標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 40458-2021 用于病原微生物高通量檢測(cè)的核酸提取技術(shù)規(guī)范》是由中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)發(fā)布的一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，該標(biāo)準(zhǔn)主要針對(duì)病原微生物高通量檢測(cè)過(guò)程中核酸提取的技術(shù)要求進(jìn)行了詳細(xì)規(guī)定。其內(nèi)容涵蓋了核酸提取的基本原則、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境要求、人員技能與培訓(xùn)、試劑和耗材的選擇、樣本處理流程以及質(zhì)量控制等多個(gè)方面。

首先，在基本原則部分，強(qiáng)調(diào)了實(shí)驗(yàn)操作的安全性、準(zhǔn)確性及可重復(fù)性的重要性，指出了在整個(gè)核酸提取過(guò)程中需要遵循的最佳實(shí)踐指南。

其次，對(duì)于實(shí)驗(yàn)室環(huán)境，提出了明確的要求，包括但不限于空氣凈化等級(jí)、溫度濕度控制等條件，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果不受外界因素干擾。

在人員技能與培訓(xùn)章節(jié)中，則詳細(xì)描述了從事此類(lèi)工作的技術(shù)人員所需具備的專(zhuān)業(yè)知識(shí)水平及其接受定期培訓(xùn)的重要性，旨在保證所有操作均由合格人員執(zhí)行。

關(guān)于試劑和耗材的選擇，《GB/T 40458-2021》提供了指導(dǎo)方針，建議根據(jù)實(shí)際應(yīng)用場(chǎng)景選擇合適的商業(yè)產(chǎn)品或自制方案，并對(duì)關(guān)鍵參數(shù)如純度、穩(wěn)定性等進(jìn)行了限定。

樣本處理流程是整個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的核心內(nèi)容之一，它系統(tǒng)地介紹了從樣品收集到最終獲得可用于下游分析的高質(zhì)量核酸樣品的一系列步驟，包括但不限于裂解細(xì)胞、去除蛋白質(zhì)及其他雜質(zhì)、濃縮目標(biāo)分子等環(huán)節(jié)的具體操作方法和技術(shù)要點(diǎn)。

此外，為了保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的真實(shí)性和可靠性，《GB/T 40458-2021》還特別設(shè)立了質(zhì)量控制部分，通過(guò)設(shè)置內(nèi)部對(duì)照、外部驗(yàn)證等多種手段來(lái)監(jiān)測(cè)并優(yōu)化整個(gè)過(guò)程中的表現(xiàn)。

總之，這份文件為相關(guān)領(lǐng)域內(nèi)從業(yè)者提供了一份詳盡的操作手冊(cè)，有助于提升我國(guó)在病原微生物快速篩查領(lǐng)域的技術(shù)水平和服務(wù)能力。


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....

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  • 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2021-08-20 頒布
  • 2022-03-01 實(shí)施
?正版授權(quán)
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GB/T 40458-2021用于病原微生物高通量檢測(cè)的核酸提取技術(shù)規(guī)范-免費(fèi)下載試讀頁(yè)

文檔簡(jiǎn)介

ICS6602001

CCSB.16.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T40458—2021

用于病原微生物高通量檢測(cè)的

核酸提取技術(shù)規(guī)范

Specificationofnucleicacidextractionusedforhigh-throughput

detectionofpathogenicmicroorganisms

2021-08-20發(fā)布2022-03-01實(shí)施

國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局發(fā)布

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T40458—2021

前言

本文件按照標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第部分標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專(zhuān)利本文的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專(zhuān)利的責(zé)任

。。

本文件由全國(guó)植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC271)。

本文件起草單位中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院中山海關(guān)技術(shù)中心

:、。

本文件主要起草人姜帆張永江陳健岳巧云邱德義

:、、、、。

Ⅰ

GB/T40458—2021

用于病原微生物高通量檢測(cè)的

核酸提取技術(shù)規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了利用二代測(cè)序技術(shù)對(duì)病原微生物進(jìn)行高通量檢測(cè)的核酸的提取要求描述了對(duì)應(yīng)的

,

提取方法

。

本文件適用于植物及其產(chǎn)品的植物病原細(xì)菌真菌病毒和病媒生物攜帶的細(xì)菌的核酸提取方法

、、。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款其中注日期的引用文

。,

件僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于

,;,()

本文件

。

實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求

GB19489

衛(wèi)生檢疫人員的自我防護(hù)規(guī)范第部分實(shí)驗(yàn)室人員

SN/T2752.44:

國(guó)境口岸醫(yī)學(xué)媒介生物監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室管理要求

SN/T2776

國(guó)境口岸醫(yī)學(xué)媒介昆蟲(chóng)條形碼鑒定操作規(guī)程

SN/T4278—2015DNA

條形碼篩選與質(zhì)量要求

SN/T4625—2016DNA

3術(shù)語(yǔ)和定義

本文件沒(méi)有需要界定的術(shù)語(yǔ)和定義

。

4縮略語(yǔ)

下列縮略語(yǔ)適用于本文件

。

脫氧核糖核酸

DNA:(DeoxyribonucleicAcid)

光密度

OD:(OpticalDensity)

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

PCR:(PolymeraseChainReaction)

核糖核酸

RNA:(RibonucleicAcid)

5總體要求

核酸提取主要包括生物樣品的裂解和純化兩大步驟裂解是使樣品中的核酸游離在裂解體系中的

。

過(guò)程純化則是使核酸與裂解體系中的其他成分如蛋白質(zhì)多糖脂類(lèi)等其他組織或者細(xì)胞成分徹底分

,,、、

離的過(guò)程

。

核酸提取應(yīng)保證核酸一級(jí)結(jié)構(gòu)的完整性排除其他分子如蛋白質(zhì)多糖脂類(lèi)有機(jī)溶劑等的污

。,、、、

染保證下游高通量檢測(cè)試驗(yàn)順利進(jìn)行

,。

試驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)防止外界環(huán)境如灰塵氣溶膠酶等對(duì)

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