分析方法的確證實(shí)驗(yàn)第一頁，共二十七頁，2022年，8月28日分析方法的確證試驗(yàn)

（Q2A）Ⅰ簡(jiǎn)介：Ⅱ需要確證的分析方法類型：附件A:術(shù)語第二頁，共二十七頁，2022年，8月28日簡(jiǎn)介內(nèi)容分析方法確證的參數(shù)術(shù)語和定義分析方法確證的目的證明該方法適合預(yù)期目的第三頁，共二十七頁，2022年，8月28日需要確證的分析方法類型鑒別試驗(yàn)雜質(zhì)定量試驗(yàn)雜質(zhì)限度試驗(yàn)原料或制劑中活性成分以及制劑中選定組分的定量測(cè)試第四頁，共二十七頁，2022年，8月28日典型的確證參數(shù)(Characteristics)準(zhǔn)確性(Accuracy)精密度(Precision)重復(fù)性(Repeatablity)中間精密度(IntermediatePrecision)專屬性(Specificity)檢測(cè)限度(Detectionlimit)定量限度(Quantitationlimit)線性(Linearity)范圍(Range)耐用性(Robustness)第五頁，共二十七頁，2022年，8月28日表：分析方法的類型定性鑒別雜質(zhì)檢查含量分析；溶出度(含量測(cè)定)；項(xiàng)目定量限度檢測(cè)含量／效價(jià)準(zhǔn)確度-+-+

精密度重復(fù)性-+-+

中間精密度-+①-+①

專屬性②++++

檢測(cè)限度--③+-

定量限度-+--

線性-+-+

范圍-+-+

注意：-表示通常不需確證的項(xiàng)目；

+表示通常需確證的項(xiàng)目；①假如測(cè)定了重現(xiàn)性（見術(shù)語表），中間精密度可不測(cè)定；②缺乏專屬性的分析方法，應(yīng)由其他分析方法來作補(bǔ)充；③有些情況下需要。第六頁，共二十七頁，2022年，8月28日下列情況需重新確證原料藥合成方法的改變制劑組分的改變分析方法的改變術(shù)語表

1．分析方法（Ana1ytica1procedure）分析方法指的是進(jìn)行分析的方式，應(yīng)詳細(xì)描述進(jìn)行每個(gè)分析試驗(yàn)所必需的步驟。它包括（但不局限于）：樣品、參比物、試劑的制備，儀器的使用，校準(zhǔn)曲線的繪制，計(jì)算公式的運(yùn)用等。第七頁，共二十七頁，2022年，8月28日2．專屬性（Specificity）專屬性是指在一些可能存在的組分如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、基質(zhì)等的存在下，對(duì)被分析物質(zhì)的準(zhǔn)確可靠的測(cè)定。一種分析方法缺乏專屬性時(shí)，應(yīng)由其他分析方法作補(bǔ)充。專屬性有以下含義：定性鑒別：確保被分析物質(zhì)符合其特性。純度檢查：確保采用的分析方法可檢測(cè)出雜質(zhì)，如有關(guān)物質(zhì)、重金屬、溶劑殘留量等。含量測(cè)定（含量或效價(jià)）：可提供樣品中被分析物的含量或效價(jià)的準(zhǔn)確結(jié)果。第八頁，共二十七頁，2022年，8月28日3.準(zhǔn)確性(Accuracy)準(zhǔn)確性指的是真實(shí)值或認(rèn)可的參考值與測(cè)量值之間相近程度。準(zhǔn)確性有時(shí)也稱真實(shí)度。4.精密度(Precision)

精密度指的是規(guī)定條件下對(duì)同一勻質(zhì)樣品多次取樣進(jìn)行一系列檢測(cè)結(jié)果的一致程度（離散程度）。精密度可以從三方面考慮：重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性。精密度檢查應(yīng)使用同一勻質(zhì)的、可信的樣品。如果得不到，可用人工制得的樣品或樣品溶液進(jìn)行研究。分析方法的精密度通常以測(cè)量法的變異性、標(biāo)準(zhǔn)偏差或變異系數(shù)來表達(dá)。第九頁，共二十七頁，2022年，8月28日4.1重復(fù)性(Repeatability)

