犐犆犛６５．０２０．３０

犅４４

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜１４９２６．５７—２００８

代替ＧＢ／Ｔ１４９２６．５７—２００１

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物犬細(xì)小病毒檢測(cè)方法

犔犪犫狅狉犪狋狅狉狔犪狀犻犿犪犾—犕犲狋犺狅犱犳狅狉犲狓犪犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犆犪狀犻狀犲狆犪狉狏狅狏犻狉狌狊

２００８１２０３發(fā)布２００９０３０１實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

書

犌犅／犜１４９２６．５７—２００８

前言

ＧＢ／Ｔ１４９２６《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物》共５４個(gè)部分，為不同微生物和病毒檢測(cè)技術(shù)方法。

本部分自實(shí)施之日起代替ＧＢ／Ｔ１４９２６．５７—２００１《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物犬細(xì)小病毒檢測(cè)方法》。

本部分與ＧＢ／Ｔ１４９２６．５７—２００１相比主要技術(shù)差異如下：

ａ）在“３原理”中“或根據(jù)ＣＰＶ在一定的條件下，能凝集豬的紅細(xì)胞，這種凝集紅細(xì)胞的能力可

被特異性抗體所抑制的原理，檢測(cè)犬血清中ＣＰＶ抗體”修改為“或根據(jù)ＣＰＶ在一定的條件下，

能凝集豬或恒河猴的紅細(xì)胞，這種凝集紅細(xì)胞的能力可被特異性抗體所抑制的原理，檢測(cè)犬血

清中ＣＰＶ抗體”；

ｂ）“４．１．６豬紅細(xì)胞”修改為“４．１．６豬或恒河猴紅細(xì)胞”；

ｃ）“６結(jié)果判定”中增加了“６．３基礎(chǔ)級(jí)犬群體免疫抗體合格率免疫抗體合格率＝（被檢動(dòng)物

抗體陽性數(shù)／被檢動(dòng)物總數(shù)）×１００％?；A(chǔ)級(jí)犬群體免疫抗體合格率大于等于７０％以上可判

為該犬群免疫合格”內(nèi)容。

本部分由全國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口。

本部分由全國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)負(fù)責(zé)起草。

本部分主要起草人：田克恭、賀爭(zhēng)鳴、范薇。

本部分所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為：

———ＧＢ／Ｔ１４９２６．５７—２００１。

Ⅰ

書

犌犅／犜１４９２６．５７—２００８

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物犬細(xì)小病毒檢測(cè)方法

１范圍

ＧＢ／Ｔ１４９２６的本部分規(guī)定了犬細(xì)小病毒（ＣＰＶ）的檢測(cè)方法、試劑等。

本部分適用于犬ＣＰＶ的檢測(cè)。

２規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過ＧＢ／Ｔ１４９２６的本部分的引用而成為本部分的條款。凡是注日期的引用文

件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本部分，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本部分達(dá)成

協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本

部分。

ＧＢ／Ｔ１４９２６．５０實(shí)驗(yàn)動(dòng)物酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

ＧＢ／Ｔ１４９２６．５４實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血凝抑制試驗(yàn)

３原理

根據(jù)免疫學(xué)原理，采用ＣＰＶ抗原檢測(cè)犬血清中ＣＰＶ抗體；或根據(jù)ＣＰＶ在一定的條件下，能凝集豬

或恒河猴的紅細(xì)胞，這種凝集紅細(xì)胞的能力可被特異性抗體所抑制的原理，檢測(cè)犬血清中ＣＰＶ抗體。

４主要試劑和器材

４．１試劑

４．１．１ＥＬＩＳＡ抗原

４．１．１．１特異性抗原

ＣＰＶ感染ＦＫ８１細(xì)胞，接種３ｄ～５ｄ后，當(dāng)病變達(dá)＋＋＋～＋＋＋＋（－陰性；＋輕；＋＋中；

＋＋＋重；＋＋＋＋嚴(yán)重，下同）時(shí)收獲。凍融三次或超聲波處理后，低速離心去除細(xì)胞碎片，上清液再

經(jīng)超速離心濃縮后制成ＥＬＩＳＡ抗原。

４．１．１．２正?？乖?/p>

ＦＫ８１細(xì)胞凍融破碎后，經(jīng)低速離心去除細(xì)胞碎片而獲得的上清液。

４．１．２血凝素

ＣＰＶ接種ＦＫ８１細(xì)胞，培養(yǎng)３ｄ～５ｄ，當(dāng)病變達(dá)＋＋＋～＋＋＋＋時(shí)收獲。凍融三次或超聲波處理

后，低速離心去除細(xì)胞碎片，上清液分裝后低溫保存。

４．１．３陽性血清

ＣＰＶ實(shí)驗(yàn)感染或自然感染的犬血清。

４．１．４陰性