Part3：TechnicalregulationsofsamplecollectionformonitoringafricanswinefevervirusICS65.020.30ICS65.020.30CCSB41湖 北 省 地 方 標 準DB42/T1786.3—2023生豬疫病防控技術3DB42/T1786.3—2023DB42/T1786.3—2023DB42/T1786.3—2023DB42/T1786.3—2023目 次前言 III引言 V1范引文件 1語定義 1品集理檢法 1采前備 1樣的集 2樣處、存輸 2檢方法 2場境測品集 2采位選原則 2環(huán)監(jiān)樣采法 2辦及活樣集 2豬內境測采集 3豬外境測采集 3人監(jiān)樣采集 3車監(jiān)樣采集 4群測品集 4理案 4案錄 4附錄A（料） 車樣品集位意圖 6附錄B（料） 種群樣采數計公式 7附錄C（范） 群數量大采數表 8IIIIIIIIIII前 言本文按GB/T1.1—2020《準工導則 第部分標化件結和起規(guī)》起草。本文件是DB42/T1786《生豬疫病防控技術》的第3部分。DB42/T1786已經發(fā)布了以下部分：——第1部分：偽狂犬病監(jiān)測評估技術規(guī)程；——第2部分：傳染性胸膜肺炎監(jiān)測評估技術規(guī)程；——第3部分：非洲豬瘟監(jiān)測樣品采集技術規(guī)程。本文件為首次發(fā)布。本文件實施應用中的疑問，可咨詢湖北省農業(yè)農村廳，聯系電話bxms@163.com。IVIVVV引 言（OIE）DB42/T1786——第1部分：偽狂犬病監(jiān)測評估技術規(guī)程。目的在于對采用的檢測技術，監(jiān)測群體的規(guī)模以及監(jiān)測頻次提出相應的規(guī)范要求。——第2部分：傳染性胸膜肺炎監(jiān)測評估技術規(guī)程。目的在于對豬傳染性胸膜肺炎的檢測、預防和治療提出相應的規(guī)范要求。——3DB42/T1786.3—2023DB42/T1786.3—2023DB42/T1786.3—2023DB42/T1786.3—202311采樣前準備4 監(jiān)測品 monitoringsample取自生豬或環(huán)境，擬通過檢測反映個體、群體或者環(huán)境有關狀況的材料或物料。監(jiān)測 monitoring采用規(guī)定的方法，持續(xù)對特定群體中疫病的發(fā)生、流行、分布及相關因素進行觀察和檢測的過程。非洲瘟 africanswinefever是由非洲豬瘟病毒（ASFV）感染家豬和野豬的一種急性、熱性、高度接觸性動物傳染病，以高熱、網狀內皮系統出血和高死亡率為特征。[來源：SN/T1559-2010，3.1，有修改]下列術語和定義適用于本文件。3 GB/T27522 NY/T541 NY/T1948 SN/T1559-2010 生豬疫病防控技術第3部分:非洲豬瘟監(jiān)測樣品采集技術規(guī)程范圍（GB/T18648 GB 19489 GB/T25169 22采樣位置選擇原則工作中高頻率接觸點、不易清洗點等高風險點。環(huán)境監(jiān)測樣品采集方法戴一次性PE手套，將用生理鹽水充分浸濕的無菌棉拭子在物體表面涂抹3-5次后，放入裝有1-2ml滅菌PBS的離心管中。做好標記后冷藏或冷凍狀態(tài)下保存或送檢。辦公及生活區(qū)樣品采集辦公及生活區(qū)各場所樣品采集按表1規(guī)定執(zhí)行。表1 辦公生區(qū)品集數及樣率采樣人員經洗手消毒，穿戴好一次性手套、防護服、口罩、鞋套，攜帶采樣所需物品。PBS75樣品的采集NY/T541GB/T25169275222-5g6樣品處理、保存與運輸樣品處理、保存及運輸，應符合NY/T541中的規(guī)定。