重復(fù)性是指在同樣的操作條件下較短時(shí)間間隔的精密度：也稱為日內(nèi)差(Intra-assayprecision)。4.2中間精密度(IntermediatePrecision)

中間精密度指的是試驗(yàn)室內(nèi)部條件改變（如：不同天、不同分析測(cè)試者、不同儀器等）情況下的精密度。4.3重現(xiàn)性（Reproducibility）指不同試驗(yàn)室之間的精密度，常用于合作試驗(yàn)研究(collaborativestudies)中的方法學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)化研究。5．檢測(cè)限度（Detectionlimit）檢測(cè)限度指的是樣品中的被分析物質(zhì)能夠被檢測(cè)到的最低量，通常無需定量。第十頁，共二十七頁，2022年，8月28日6．定量限度（Quantitationlimit）某種分析方法的定量限度是指具有合適準(zhǔn)確性和精密度的條件下，能夠定量測(cè)定分析組分的最低限量。它是樣品中含量低的化合物定量分析的參數(shù)，特別適用于雜質(zhì)和（或）降解產(chǎn)物的測(cè)定。

7．線性（Linearity）分析方法的線性是指所得檢測(cè)結(jié)果與樣品中被分析物的濃度（含量）成比例關(guān)系的性能。8．范圍（Range）分析方法的范圍是指在樣品中被分析物的較高濃度(量)和較低濃度(量)之間的區(qū)間、已證實(shí)區(qū)間內(nèi)具有合適的準(zhǔn)確性、精密度、線性。9．耐用性（Robustness）分析方法的耐用性是指試驗(yàn)參數(shù)適當(dāng)?shù)匕l(fā)生細(xì)小改變時(shí)，測(cè)量能力保持不受影響，可用于說明正常使用時(shí)的可靠性。第十一頁，共二十七頁，2022年，8月28日分析方法的確證：方法學(xué)

（Q2B）第十二頁，共二十七頁，2022年，8月28日1：簡(jiǎn)介目的：對(duì)每一種分析方法中參數(shù)的確證提供指導(dǎo)和建議申報(bào)中建立數(shù)據(jù)的表示方式注意：整個(gè)方法學(xué)確證中，必須采用經(jīng)過完全確認(rèn)的、純度已知的參比物質(zhì)來確證。參比物質(zhì)的純度要求與使用目的應(yīng)一致第十三頁，共二十七頁，2022年，8月28日2：專屬性鑒別通過與參比物（結(jié)構(gòu)相同）比較得到正結(jié)果或負(fù)結(jié)果通過與被測(cè)物結(jié)構(gòu)相似或相關(guān)物質(zhì)比較得不到正結(jié)果含量測(cè)定和雜質(zhì)檢查色譜方法色譜圖(標(biāo)出每一成分)

