細辛精油和化學藥劑對茄子枯萎病菌生長的抑制,植物保護論文茄子〔SolanummelongenaL.〕是一種重要的蔬菜，在我們國家栽種面積達20余萬hm2。近年來，茄子病害日益嚴重，華而不實茄子枯萎病〔Fusariumoxysporumf.sp.melongenaeMatuoetlshigamiSchlecht.〕是一種常見的土傳性病害，可引起維管束病變，造成植株死亡，使病田減產(chǎn)20％~30％，嚴重時高達50％~60％，甚至絕產(chǎn)。生產(chǎn)綠色有機蔬菜時，防治病害應主要采用生物防治方式，以減少農藥對環(huán)境和人畜的危害，防止病原菌產(chǎn)生抗藥性及再泛濫。細辛〔Asarumhet-erotropoidesFr.Schmidtvar.Mandshuricum〔Maxrm〕Kitag.〕屬常用中草藥，其活性物質主要為揮發(fā)油精油。王桂清等的研究表示清楚，細辛精油具有廣譜抑菌活性，對玉米、黃瓜、果樹、棉花、木本花卉等多種植物病害致病菌具有抑制作用。以茄子枯萎病菌為靶標病原菌、細辛精油為研究對象、3種化學藥劑為對照，研究細辛精油和化學藥劑對茄子枯萎病菌菌絲生長和孢子萌發(fā)的抑菌效果，為將細辛精油開發(fā)成植物源殺菌劑提供理論根據(jù)。1材料與方式方法1.1供試菌種茄子枯萎病菌來源于聊城大學農學院病理實驗室。該病原真菌病樣采集于聊城市許營村蔬菜大棚，經(jīng)分離、純化、鑒定后保存?zhèn)溆谩?.2供試制劑細辛精油采用超臨界CO2萃取法獲得，密封保存于4℃冰箱中。惡霉靈70%可濕性粉劑〔WP〕由山東煙臺鑫潤精細化工有限公司生產(chǎn)；撲海因500g/L懸浮劑〔SC，有效成分通用名稱為異菌脲〕由拜耳杭州作物科學有限公司生產(chǎn)；嘧霉胺30%懸浮劑〔SC〕由山東京博農化有限公司生產(chǎn)。1.3制劑配制1〕菌絲生長抑制液：用少量二甲基亞砜溶解細辛精油〔不超過總體積的2％〕，然后用無菌水配制成10000mg/L的母液，采用二倍稀釋法配成10000，5000，2500，1250，625mg/L等5個濃度梯度；3種化學藥劑分別用無菌水配制成2000，1000，500，250，125mg/L等5個濃度梯度。2〕孢子萌發(fā)抑制液：細辛精油的配制方式方法同1〕；3種化學藥劑的5個濃度梯度為1000.0，500.0，250.0，125.0，62.5mg/L。1.4生物測定方式方法1〕生長速率法。采用生長速率法測定細辛精油和3種化學藥劑對茄子枯萎病菌菌絲生長的抑制作用，培養(yǎng)基為含藥PDA，空白對照不加藥，3次重復。細辛精油終濃度為1000.0，500.0，250.0，125.0，62.5mg/L，3種化學藥劑終濃度分別為200.0，100.0，50.0，25.0，12.5mg/L。2〕孢子萌發(fā)法。采用孢子萌發(fā)法測定細辛精油和3種化學藥劑對茄子枯萎病菌孢子萌發(fā)的抑制作用，3次重復。細辛精油終濃度為1000.0，500.0，250.0，125.0，62.5mg/L，3種化學藥劑終濃度分別為100.00，50.00，25.00，12.50，6.25mg/L。1.5數(shù)據(jù)處理及毒力回歸曲線建立應用MicrosoftExcel軟件處理數(shù)據(jù)；采用SPSS10.0軟件建立毒力回歸曲線，將抑菌的百分率轉換成幾率值，濃度轉換成對數(shù)，進行幾率值分析，分別求出細辛精油和3種化學藥劑的抑制中濃度〔EC50〕；利用DPSv7.05專業(yè)版軟件，根據(jù)Duncar新復極差法進行差異顯著性分析。