ICS6502030

B41..

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T286303—2012

.

白斑綜合征WSD診斷規(guī)程

()

第3部分原位雜交檢測(cè)法

:

Diagnosticprotocolsforwhitespotdisease—

Part3Insituhbridizationmethod

:y

2012-07-31發(fā)布2012-11-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T286303—2012

.

前言

白斑綜合征診斷規(guī)程分為五個(gè)部分

GB/T28630《(WSD)》:

第部分核酸探針斑點(diǎn)雜交檢測(cè)法

———1:;

第部分套式檢測(cè)法

———2:PCR;

第部分原位雜交檢測(cè)法

———3:;

第部分組織病理學(xué)診斷法

———4:;

第部分新鮮組織的染色法

———5:T-E。

本部分為的第部分

GB/T286303。

本部分按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本部分由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部提出

。

本部分由全國(guó)水產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口

(SAC/TC156)。

本部分起草單位中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所農(nóng)業(yè)部全國(guó)水產(chǎn)技術(shù)推廣總站

:、。

本部分主要起草人黃倢楊冰陳愛(ài)平宋曉玲史成銀楊叢海魏琦劉莉

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T286303—2012

.

白斑綜合征WSD診斷規(guī)程

()

第3部分原位雜交檢測(cè)法

:

1范圍

的本部分規(guī)定了白斑綜合征原位雜交檢測(cè)法所需試劑與材料儀器設(shè)備操作步驟和

GB/T28630、、

結(jié)果判定

。

本部分適用于進(jìn)行對(duì)蝦及白斑綜合征的其他敏感宿主組織細(xì)胞的感染程度及病毒擴(kuò)增狀況的評(píng)估

和疾病的確診不適于對(duì)病毒的非感染性攜帶的標(biāo)本進(jìn)行病毒檢測(cè)

。。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡不注日期的引用文件其最新版本包括所有修改單適用于本文件

。,()。

白斑綜合征診斷規(guī)程第部分核酸探針斑點(diǎn)雜交檢測(cè)法

GB/T28630.1—2012(WSD)1:

白斑綜合征診斷規(guī)程第部分組織病理學(xué)診斷法

GB/T28630.4—2012(WSD)4:

3原理

31白斑綜合征的病原和病理學(xué)特征

.

見(jiàn)的

GB/T28630.4—20122.1。

32技術(shù)原理

.

原位雜交檢測(cè)方法是以非放射性標(biāo)記物地高辛標(biāo)記的白斑綜合征病毒核酸探

———(DIG)(WSSV)

針與存在于切片中的進(jìn)行核酸分子雜交并通過(guò)抗原抗體反應(yīng)和酶底物的化學(xué)顯色反應(yīng)

WSSVDNA,--

在組織切片上顯示出的存在位點(diǎn)原位雜交可完整保持組織與細(xì)胞形態(tài)能在復(fù)雜組織中對(duì)單

WSSV。,

一細(xì)胞進(jìn)行病毒檢測(cè)準(zhǔn)確反映組織細(xì)胞中病毒的分布

,。

4試劑和材料

41除非另有說(shuō)明在分析中僅使用確認(rèn)為分析純的試劑和蒸餾水或去離子水或相當(dāng)純度的水

.,。

42核酸探針按中的規(guī)定

.GB/T28630.1—20126.2。

43堿性磷酸酶偶聯(lián)的抗體抗生化試劑

.DIG(AP-DIG,0.75U/μL,4℃):。

44二甲苯

.。

45無(wú)水乙醇

.。

46乙醇

.95%。

47中性樹(shù)膠生物染色用

.:。

48石蠟熔點(diǎn)切片級(jí)

.