ICS65.020.30B44中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T14926.26—2001代替GB/T14926.26-1994實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小鼠腦脊髓炎病毒檢測(cè)方法Laboratoryanimal-MethodforexaminationofTheiler'smouseencephalomyelitisvirus（TEMV)2001-08-29發(fā)布2002-05-01實(shí)施中華人民共和國(guó)發(fā)布國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

GB/T14926.26-2001前本標(biāo)準(zhǔn)是對(duì)GB/T14926.26一1994實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小鼠腦脊髓炎病毒檢驗(yàn)方法》的修訂。對(duì)檢測(cè)方法未作改動(dòng).僅對(duì)原標(biāo)準(zhǔn)的個(gè)別文字作丁修改。本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)科學(xué)技術(shù)部提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)會(huì)。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：屈霞琴。本標(biāo)準(zhǔn)于1994年1月首次發(fā)布

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物GB/T14926.26-2001小鼠腦脊髓炎病毒檢測(cè)方法代替GB/T14926.26-1994Laboratoryanimal-MethodforexaminationofTheiler'smouseencephalomyelitisvirus（TMEV)1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了小鼠腦脊髓炎病毒(TMEV)的檢測(cè)方法、試劑等.本標(biāo)準(zhǔn)適用于小鼠「MEV的檢測(cè)2引用標(biāo)準(zhǔn)下列標(biāo)準(zhǔn)所包含的條文·通過(guò)在本標(biāo)準(zhǔn)中引用而構(gòu)成為本標(biāo)準(zhǔn)的條文。本標(biāo)準(zhǔn)出版時(shí)·所示版本均為有效。所有標(biāo)淮都會(huì)被修訂，使用本標(biāo)淮的各方應(yīng)探討使用下列標(biāo)準(zhǔn)最新版本的可能性。GB/T14926.50—2001實(shí)驗(yàn)動(dòng)物酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)GB/T14926.51-2001實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物免疫酶試驗(yàn)GB/T14926.52—2001實(shí)驗(yàn)動(dòng)物」免疫熒光試驗(yàn)GB/T14926.54-2001實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血凝抑制試驗(yàn)3原理根據(jù)免疫學(xué)原理,采用TMEV抗原檢測(cè)小鼠血清中TMEV抗體;或根據(jù)TMEV在一定的條件下，能凝集人"O"型紅細(xì)胞.這種凝集紅細(xì)胞的能力可被特異性抗體所抑制的原理,檢測(cè)小鼠血清中TMEV抗體4主要試劑和器材4.1試劑4.1.1EIISA抗原4.1.1.1特異性抗原TMEV(GDu株)感染小鼠，待發(fā)病后取腦，研磨,制成10%懸液,3000r/min離心10min后取上清液接種BHK21細(xì)胞，吸附1.5～2h.加維持液培養(yǎng)4～5d左右,當(dāng)細(xì)胞病變達(dá)十十～十十十時(shí)收獲凍融三次或超聲波處理后，低速離心去除細(xì)胞碎片，上清液再經(jīng)超速離心濃縮后制成EL.ISA抗原。4.1.1.2正常抗原BHK21細(xì)胞凍融破碎后，經(jīng)低速離心去除細(xì)胞碎片而獲得的上清液4.1.2抗原片TMEV(GDM棟)感染BHK21細(xì)胞.培養(yǎng)4～5d.病變達(dá)十十～十十十時(shí)，將細(xì)胞用映酶分散，用PBS洗滌·滿片。室溫干燥后,冷