《血液學(xué)及輸血學(xué)技術(shù)》觀察血液和造血器官的病理變化闡明血液系統(tǒng)疾病發(fā)病機制、協(xié)助診斷、治療觀察和預(yù)后判斷的一門科學(xué)。既屬于又屬于檢驗醫(yī)學(xué)。血液學(xué)檢驗：32學(xué)時輸血學(xué)檢驗：8學(xué)時PBL教學(xué)：2次，16周（稀有血型討論，臨床輸血新技術(shù)）理論課：48學(xué)時，11-16周，每周2次課。實驗課：48學(xué)時，11-16周，每周2次課。當(dāng)前1頁，總共70頁。當(dāng)前2頁，總共70頁。當(dāng)前3頁，總共70頁。血液學(xué)發(fā)展史microscop－RBC1673y－WBC1749y－PLT1842y19世紀(jì)60年代認識到骨髓有幼稚血細胞，成熟后進入血液。骨髓穿刺術(shù)－1929y當(dāng)前4頁，總共70頁。當(dāng)前5頁，總共70頁。造血基礎(chǔ)理論第一部分血細胞的起源當(dāng)前6頁，總共70頁。正常成人外周血象、髓象一個50Kg體重的成年人每天約生成：1400億個RBC750億個WBC1200億個PLT當(dāng)前7頁，總共70頁。當(dāng)前8頁，總共70頁。一切血細胞都來源于造血干細胞

當(dāng)前9頁，總共70頁。當(dāng)前10頁，總共70頁。什么是干細胞？干細胞(stemcells)：是一類具有多向分化潛能和自我復(fù)制功能的早期未分化細胞,在特定的條件下,它可以分化成不同的功能細胞,形成多種組織和器官。當(dāng)前11頁，總共70頁。ExamplesofStemCellsFoundinAdultSomaticTissues

當(dāng)前12頁，總共70頁。按照生存階段干細胞分為：胚胎干細胞(embryonicstemcell,ESC)成體干細胞(adultstemcell,ASC)。造血干細胞間充質(zhì)干細胞血管干細胞當(dāng)前13頁，總共70頁。造血干細胞來自胚胎干細胞

胚胎干細胞是胚胎發(fā)育早期囊胚（受精后約5－7天）的內(nèi)細胞團中未分化的細胞，它具有高度的分化潛能，可進一步分裂、分化發(fā)育成為完整個體，可以無限增殖并分化成為多種細胞類型，從而可以進一步形成機體的任何組織或器官。當(dāng)前14頁，總共70頁。當(dāng)前15頁，總共70頁。造血---hematopoiesis定義：造血是指血細胞在造血系統(tǒng)生成和發(fā)育的過程，是生命活動的重要部分。造血主要涉及造血器官、造血干/祖細胞以及造血調(diào)控等。當(dāng)前16頁，總共70頁。造血器官定義：能夠生成并支持造血細胞分化、發(fā)育和成熟的組織器官稱為造血器官，主要包括骨髓、胸腺、淋巴結(jié)、肝、脾等。當(dāng)前17頁，總共70頁。什么是骨髓？骨髓:骨骼內(nèi)海綿狀組織。當(dāng)前18頁，總共70頁。骨髓－出生后最重要的造血器官功能：骨髓是出生后唯一產(chǎn)生紅、粒、血小板的場所，也可產(chǎn)生淋巴、單核細胞。結(jié)構(gòu)：骨髓分紅髓和黃髓。紅髓的特點（1）分布（2）結(jié)構(gòu)當(dāng)前19頁，總共70頁。幼紅細胞島－Erythroblastisland當(dāng)前20頁，總共70頁。造血器官的演變P9

胚胎期造血過程：卵黃囊－肝、脾、淋巴結(jié)－骨髓當(dāng)前21頁，總共70頁。當(dāng)前22頁，總共70頁。胚胎期造血特點胎兒發(fā)育時期不同，造血器官不同。經(jīng)歷了卵黃囊造血期－肝造血期－骨髓造血期各器官造血不是截然分開，而是此消彼長，互為交替。血細胞生成順序：紅系粒系巨核系淋巴系和單核系。當(dāng)前23頁，總共70頁。胚胎期造血干細胞胎肝干細胞臍血干細胞胎髓干細胞當(dāng)前24頁，總共70頁。髓外造血P13在某些病理情況下，胎兒出生2個月后其骨髓以外的肝、脾、淋巴結(jié)等組織又恢復(fù)其制造紅、粒和血小板的造血功能。髓外造血多見于兒童，是機體對血細胞需求特別增高或?qū)撬柙煅系K的一種代償。當(dāng)前25頁，總共70頁。造血干細胞的研究

