實驗一光學(xué)顯微鏡技術(shù)第一頁，共四十五頁，2022年，8月28日實驗報告六、作業(yè)一、實驗?zāi)康亩?、實驗原理三、實驗材料五、實驗結(jié)果及分析四、實驗步驟第二頁，共四十五頁，2022年，8月28日實驗一光學(xué)顯微鏡技術(shù)第三頁，共四十五頁，2022年，8月28日實驗?zāi)康牧私馄胀ü鈱W(xué)顯微鏡、暗視野顯微鏡、相差顯微鏡和微分干涉顯微鏡的構(gòu)造、工作原理和使用方法。學(xué)習(xí)測微尺的用法并測量細胞的大小。第四頁，共四十五頁，2022年，8月28日顯微鏡,目鏡測微尺(eyepiecesor

ocularmicrometer),鏡臺測微尺（stagemicrometer）,載玻片,蓋玻片等。

實驗用品第五頁，共四十五頁，2022年，8月28日夾竹桃葉片橫切片實驗材料小腸切片雞紅細胞洋蔥

采雞血（阿氏液：血2：1)(阿氏液紅細胞保存液：葡萄糖2.05g

檸檬酸鈉0.88g

氯化鈉0.42g

加蒸餾水至100ml，過濾分裝，滅菌后在0－4℃冰箱中可保存兩周。)第六頁，共四十五頁，2022年，8月28日普通光學(xué)顯微鏡光鏡主要由三部分組成：（1）光學(xué)放大系統(tǒng)：目鏡與物鏡（2）照明系統(tǒng)（3）機械和支架系統(tǒng)第七頁，共四十五頁，2022年，8月28日第八頁，共四十五頁，2022年，8月28日調(diào)節(jié)光瞳間距，使左、右兩個視場像合二為一;調(diào)節(jié)屈光度以適應(yīng)觀察者的視力，調(diào)節(jié)方法隨鏡的不同而不同.第九頁，共四十五頁，2022年，8月28日物鏡標示

第十頁，共四十五頁，2022年，8月28日將孔徑光闌縮至物鏡數(shù)值孔徑的60%～80%或合適的范圍。注意：當物鏡或標本更換時，需重新調(diào)節(jié)視場光闌和孔徑光闌。第十一頁，共四十五頁，2022年，8月28日注意事項移動顯微鏡，一手托鏡座，一手拿鏡臂!更換物鏡時，轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換盤!使用油鏡后，用鏡頭液清洗鏡頭。只有100倍物鏡為油鏡，在低倍鏡下調(diào)焦清晰后，再轉(zhuǎn)到油鏡!固定切片不要使用油鏡!第十二頁，共四十五頁，2022年，8月28日暗視野顯微鏡原理：利用暗視野聚光器使入射光束從聚光器斜向照明樣品，使之發(fā)出反射和散射光。由樣品發(fā)出的散射光和反射光形成了明亮的物體影象。背景是黑暗的。第十三頁，共四十五頁，2022年，8月28日相差顯微鏡原理：利用相差裝置將透過細胞標本不同區(qū)域（密度不同）的光的光程差變成振幅差，從而使細胞內(nèi)的各種結(jié)構(gòu)之間呈現(xiàn)出清晰可見的明暗差異的顯微鏡。第十四頁，共四十五頁，2022年，8月28日在構(gòu)造上，相差顯微鏡有不同于普通光學(xué)顯微鏡兩個特殊之處：

1.環(huán)形光闌（annulardiaphragm）位于光源與聚光器之間，作用是使透過聚光器的光線形成空心光錐，焦聚到標本上。2.相位板（annularphaseplate）在物鏡中加了涂有氟化鎂的相位板，可將直射光或衍射光的相位推遲1/4λ。分為兩種：

A+相板：將直射光推遲1/4λ，兩組光波合軸后光波相加，振幅加大，標本結(jié)構(gòu)比周圍介質(zhì)更加變亮，形成亮反差（或稱負反差）。B+相板：將衍射光推遲1/4λ，兩組光線合軸后光波相減，振幅變小，形成暗反差（或稱正反差），結(jié)構(gòu)比周圍介質(zhì)更加變暗。第十五頁，共四十五頁，2022年，8月28日第十六頁，共四十五頁，2022年，8月28日微分干涉顯微鏡DIC利用的是偏振光，有四個特殊的光學(xué)組件：偏振器（polarizer）、DIC棱鏡、DIC滑行器和檢偏器（analyzer）。偏振器直接裝在聚光系統(tǒng)的前面，使光線發(fā)生線性偏振。優(yōu)點是能顯示結(jié)構(gòu)的三維立體投影影像。第十七頁，共四十五頁，2022年，8月28日第十八頁，共四十五頁，2022年，8月28日

