犐犆犛１１．２２０

犅４１

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜１７９９９．６—２００８

代替ＧＢ／Ｔ１７９９９．５—１９９９

犛犘犉雞微生物學(xué)監(jiān)測(cè)

第６部分：犛犘犉雞酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

犛犘犉犮犺犻犮犽犲狀—犕犻犮狉狅犫犻狅犾狅犵犻犮犪犾狊狌狉狏犲犻犾犾犪狀犮犲—

犘犪狉狋６：犈狀狕狔犿犲犾犻狀犽犲犱犻犿犿狌狀狅狊狅狉犫犲狀狋犪狊狊犪狔犳狅狉犛犘犉犮犺犻犮犽犲狀

２００８１２３１發(fā)布２００９０５０１實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

書(shū)

中華人民共和國(guó)

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

犛犘犉雞微生物學(xué)監(jiān)測(cè)

第６部分：犛犘犉雞酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

ＧＢ／Ｔ１７９９９．６—２００８

中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

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２００９年４月第一版２００９年４月第一次印刷

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書(shū)

犌犅／犜１７９９９．６—２００８

前言

ＧＢ／Ｔ１７９９９《ＳＰＦ雞微生物學(xué)監(jiān)測(cè)》分為１０個(gè)部分：

———第１部分：ＳＰＦ雞微生物學(xué)監(jiān)測(cè)總則；

———第２部分：ＳＰＦ雞紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)；

———第３部分：ＳＰＦ雞血清中和試驗(yàn)；

———第４部分：ＳＰＦ雞血清平板凝集試驗(yàn)；

———第５部分：ＳＰＦ雞瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)；

———第６部分：ＳＰＦ雞酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)；

———第７部分：ＳＰＦ雞胚敏感試驗(yàn)；

———第８部分：ＳＰＦ雞雞白痢沙門氏菌檢驗(yàn)；

———第９部分：ＳＰＦ雞試管凝集試驗(yàn)；

———第１０部分：ＳＰＦ雞間接免疫熒光試驗(yàn)。

本部分為ＧＢ／Ｔ１７９９９的第６部分。

本部分修訂參照了ＧＢ／Ｔ１８９３６—２００３《高致病性禽流感診斷技術(shù)》、ＧＢ／Ｔ１９１６７—２００３《傳染性囊

病診斷技術(shù)》、ＮＹ／Ｔ５３８—２００２《雞傳染性鼻炎診斷技術(shù)》、ＯＩＥ《陸生動(dòng)物（哺乳動(dòng)物、禽鳥(niǎo)和蜜蜂）診斷

試驗(yàn)和疫苗手冊(cè)》（第五版）中的有關(guān)規(guī)定。

本部分代替ＧＢ／Ｔ１７９９９．５—１９９９《ＳＰＦ雞酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)》。

本部分與ＧＢ／Ｔ１７９９９．５—１９９９相比主要變化如下：

———增加了間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)；

———增加了附錄Ａ“試劑的配制”。

本部分的附錄Ａ為規(guī)范性附錄。

本部分由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部提出。

本部分由全國(guó)動(dòng)物防疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（ＳＡＣ／ＴＣ１８１）歸口。

本部分起草單位：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所、中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心、濟(jì)南斯帕法

斯家禽有限公司。

本部分主要起草人：曲連東、姜騫、韓凌霞、邵衛(wèi)星、朱果、單忠芳、劉家森、司昌德、郭東春、于海波、

孟慶文。

本部分所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為：

———ＧＢ／Ｔ１７９９９．５—１９９９。

Ⅰ

書(shū)

犌犅／犜１７９９９．６—２００８

犛犘犉雞微生物學(xué)監(jiān)測(cè)

第６部分：犛犘犉雞酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

１范圍

ＧＢ／Ｔ１７９９９的本部分規(guī)定了酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的技術(shù)要求。

本部分間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)適用于對(duì)ＳＰＦ雞進(jìn)行以下病原微生物的血清抗體檢測(cè)：副雞嗜血桿

菌（犎犪犲犿狅狆犺犻犾狌狊）、雞毒支原體（犕狔犮狅狆犾犪狊犿犪犵犪犾犾犻狊犲狆狋犻犮狌犿）、滑液囊支原體（犕狔犮狅狆犾犪狊犿犪狊狔狀狅狏犻犪犲）、

禽流感病毒（ＡｖｉａｎＩｎｆｌｕｅｚａＶｉｒｕｓ）、新城疫病毒（ＮｅｗｃａｓｔｌｅＤｉｓｅａｓｅＶｉｒｕｓ）、傳染性支氣管炎病毒

（ＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓＢｒｏｎｃｈｉｔｉｓＶｉｒｕｓ）、傳染性法氏囊病病毒（ＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓＢｕｒｓａｌＤｉｓｅａｓｅＶｉｒｕｓ）、網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥

病毒（ＲｅｔｉｃｕｌｏｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｓｉｓＶｉｒｕｓ）、雞傳染性貧血病毒（ＣｈｉｃｋｅｎＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓＡｎａｅｍｉａＶｉｒｕｓ）、禽呼腸孤

病毒（病毒性關(guān)節(jié)炎）（ＡｖｉａｎＲｅｏｖｉｒｕｓ）、禽腦脊髓炎病毒（ＡｖｉａｎＥｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓＶｉｒｕｓ）、傳染性喉氣

管炎病毒（ＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓＬａｒｙｎｇｏｔｒａｃｈｅｉｔｉｓＶｉｒｕｓ）、禽腺病毒Ⅲ群（ＥＤＳ）（ＡｖｉａｎＡｄｅｎｏｖｉｒｕｓＧｒｏｕｐⅢ）、淋

巴細(xì)胞白血病病毒（ＬｙｍｐｈｏｉｄＬｅｕｋｏｓｉｓＶｉｒｕｓ）。

本部分雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)適用于對(duì)ＳＰＦ雞進(jìn)行淋巴細(xì)胞白血病病毒Ｐ２７抗原檢測(cè)。

２原理

間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)采用已知微生物抗原檢測(cè)未知抗體，雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)采用已

知抗體檢測(cè)未知抗原。

３間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

３．１試劑

３．１．１包被抗原，陰性、陽(yáng)性對(duì)照血清，羊抗雞ＬｇＧ酶標(biāo)抗體，按說(shuō)明書(shū)保存和使用。

３．１．２包被液、稀釋液、底物液、終止液配制方法見(jiàn)附錄Ａ。

３．