關(guān)于細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響第一頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三實(shí)驗(yàn)內(nèi)容一、細(xì)菌的分布檢查1.空氣中細(xì)菌的檢查2.水中細(xì)菌的檢查3.皮膚消毒試驗(yàn)4.飛沫中細(xì)菌的檢查二、外界因素對(duì)細(xì)菌的影響1.高壓蒸汽滅菌法2.紫外線殺菌試驗(yàn)3.藥物敏感試驗(yàn)第二頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握標(biāo)準(zhǔn)紙片擴(kuò)散法（Ｋ－Ｂ）的原理、操作方法、結(jié)果的判讀及臨床意義．2.掌握皮膚消毒方法．3.熟悉人體咽喉部細(xì)菌檢查方法．4.熟悉高壓蒸汽滅菌法，紫外線滅菌方法．5.了解空氣、水中細(xì)菌的檢查方法．第三頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三一、細(xì)菌的分布檢查

了解微生物在自然界及正常人體的分布，對(duì)于在醫(yī)療實(shí)踐及某些科學(xué)實(shí)驗(yàn)中樹(shù)立無(wú)菌觀念有著重要的意義。

第四頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三材料

普通瓊脂平板血瓊脂平板

MH瓊脂平板３７℃溫箱無(wú)菌棉簽等普通瓊脂平板血瓊脂平板第五頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三空氣中細(xì)菌的檢查（示教）

左邊培養(yǎng)皿菌落是未被過(guò)濾空氣中的細(xì)菌，右邊是經(jīng)過(guò)濾空氣中留有的少量細(xì)菌第六頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三水中細(xì)菌的檢查（示教）

取水樣1ml

注入無(wú)菌空平皿內(nèi)加15mL已融化并冷卻至約45℃的培養(yǎng)基混勻倒置于３７℃溫箱培養(yǎng)18-２４h后觀察結(jié)果第七頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三

1.分區(qū)標(biāo)記

2.接種

3.培養(yǎng)皮膚細(xì)菌的檢查：空白對(duì)照消毒后消毒前常用的皮膚消毒劑第八頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三飛沫中細(xì)菌的檢查

用咳碟法將咽喉部細(xì)菌接種于血平板第九頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三二、外界因素對(duì)細(xì)菌的影響

當(dāng)外界環(huán)境條件發(fā)生巨大改變，可導(dǎo)致微生物的主要代謝活動(dòng)發(fā)生障礙，生長(zhǎng)停頓，甚至死亡。第十頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三消毒與滅菌

原理：微生物由蛋白質(zhì)、核酸、脂類等構(gòu)成，極易受外界條件的影響，對(duì)多種物理、化學(xué)因素都敏感。消毒與滅菌就是根據(jù)這一原理抑制或殺死外環(huán)境中的病原微生物。第十一頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三1.高壓蒸汽滅菌法（示教）

原理：利用密閉的金屬鍋，密閉加熱使鍋內(nèi)蒸汽壓力增大，溫度隨之升高，殺菌力增強(qiáng)。第十二頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三手提式高壓蒸汽滅菌器第十三頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三高壓蒸汽滅菌器構(gòu)造：為一雙層的金屬圓筒，兩層之間盛水，外層堅(jiān)厚，上方有金屬厚蓋。螺旋能緊閉蓋門，使蒸汽不能外溢，因而蒸汽壓力升高，其溫度亦相應(yīng)的增高。第十四頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三1.加水至外筒內(nèi)，被滅菌物品放入內(nèi)筒。2.蓋上滅菌器蓋，擰緊螺旋使之密閉。3.加熱，同時(shí)打開(kāi)排氣閥門，排凈其中冷空氣，關(guān)閉排氣閥。繼續(xù)加熱，待壓力表漸漸升至所需壓力時(shí)(103.4kPa,121.3℃)，保持壓力和溫度維持15～30min。4.待壓力自行降至零時(shí)，慢慢打開(kāi)排氣閥，排除余氣，開(kāi)蓋取物。使用方法第十五頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三注意事項(xiàng)：1）冷空氣徹底排除；2）壓力降為“0”時(shí)方可打開(kāi)。在使用高壓蒸氣滅菌鍋滅菌時(shí)，滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排除是否完全極為重要，因?yàn)榭諝獾呐蛎泬捍笥谒魵獾呐蛎泬?，所以，?dāng)水蒸氣中含有空氣時(shí)，在同一壓力下，含空氣蒸氣的溫度低于飽和蒸氣的溫度。滅菌鍋內(nèi)留有不同分量空氣時(shí)，壓力與溫度的關(guān)系見(jiàn)表第十六頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三用途