四種不同顯微鏡顯微鏡所拍攝的體外培養(yǎng)成纖維細胞圖像比較（A）普通明視場顯微鏡（B）相差顯微鏡（C）微分干涉顯微鏡（D）暗場顯微鏡第十九頁，共四十五頁，2022年，8月28日實驗內(nèi)容和方法細胞形態(tài)的觀察細胞大小的測量第二十頁，共四十五頁，2022年，8月28日不同形狀的動植物細胞第二十一頁，共四十五頁，2022年，8月28日一、細胞觀察動物細胞的觀察

植物細胞的觀察

小腸切片:細胞的形狀，細胞核，核仁，細胞質(zhì)

雞血紅細胞:紅細胞的特點夾竹桃葉橫切片:表皮細胞和葉肉細胞洋蔥表皮細胞:內(nèi)表皮細胞第二十二頁，共四十五頁，2022年，8月28日第二十三頁，共四十五頁，2022年，8月28日第二十四頁，共四十五頁，2022年，8月28日第二十五頁，共四十五頁，2022年，8月28日第二十六頁，共四十五頁，2022年，8月28日1、紅細胞2、中性粒細胞3、嗜酸性粒細胞4、嗜堿性粒細胞5、單核細胞6、淋巴細胞7、異嗜性粒細胞8、凝血細胞第二十七頁，共四十五頁，2022年，8月28日第二十八頁，共四十五頁，2022年，8月28日第二十九頁，共四十五頁，2022年，8月28日Onionepidermalcells第三十頁，共四十五頁，2022年，8月28日二、細胞測量如何使用測微尺?如何測量細胞的大小?如何計算細胞的大小?第三十一頁，共四十五頁，2022年，8月28日如何使用測微尺?目鏡測微尺（Eyepiecemicrometer）鏡臺測微尺（Stagemicrometer）第三十二頁，共四十五頁，2022年，8月28日目鏡測微尺鏡臺測微尺第三十三頁，共四十五頁，2022年，8月28日

鏡臺測微尺的格數(shù)目鏡測微尺每格的微米數(shù)=------------------------------10

目鏡測微尺的格數(shù)

第三十四頁，共四十五頁，2022年，8月28日如何測量細胞的大小?測量一個洋蔥表皮細胞的大小第三十五頁，共四十五頁，2022年，8月28日如何計算細胞的體積?橢球形V=4πab2/3圓球形V=4/3πr3圓柱形V=πr2h*a:長半徑;b:短半徑；r:半徑;h:高第三十六頁，共四十五頁，2022年，8月28日作業(yè)物鏡目鏡測微尺的格數(shù)鏡臺測微尺的格數(shù)目鏡測微尺每格的微米數(shù)4X10X40X計算不同倍數(shù)物鏡下，一格目鏡測微尺所代表的長度。第三十七頁，共四十五頁，2022年，8月28日暗視野、相差、微分干涉顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡相比在結(jié)構(gòu)上有何特點及用途。繪洋蔥表皮細胞的模式圖，注明物鏡的倍數(shù)；并測量五個細胞的長、寬。動物細胞和植物細胞的異同點

。12345平均長寬第三十八頁，共四十五頁，2022年，8月28日鏡油瓶的使用方法(1)(2)(3)(4)第三十九頁，共四十五頁，2022年，8月28日(5)(6)(7)鏡油瓶的使用方法第四十頁，共四十五頁，2022年，8月28日第四十一頁，共四十五頁，2022年，8月28日第四十二頁，共四十五頁，2022年，8月28日第四十三頁，共四十五頁，2022年，8月28日第四十四頁，共四十五頁，2022年，8月28日細胞生物學(xué)實驗繪圖方法與要求

二、用鉛筆繪圖，線條要明確清晰，圖的深淺明暗一律以點的疏密來表示，點要圓而一致，