ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T27981—2011

牛傳染性鼻氣管炎病毒實時

熒光PCR檢測方法

Real-timePCRmethodforthedetectionof

infectiousbovinerhinotracheitisvirus

2011-12-30發(fā)布2012-06-01實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T27981—2011

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)參考了發(fā)布的陸生動物診斷試驗和疫苗手冊版關(guān)于牛傳染性鼻氣管炎牛傳

OIE《》(2008)/

染性化膿性外陰陰道炎的內(nèi)容

(Chapter2.4.13)。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國動物防疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中華人民共和國廣東出入境檢驗檢疫局中華人民共和國江蘇出入境檢驗檢

:、

疫局

。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人陳茹劉中勇林志雄羅瓊曾碧健許如蘇姜焱吳曉薇

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T27981—2011

牛傳染性鼻氣管炎病毒實時

熒光PCR檢測方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了牛傳染性鼻氣管炎病毒牛皰疹病毒型實時熒光檢測方法的技術(shù)

(I,BoHV-1)PCR

要求

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于快速檢測牛血樣拭子精液動物組織粘膜肝脾腎淋巴結(jié)胎盤組織等和細(xì)胞

、、、(、、、、、)

培養(yǎng)物等樣品中病毒感染

BoHV-1。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T6682

世界動物衛(wèi)生組織陸生動物診斷試驗和疫苗標(biāo)準(zhǔn)手冊版關(guān)于檢測牛冷凍精液

(OIE)《》(2008)

中病毒的實時熒光方法

BoHV-1PCR

3縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

牛皰疹病毒型

BoHV-1:bovineherpesvirustype1,I。

值熒光信號量達(dá)到設(shè)定的閾值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)

Ct:。

脫氧核糖核酸

DNA:deoxyribonucleicacid,。

二硫蘇糖醇

DTT:DL-dithiothreitol,。

乙二胺四乙酸

EDTA:ethylenediaminetetraaceticacid,。

牛傳染性鼻氣管炎

IBR:bovineinfectiousrhinotracheitis,。

磷酸鹽緩沖生理鹽水

PBS:phosphatebuffersolution,。

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

PCR:polymerasechainreaction,。

十二烷基磺酸鈉

SDS:sodiumdodecylsulfate,。

酶尿嘧啶糖基化酶

UDG:uracilDNAglycosylase,DNA。

4設(shè)備和器材

41熒光儀

.PCR。

42臺式冷凍離心機

.。

43可調(diào)微量移液器規(guī)格

.:10μL、100μL、200μL、1mL。

44帶濾芯微量吸頭規(guī)格

.:10μL、100μL、200μL、1mL。

45光學(xué)反應(yīng)管

.PCR。

46微量離心管

.