檢測方法按GB/T18648中的非洲豬瘟病毒實時熒光PCR檢測方法檢測非洲豬瘟病毒核酸。采樣區(qū)域采樣點樣品份數采樣頻率藥房地面、墻壁、門把手、藥品貨架、窗戶、桌椅每個采樣點采集3-5個樣品，每個采樣區(qū)域的樣品混1進行檢測。每周1次庫房地面、墻壁、門把手、窗戶、墊板、貨架、維修工具把手辦公室地面、墻壁、門把手、窗戶、桌椅獸醫(yī)室門把手宿舍水孔門衛(wèi)房地面、墻壁、門把手、窗戶、桌椅、鑰匙33人員監(jiān)測樣品采集豬舍外環(huán)境監(jiān)測樣品采集豬舍外環(huán)境樣品采集按表3規(guī)定執(zhí)行。表3 豬舍環(huán)樣采點樣品集數采頻率表1 辦及活樣集份及樣率續(xù)）采樣區(qū)域采樣點樣品份數采樣頻率洗澡間地面、墻壁、門把手、窗戶、盥洗臺面、水龍頭把手、排水孔每個采樣點采集個樣品，每個采樣區(qū)域的樣1樣本進行檢測。每周1次餐廳地面、墻壁、門把手、窗戶、桌椅化驗室操作臺面、冰箱門外表面、地面、門把手、座椅、顯微鏡調焦把手廚房冰箱冰柜門把手、蔬菜筐外來物資表面飼料、獸藥、食材、果蔬、辦公用品及外包裝每次進場前豬舍內環(huán)境樣品采集按表2規(guī)定執(zhí)行。表2 豬舍環(huán)樣采點樣品集數采頻率采樣區(qū)域采樣點樣品份數采樣頻率豬舍欄位3盤、料桶每個采樣點域采集1-2份樣品，51份。每周1次舍內過道豬舍內每個過道，選取至少3處豬舍糞道側壁、糞溝內水樣、生產工具(糞鏟或掃把)各2處通風系統所有風機葉片，防護網窗口各2處豬舍水源每棟豬舍采集2處采樣區(qū)域采樣點樣品份數采樣頻率主要道路（無交叉路面的為一段3個點采集混合樣品每個采樣點采集1-2份樣5每周1次出豬臺地面、墻壁、地磅、欄桿、擋板趕豬通道地面、欄桿、擋板豬舍外墻每棟舍每塊水簾縫隙、窗戶滑道，各3處無害化處理點地面、墻壁、門把手、窗戶糞污每棟的排污口、場區(qū)主排污口污水每棟的排污口、場區(qū)主排污口洗消點所有通道、墻壁、排污口冷庫墻壁、門把手、通道土壤主要道路邊、豬舍周邊裸露的土壤8 8 4按照本文件采樣方案檢測樣品中如非洲豬瘟病毒核酸出現陽性，則按照國家現行非洲豬瘟疫情處19489和NY/T1948GB194897 表5 不同群樣例采頻率各類人員樣品采集按表4規(guī)定執(zhí)行。表4 各類員品集數采樣率人員分類采樣部位及份數采樣頻率豬場隔離點人員用生理鹽水浸濕的無菌棉拭子采集1每次入場前洗消人員、司機每隔3天1次生豬轉運人員（司機、趕豬人員、司磅員等）每次入場前其他人員每次入場前場內辦公及生產人員每月一次車輛監(jiān)測樣品采集2011。豬群監(jiān)測樣品采集時不同豬群的抽樣比例及采樣頻率按表5規(guī)定執(zhí)行。豬群抽樣比例（%）樣品類型采樣頻率新引種豬100扁桃體、口鼻拭子每次引種前種公豬100扁桃體、口鼻拭子每月一次后備種豬100扁桃體、口鼻拭子生產母豬B件下，不同預期流行率、不同可接受誤差的采樣數量參見附錄C。口鼻拭子口鼻拭子口鼻拭子保育豬口鼻拭子育成豬口鼻拭子異常豬/病死豬100尾根血拭子、深部咽拭子、口腔液、腹股溝淋巴結隨時注：每5頭豬樣混成一份樣品檢測。55附錄A（資料性）車輛樣品采集部位示意圖小型車監(jiān)測樣品采集部位參見圖1。圖A.1小型車監(jiān)測樣品采集部位示意圖貨車等大型車監(jiān)測樣品采集部位參見圖2。圖A.2大型車監(jiān)測樣品采集部位示意圖6附錄B（資料性）種豬群樣品采集數量計算公式群內個體數量大，對抽樣數量的影響可忽略不計時，采樣數量的公式如下：2??=??(1???)×??2 (B.1)2??式中：P——預期流行率；z——1-α/2z90%951.641.96e——可接受的最大絕對誤差。7式中：n7式中：n——無限群的抽樣數量；N——目標群內的個體數。一般