(hemotopoieticstemcell,HSC)小鼠HSC的研究人類HSC的研究HSC的定義當(dāng)前26頁，總共70頁。小鼠造血干細胞的研究1961年由Till&McCulloch建立的小鼠脾結(jié)節(jié)實驗技術(shù)等一系列小鼠體內(nèi)實驗證明了小鼠體內(nèi)存在造血干細胞。當(dāng)前27頁，總共70頁。小鼠HSC體內(nèi)實驗的研究（一）結(jié)論：小鼠骨髓中存在血液細胞的祖先，在特殊情況下，可先在脾內(nèi)形成造血結(jié)節(jié)（CFU-S），而后促進照射小鼠造血功能的恢復(fù)。當(dāng)前28頁，總共70頁。當(dāng)前29頁，總共70頁。小鼠HSC體內(nèi)實驗的研究（二）結(jié)論：轉(zhuǎn)移的脾結(jié)節(jié)生成細胞（CFC-S）具有重建照射小鼠全部造血功能的能力。當(dāng)前30頁，總共70頁。脾結(jié)節(jié)實驗中相關(guān)名稱的介紹（CFU-S:ColonyFormingUnit－Spleen）脾結(jié)節(jié)生成單位：代表每一個脾結(jié)節(jié)（CFC-S:ColonyFormingCell－Spleen）脾結(jié)節(jié)生成細胞：能夠生成脾結(jié)節(jié)的原始細胞當(dāng)前31頁，總共70頁。當(dāng)前32頁，總共70頁。拉斯克獎素有“美國的諾貝爾獎”之美譽，是美國最具聲望的生物醫(yī)學(xué)獎項。

當(dāng)前33頁，總共70頁。

2005年的拉斯克獎

BasicMedicalResearch:Foringeniousexperimentsthatfirstidentifiedastemcell-theblood-formingstemcell-whichsetthestageforallcurrentresearchonadultandembryonicstemcells.

UniversityofToronto,OntarioCancerInstitute,Ontario,Canada

當(dāng)前34頁，總共70頁。人類造血干細胞的實驗研究體外半固體培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)人造血祖細胞CFU-GM用流式細胞儀測CD34+細胞（CD34抗原：是分離純化HSC的主要標(biāo)志，見P15－16）。免疫缺陷小鼠體內(nèi)重建造血。當(dāng)前35頁，總共70頁。什么是造血干細胞？造血干細胞是具有高度自我更新和多向分化能力，并且在造血組織中含量極少，形態(tài)難以辨認，外觀似小淋巴細胞的一群異質(zhì)性的細胞群體。P15當(dāng)前36頁，總共70頁。造血干細胞含量CD34＋細胞占有核細胞比例：骨髓：0.5％－1.5％外周血：0.05％－0.15％臍血：0.1％每10000到15000個骨髓細胞中才能找到1個干細胞；在血液中則降到1/100000。當(dāng)前37頁，總共70頁。造血干細胞的性質(zhì)Self-renewal－自我更新MultilineageDifferentiation－多向分化Plasticity－可塑性Heterogeneity－異質(zhì)性G0phase－G0期當(dāng)前38頁，總共70頁。當(dāng)前39頁，總共70頁。當(dāng)前40頁，總共70頁。造血干細胞的造血功能自我更新能力保持了干細胞自身數(shù)量和質(zhì)量的相對穩(wěn)定，維持正常機體造血功能的恒定，保證血細胞的不斷更新。多向分化能力補充了外周血循環(huán)中衰老和死亡的各系血細胞數(shù)量。當(dāng)前41頁，總共70頁。HSC的可塑性什么叫可塑性？成年動物體內(nèi)的組織干細胞在一些特定環(huán)境下可分化為在發(fā)育上無關(guān)的細胞類型，甚至重建一個完整的個體的能力。當(dāng)前42頁，總共70頁。當(dāng)前43頁，總共70頁。血細胞生成增殖分化干細胞增殖：保證干細胞數(shù)量分化：形成各系血細胞干細胞當(dāng)前44頁，總共70頁。當(dāng)前45頁，總共70頁。Happenningofacuteleukemia當(dāng)前46頁，總共70頁。白血病骨髓象當(dāng)前47頁，總共70頁。指一類由造血干細胞分化而來但失去了自我更新能力的過渡性、增殖性細胞群。它介于造血干細胞與形態(tài)學(xué)可辨認的前體細胞之間的由多向分化到單向分化的過渡階段細胞。造血祖細胞(hematopoieticprogenitorcell,HPC)當(dāng)前48頁，總共70頁。CFU-ColonyFormingUnit