分離度—專屬性的標(biāo)準(zhǔn)非專屬性方法用其他支持性的分析方法來輔助可得到雜質(zhì)用加入法得不到雜質(zhì)強(qiáng)力破壞后用不同方法比較測(cè)定峰的純度(二級(jí)管陣列、質(zhì)譜)第十四頁，共二十七頁，2022年，8月28日3：線性原料藥（標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液）至少5個(gè)混勻的制劑組方濃度系列采集信號(hào)測(cè)定統(tǒng)計(jì)（線性關(guān)系或函數(shù)關(guān)系）第十五頁，共二十七頁，2022年，8月28日4：范圍在盡可能大的濃度范圍內(nèi)均能獲得良好的線性、精密度和準(zhǔn)確性最小的規(guī)定范圍：對(duì)原料藥或制劑的含量測(cè)定80～120%對(duì)含量均勻度70～130%對(duì)溶出度規(guī)定值的±20%對(duì)雜質(zhì)檢查為報(bào)告的雜質(zhì)水平至所訂限度的120%對(duì)已知有異常功效或有毒雜質(zhì)與其“水平”相當(dāng)同法測(cè)含量和雜質(zhì)(且用100%標(biāo)準(zhǔn)品)從雜質(zhì)量到120%第十六頁，共二十七頁，2022年，8月28日5：準(zhǔn)確性含量測(cè)定原料藥用該方法去測(cè)已知純度的物質(zhì)將該法與另一成熟方法比較在精密度、線性和專屬性建立后得出制劑用該方法去測(cè)按處方量制成的混合物（加入已知量被測(cè)物）在制劑中加入已知量主藥或與另一成熟方法比較在精密度、線性和專屬性建立后得出第十七頁，共二十七頁，2022年，8月28日雜質(zhì)（定量）在樣品（原料/制劑）中加入已知量的雜質(zhì)無法得到雜質(zhì)/降解物的，與采用其他方法測(cè)得的結(jié)果比較，可以使用原料的響應(yīng)值申報(bào)數(shù)據(jù)在規(guī)定的線性范圍，對(duì)3個(gè)濃度測(cè)9個(gè)數(shù)據(jù)來評(píng)價(jià)回收率或平均值與真值的差異及它們的置信區(qū)間來評(píng)價(jià)第十八頁，共二十七頁，2022年，8月28日6：精密度含量測(cè)定和雜質(zhì)的定量測(cè)定均應(yīng)作精密度考察重復(fù)性在規(guī)定范圍內(nèi)測(cè)9次（3種濃度/每種重復(fù)3次）或在試驗(yàn)濃度100%時(shí)測(cè)6次中間精密度確定隨機(jī)事件(日期、分析者、儀器等)對(duì)精密度的影響重現(xiàn)性試驗(yàn)室之間申報(bào)數(shù)據(jù)均應(yīng)報(bào)標(biāo)準(zhǔn)差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差和置信區(qū)間第十九頁，共二十七頁，2022年，8月28日7：檢測(cè)限度根據(jù)直觀評(píng)價(jià)（用于儀器或非儀器）根據(jù)信噪比（用于有基線噪音的方法）已知低濃度被測(cè)物的信號(hào)32

空白樣品的信號(hào)11根據(jù)響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)偏差和斜率檢測(cè)限度（DL）=3.3σ/sσ：響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)偏差（通過空白樣品測(cè)背景響應(yīng)值或Y軸截距）

s：校正曲線的斜率（通過被測(cè)物的校正曲線求得）=或第二十頁，共二十七頁，2022年，8月28日申報(bào)數(shù)據(jù)檢測(cè)限度檢測(cè)限度的測(cè)定方法DL是由直觀評(píng)價(jià)或信噪比得來（報(bào)相關(guān)的色譜圖）DL是由計(jì)算或外推法得來的估計(jì)值，則應(yīng)專門對(duì)一些已知接近或就在限度上的樣品進(jìn)行分析σσACs=1σ=0.1DL=0.33

s=1/2σ=0.3DL=1.98

第二十一頁，共二十七頁，2022年，8月28日8：定量限度直觀評(píng)價(jià)在準(zhǔn)確度和精密度符合要求的前提下，能測(cè)得的最小量根據(jù)信噪比（用于有基線噪音的方法）已知低濃度被測(cè)物的信號(hào)10

空白樣品的信號(hào)1根據(jù)響應(yīng)值和斜率的標(biāo)準(zhǔn)偏差定量限度（QL）=10σ/s=第二十二頁，共二十七頁，2022年，8月28日

σ：響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差（通過一組空白樣品的分析或根據(jù)校正曲線）

s：校正曲線的斜率申報(bào)數(shù)據(jù)定量的限度定量限度的測(cè)定方法分析一些已知接近限度或限度上的樣品來證實(shí)第二十三頁，共二十七頁，2022年，8月28日9：耐用性證實(shí)在某些參數(shù)由微小的變異后，分析方法仍可靠典型例子：供試液的穩(wěn)定性萃取時(shí)間在HPLC中流動(dòng)相的pH值的變化流動(dòng)相組分的變化柱子不同（不同批號(hào)和供應(yīng)商）溫度不同流速不同第二十四頁，共二十七頁，2022年，8月28日在GC中不