凡耐高溫和潮濕的物品，如培養(yǎng)基、生理鹽水、衣服、紗布、棉花、敷料、玻璃器材、傳染性污物等都可應(yīng)用本法滅菌。第十七頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三2.紫外線殺菌試驗(yàn)

原理：通過(guò)紫外線的照射，破壞及改變微生物的DNA結(jié)構(gòu)，使細(xì)菌當(dāng)即死亡或不能繁殖后代，達(dá)到殺菌的目的。第十八頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三波長(zhǎng)200～300nm的紫外線具有殺菌作用，其中以265～266nm最強(qiáng)，這與DNA的吸收光譜范圍一致。紫外線主要作用于DNA，使一條DNA鏈上相鄰的二個(gè)胸腺嘧啶共價(jià)結(jié)合而形成雙聚體，因而改變DNA的分子構(gòu)型，干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致細(xì)菌的死亡或變異。紫外線釋放的能量較低，故穿透力較弱，普通玻璃、紙張、塵埃、水蒸氣等均能阻擋紫外線，故只能用于手術(shù)室、傳染病房、細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室的空氣消毒，或用于不耐熱物品的表面消毒。殺菌波長(zhǎng)的紫外線對(duì)人體皮膚、眼睛有損傷作用，使用時(shí)應(yīng)注意防護(hù)。紫外線殺菌試驗(yàn)第十九頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三

優(yōu)點(diǎn)

簡(jiǎn)單便捷、廣譜高效、無(wú)二次污染、便于治理和實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)。

缺點(diǎn)穿透能力弱特點(diǎn)第二十頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三材料普通瓊脂平板18-24h細(xì)菌培養(yǎng)物紫外線燈等第二十一頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三方法

細(xì)菌接種于普通平板

皿蓋蓋住半邊做對(duì)照，置紫外燈下約30cm處，照射30分鐘。

培養(yǎng)第二十二頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三藥物敏感試驗(yàn)

進(jìn)行藥敏試驗(yàn)的方法主要有紙片擴(kuò)散法、稀釋法、抗生素濃度法、自動(dòng)化儀器等。第二十三頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三標(biāo)準(zhǔn)紙片擴(kuò)散法（Ｋ－Ｂ）原理：將含抗生素的濾紙片貼在已接種了測(cè)試菌的瓊脂上，藥物在瓊脂中擴(kuò)散，在藥物濃度到達(dá)的范圍內(nèi)對(duì)此藥敏感的細(xì)菌不能生長(zhǎng)而形成透明的抑菌圈。不同細(xì)菌形成的抑菌圈各不相同，抑菌圈的大小反映了測(cè)試菌對(duì)該藥的敏感程度，并與該藥物對(duì)測(cè)試菌的最低抑菌濃度（MIC）呈負(fù)相關(guān)。第二十四頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三材料菌種：葡萄球菌、大腸桿菌菌液培養(yǎng)基：水解酪蛋白瓊脂（MH瓊脂）試劑：各種抗菌藥物紙片（PEN、GEN、STR、CHL)第二十五頁(yè)，共二十八頁(yè)，編輯于2023年，星期三方法

棉試蘸取試驗(yàn)菌涂抹在MH培養(yǎng)基表面，均勻涂抹3次

以無(wú)菌鑷子取各抗生素紙片貼于表面

培養(yǎng)各紙片中心距>24mm,紙片距平板邊緣應(yīng)>15mmPENGENSTRCHL第二十六頁(yè)，共二十