2結果與分析2.1細辛精油對菌絲生長的抑制作用供試條件下，細辛精油和3種化學農藥對茄子枯萎病菌菌絲生長的抑制效果見表1和表2。由表1和表2能夠看出：細辛精油和3種化學農藥對茄子枯萎病菌菌絲生長均有抑制作用，且隨著制劑濃度的升高，抑制率逐步增加；一樣濃度條件下，不同藥劑對菌絲生長的抑制效果不同；當濃度100mg/L時，嘧霉胺、撲海因和惡霉靈三者的抑菌效果差異性顯著，華而不實撲海因的效果最佳，當濃度為50mg/L時，其抑菌率超過了50％；濃度為200mg/L時，撲海因和嘧霉胺的抑菌效果差異性不顯著，抑菌率分別為86.42％和88.01％；當細辛精油濃度為1000mg/L時，其對菌絲生長的抑制率到達61.48％。由表2能夠看出：細辛精油和3種化學農藥對茄子枯萎病菌菌絲生長的抑制效果存在差異，3種化學農藥中撲海因的抑制效果最佳，EC50和EC90分別為41.08mg/L和155.76mg/L；嘧霉胺次之，EC50和EC90分別為58.30mg/L和216.25mg/L；惡霉靈的效果較差，EC50為827.07mg/L，EC90到達了18146.34mg/L；細辛精油的EC50為1009.72mg/L，而其EC90〔6962.07mg/L〕低于惡霉靈的EC90〔18146.34mg/L〕，講明細辛精油在較高濃度時的抑菌效果優(yōu)于惡霉靈。2.2細辛精油對孢子萌發(fā)的抑制作用細辛精油和3種化學農藥對枯萎病菌孢子萌發(fā)的抑制效果如表35所示。由表3和表4能夠看出：細辛精油和3種化學農藥對枯萎病菌孢子萌發(fā)的抑制效果隨著藥劑濃度的升高而加強；一樣濃度條件下，不同藥劑對枯萎病菌孢子萌發(fā)的抑制效果存在差異，當化學農藥濃度25.0mg/L時，撲海因、嘧霉胺和惡霉靈3種藥劑之間抑菌效果差異不顯著，但當濃度50.0mg/L時，3者之間則差異極顯著；3種化學農藥之中撲海因的抑菌效果最佳，惡霉靈的抑菌效果最差，當濃度為100.0mg/L時，前者的抑菌率〔90.13％〕是后者〔7.18％〕的12.55倍。細辛精油作為一種植物提取物，當濃度為500mg/L時，其對孢子萌發(fā)的抑制率到達84.63％，抑菌效果非常顯著。由表5能夠看出：細辛精油和3種化學農藥對茄子枯萎病菌孢子萌發(fā)的抑制效果差異較大：3種化學農藥中撲海因的抑菌效果最佳，EC50和EC90分別為42.05mg/L和133.50mg/L；嘧霉胺次之，EC50和EC90分別為71.64mg/L和221.47mg/L；而惡霉靈的抑制效果較差，EC50和EC90分別為7243.56mg/L和315212.95mg/L；細辛精油的EC50和EC90分別為348.99mg/L和776.99mg/L，與惡霉靈比擬，EC50提高了95.18％，EC90提高了99.75％，講明細辛精油對茄子枯萎病菌孢子萌發(fā)的抑菌效果明顯，遠優(yōu)于惡霉靈?？傮w而言，細辛精油對孢子萌發(fā)的抑制效果優(yōu)于對菌絲生長的抑制效果，EC50分別為348.99mg/L和1009.72mg/L；3種化學農藥中撲海因對枯萎病菌菌絲生長和孢子萌發(fā)的抑制效果最佳，EC50分別為41.08mg/L和42.05mg/L，惡霉靈的抑制效果較差，EC50分別為827.07mg/L和7243.56mg/L，分別為撲海因的20.13倍和172.26倍，為細辛精油的0.82倍和20.76倍；從EC90上看，細辛精油的抑菌效果比惡霉靈提高了61.63%〔菌絲生長〕和99.75％〔孢子萌發(fā)〕。