ICS6502030

B41..

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T286304—2012

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白斑綜合征WSD診斷規(guī)程

()

第4部分組織病理學(xué)診斷法

:

Diagnosticprotocolsforwhitespotdisease—

Part4Histoatholomethod

:pgy

2012-07-31發(fā)布2012-11-01實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T286304—2012

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前言

白斑綜合征診斷規(guī)程分為五個(gè)部分

GB/T28630《(WSD)》:

第部分核酸探針斑點(diǎn)雜交檢測(cè)法

———1:;

第部分套式檢測(cè)法

———2:PCR;

第部分原位雜交檢測(cè)法

———3:;

第部分組織病理學(xué)診斷法

———4:;

第部分新鮮組織的染色法

———5:T-E。

本部分為的第部分

GB/T286304。

本部分按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本部分由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出

。

本部分由全國水產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口

(SAC/TC156)。

本部分起草單位中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所農(nóng)業(yè)部全國水產(chǎn)技術(shù)推廣總站

:、。

本部分主要起草人黃倢楊冰陳愛平宋曉玲史成銀楊叢海魏琦劉莉

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T286304—2012

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白斑綜合征WSD診斷規(guī)程

()

第4部分組織病理學(xué)診斷法

:

1范圍

的本部分規(guī)定了白斑綜合征組織病理學(xué)診斷法所需試劑與材料儀器設(shè)備操作步驟

GB/T28630、、

和結(jié)果判定

。

本部分適用于對(duì)發(fā)病的對(duì)蝦或其他敏感宿主的確診和對(duì)懷疑染病宿主的診斷

。

本部分不適用于對(duì)潛伏性感染或病毒的非感染性攜帶的標(biāo)本進(jìn)行病毒檢測(cè)

。

2原理

21白斑綜合征的病原和病理學(xué)特征

.

白斑綜合征又稱白斑病白斑綜合癥對(duì)蝦暴發(fā)性流行

(whitespotsyndrome)(whitespotdisease)、、

病白斑綜合征具有發(fā)病急和死亡率高的特征其癥狀是發(fā)病對(duì)蝦停止攝食反應(yīng)遲鈍或臥于池邊或

。,,,

在水面浮游某些瀕死對(duì)蝦在甲殼上出現(xiàn)白色的斑塊有時(shí)伴隨對(duì)蝦腹節(jié)微微變紅

,,。

白斑綜合征的病原是白斑綜合征病毒或稱白斑病毒

(whitespotsyndromevirus,WSSV)(white

它是一種雙鏈病毒能對(duì)大多數(shù)養(yǎng)殖對(duì)蝦造成有致命的感染病毒

spotvirus,WSV),DNA(dsDNA),。

粒子為長橢圓形具有囊膜和獨(dú)特的尾狀物直徑長其基因組大小

,,120nm~150nm,270nm~290nm,

約病毒在細(xì)胞核內(nèi)復(fù)制不形成封閉體

300kb。,(occlusionbody)。

瀕死蝦在全身外胚層和中胚層起源的組織中呈現(xiàn)出病灶病毒主要感染的組織包括甲殼下上皮包

,(

括體表和附肢的甲殼下表皮胃上皮和后腸上皮造血組織鰓結(jié)締組織觸角腺血細(xì)胞和淋巴器官

、)、、、、、

等感染早期在核內(nèi)形成的包涵體呈嗜酸性隨著病毒的快速復(fù)制造成核內(nèi)染色質(zhì)邊移

。(inclusion),,,

細(xì)胞核肥大包涵體的嗜堿性也越來越強(qiáng)

,。

22技術(shù)原理

.

蘇木精伊紅染色在組織學(xué)和病理學(xué)中是一種常規(guī)染色方法通過染色液蘇木精伊紅

-(H-E)?！?

與組織細(xì)胞的不同組分分別相結(jié)合使細(xì)胞核細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞內(nèi)其他結(jié)構(gòu)產(chǎn)生反差明顯的藍(lán)紫色和紅

,、

色而可清晰地觀察到各種不同的組織結(jié)構(gòu)病理變化

,。

3試劑和材料

31除非另有說明在分析中僅使用確認(rèn)為分析純的試劑和蒸餾水或去離子水或相當(dāng)純度的水

.,。

32石蠟熔點(diǎn)切片級(jí)

.(52℃~54℃):。

33二甲苯

.。

34無水乙醇

.。

35乙醇

.95%。

36過濾海水鹽度為的海水在室內(nèi)放置周后經(jīng)濾紙和濾膜過濾

.