集落形成單位CFU-GMCFU-E當(dāng)前49頁，總共70頁。

1.多向祖細胞：CFU-HPP，LTCIC，CFU-GEMM（CFU-MIX），CFU-GM2.單向祖細胞：BFU-E，CFU-E，

CFU-G，CFU-M，CFU-Eo，CFU-Bas,

CFU-MK，CFU-Meg,CFU-TL，CFU-BL造血祖細胞的種類當(dāng)前50頁，總共70頁。粒系：CD33、13單核系：CD14淋巴系：CD19、7NK細胞系：CD56紅系：CD71巨核系：CD41、61造血祖細胞表面標(biāo)志:CD34+Lin＋當(dāng)前51頁，總共70頁。人造血干細胞和祖細胞的特性比較P17當(dāng)前52頁，總共70頁。第二部分血細胞的發(fā)育造血干細胞造血祖細胞骨髓細胞髓血屏障血細胞骨髓外周血

當(dāng)前53頁，總共70頁。造血細胞的生長發(fā)育包括：增殖分化成熟釋放當(dāng)前54頁，總共70頁。1.增殖：通過有絲分裂增加細胞數(shù)量除HSC外各階段細胞皆為對稱性地有絲分裂巨核細胞：多倍體2.分化：是發(fā)育過程中失去某些潛能同時又獲得新功能的過程。當(dāng)前55頁，總共70頁。3.成熟指由原始經(jīng)幼稚到成熟細胞的發(fā)育過程成熟規(guī)律（實驗課體會）：胞體、胞漿、胞核、核仁、核染色質(zhì)、顆粒。當(dāng)前56頁，總共70頁。4.血細胞的釋放髓血屏障：marrowbloodbarrier,MBBMBB結(jié)構(gòu)：內(nèi)皮層、基膜和外膜層。MBB功能：成熟血細胞出髓干細胞回髓（homing,歸巢）當(dāng)前57頁，總共70頁。PBSCT的動員正常情況下人外周血造血干細胞非常稀少，遠不能滿足移植的要求。應(yīng)用造血干細胞的動員劑，動員骨髓造血干細胞進入血流，增加干細胞數(shù)量。目前國內(nèi)外員常用的動員方案是化療藥物與G-CSF并用，更有效地擴張外周血干細胞池.當(dāng)前58頁，總共70頁。一、造血微環(huán)境(HIM)由骨髓基質(zhì)細胞和細胞外基質(zhì)構(gòu)成，包括骨髓微血管系統(tǒng)、末梢神經(jīng)、骨髓基質(zhì)細胞以及基質(zhì)細胞分泌的細胞因子，是造血干細胞生長、分化和自我更新的場所。HIM:hematopoieticmicroenvironment第三部分造血調(diào)控當(dāng)前59頁，總共70頁。

HIM組成1.骨髓微血管系統(tǒng)：調(diào)控血細胞的釋放。

2.基質(zhì)細胞：黏附造血干細胞并支持和調(diào)控造血細胞定居、分化、增殖、成熟的重要場所。3.細胞外基質(zhì)：糖蛋白，蛋白多糖和膠原。調(diào)節(jié)細胞黏附和增殖分化。4.基質(zhì)細胞分泌因子：因子-受體

當(dāng)前60頁，總共70頁。骨髓血竇及造血微環(huán)境模式圖當(dāng)前61頁，總共70頁。1.造血生長因子：SCF(干細胞因子)Flt-3配體（FL）集落刺激因子（CSF）EPO白介素（IL）TPO造血調(diào)控因子當(dāng)前62頁，總共70頁。造血負調(diào)控：TGF-βTNF-α,βIFN-α,β，γ趨化因子2.造血抑制因子當(dāng)前63頁，總共70頁。造血調(diào)控小結(jié)造血微環(huán)境的基質(zhì)細胞與干細胞密切接觸，保證干細胞的自我更新；造血生長因子刺激干細胞和各系祖細胞的增殖及其終末分化，滿足血液循環(huán)的需要。當(dāng)前64頁，總共70頁。1.作為細胞治療的種子細胞－造血干細胞移植2.造血干/祖細胞體外擴增與定向誘導(dǎo)分化

造血干細胞的臨床應(yīng)用當(dāng)前65頁，總共70頁。造血干細胞移植發(fā)展史1990年度諾貝爾醫(yī)學(xué)生理學(xué)獎：發(fā)明一種治療疾病的新方法即細胞和器官移植。E.DonnallThomas當(dāng)前66頁，總共70頁。

骨髓干細胞移植－BMSCT臍血移植－CBSCT經(jīng)動員的外周血干細胞移植－PBSCT

當(dāng)前67頁，總共70頁。3.作為疾病基因治療的載體1CD34＋細胞用作靶細胞，已成功治療有：ADA轉(zhuǎn)染CD34+治療SCID、FⅨ