3結論與討論采用生長速率法和孢子萌發(fā)法分別測定細辛精油和3種化學農藥〔70%惡霉靈WP、撲海因SC、30%嘧霉胺SC〕對茄子枯萎病菌菌絲生長和孢子萌發(fā)的抑菌效果。結果表示清楚：細辛精油對菌絲生長和孢子萌發(fā)的EC50分別為1009.72mg/L和348.99mg/L，其對孢子萌發(fā)的抑制效果明顯優(yōu)于對菌絲生長的抑制作用，講明細辛精油作為植物提取物對茄子枯萎病菌的主要作用方式為抑制孢子萌發(fā)，使其不能增殖，從根本上滅殺病原菌；從EC90上看，細辛精油的抑菌效果比惡霉靈高61.63％〔菌絲生長〕和99.75％〔孢子萌發(fā)〕，講明細辛精油在較高濃度時的抑菌效果優(yōu)于惡霉靈?？菸∈寝r作物、果蔬、花卉、苗木等的常見病害，使寄主植物長勢減弱或死亡，導致減產(chǎn)甚至絕產(chǎn)。生物防治不僅能夠有效控制病害的發(fā)生和危害，而且能夠提高產(chǎn)品產(chǎn)量和質量，減少對環(huán)境的污染和對人畜的危害。開發(fā)新的生防農藥尤其是植物源農藥，已成為植保界和化工界的研究新熱門。郭新春的研究發(fā)現(xiàn)，小茴香(FructusFoeniculi〕提取物對棉花枯萎病菌(F.oxysporumf.sp.〕有較強的抑菌活性，當濃度為0.1g/mL時抑菌率到達100％。王磊等的研究表示清楚：木香(Auck-landialappaDecne〕、丁香(Syzygiumaromaticum〕、肉桂(Cinnamomumcassia〕和大黃(Rheumpalmatum〕這4種植物的提取物對黃瓜枯萎病菌〔F.oxysporiumf.sp.cucumerinum〕和西瓜枯萎病菌〔F.oxysporumf.sp.Niveum〕均有明顯的抑制作用，當4種植物提取物濃度均為25mg/mL時，木香、丁香和肉桂的提取物對黃瓜枯萎病菌和西瓜枯萎病菌的菌絲生長抑制率均到達90％左右，大黃提取物對兩者菌絲生長的抑制率分別為54.5％和67.2％。范志宏等的研究表示清楚，萬壽菊(TageteserectaL.〕精油殺菌素對西瓜枯萎病菌有較強的抑制作用，當其濃度到達1.5g/mL時，抑制率到達100％。王樹桐等發(fā)現(xiàn)丁香等十幾種中草藥提取物對香蕉枯萎病菌(F.oxysporumf.sp.〕有一定的抑制作用，華而不實丁香提取物抑菌效果最好，對菌株B1和菌株B2的抑制濃度分別為3.40mg/mL和3.38mg/mL。王桂清采用細辛精油處理黃瓜枯萎病菌，發(fā)現(xiàn)當細辛精油濃度為1200mg/L時，對黃瓜枯萎病菌絲生長和孢子萌發(fā)的抑制率分別為85％和75％，EC50分別為314.12mg/L和860.43mg/L。以上研究講明，利用植物提取物防治枯萎病是可行的。本研究結果也表示清楚：細辛精油對茄子枯萎病菌有明顯的抑制效果。在實踐生產(chǎn)中，細辛精油能夠作為一種植物源殺菌劑來替代化學農藥防治茄子枯萎病的發(fā)生和危害。以下為參考文獻[1]張燕燕,柏廣利,孫雪花.茄子枯萎病的發(fā)生和綜合防治[J].當代農業(yè)科技,2018(10):174-179.[2]郝曉娟,劉波,謝關林.植物枯萎病生物防治研究進展[J].中國農學通報,2005,21(7):319-323.[3]段鶴君,付朝暉.細辛揮發(fā)油化學成分研究[J].中藥材,2018,33(4):562-5