實(shí)驗(yàn)?zāi)康膹?fù)習(xí)光學(xué)顯微鏡的使用方法；了解人體血液以及輸血相關(guān)常識(shí)；掌握ABO血型組成以及分型原則；初步掌握血涂片制片的方法，觀察血細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)原理抗原和抗體反應(yīng)：抗原與相應(yīng)抗體之間發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。體內(nèi)反應(yīng)：吞噬作用、中和毒素等。體外反應(yīng)：凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等。臨床上根據(jù)凝集現(xiàn)象是否出現(xiàn)，可用于鑒定ABO血型。實(shí)驗(yàn)原理凝集反應(yīng)紅細(xì)胞作為顆粒性抗原，與相應(yīng)的抗體血清混合后，在電解質(zhì)參與下，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間，抗原與抗體凝聚成肉眼可見的凝集塊，這種現(xiàn)象稱為凝集反應(yīng)。凝集反應(yīng)中的抗體稱為凝集素，抗原稱為凝集原。實(shí)驗(yàn)原理血型是血液各成分以抗原為表現(xiàn)形式的遺傳性狀。ABO血型包括A、B、O、AB四種表現(xiàn)型，根據(jù)紅細(xì)胞膜外表面存在的抗原不同而命名。實(shí)驗(yàn)原理ABO血型的鑒定用已知抗體的標(biāo)準(zhǔn)血清鑒定紅細(xì)胞上的未知抗原。A型標(biāo)準(zhǔn)血清（含抗B凝集素，可使B型、AB型紅細(xì)胞的凝集原凝集）B型標(biāo)準(zhǔn)血清（含抗A凝集素，可使A型、AB型紅細(xì)胞的凝集原凝集）實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理血型 凝集原 凝集素A型 A 抗BB型 B 抗AAB型 A＋B 無(wú)O型 無(wú) 抗A＋抗B實(shí)驗(yàn)原理含某種凝集原的紅細(xì)胞+含相應(yīng)凝集素的血清紅細(xì)胞凝集反應(yīng)抗A抗B血型鑒定原理A型血：抗A血清凝集、抗B血清不凝集B型血：抗A血清不凝集、抗B血清凝集O型血：抗A血清、抗B血清均不凝集AB型血：抗A血清、抗B血清均凝集血型鑒定原理觀察有無(wú)凝集，并按下表判定結(jié)果血型抗A試劑抗B試劑ABOAB+--+-+-+呈現(xiàn)均勻的淡紅色時(shí)，表明不凝集，用“-”號(hào)表示。在試劑里凝結(jié)成絮團(tuán)狀，形成鮮明的對(duì)比，表明凝集，用“+”號(hào)表示。血型鑒定原理抗A型血清抗B型血清B型抗A型血清抗B型血清A型抗A型血清抗B型血清O型抗A型血清抗B型血清AB型示意圖血液的組成血漿水、糖類、脂類、蛋白質(zhì)和鉀鹽、鈉鹽、鈣鹽的混合物。紅細(xì)胞白細(xì)胞血小板血漿55%紅細(xì)胞45%白細(xì)胞0.1%血小板0.17%血細(xì)胞的組成小淋巴細(xì)胞嗜曙紅細(xì)胞單核細(xì)胞血小板嗜中性粒細(xì)胞嗜堿性細(xì)胞巨淋巴細(xì)胞紅細(xì)胞血細(xì)胞的組成

紅細(xì)胞形態(tài)：雙凹或單凹圓盤型數(shù)量：450～550萬(wàn)個(gè)/mm3(男)380～450萬(wàn)個(gè)/mm3(女)功能：1.運(yùn)輸氧和二氧化碳2.緩沖酸堿物質(zhì)成分：血紅蛋白血細(xì)胞的組成

白細(xì)胞數(shù)量：4,000～10,000/mm3功能：保護(hù)機(jī)體抵抗外來(lái)有害物的侵害。血細(xì)胞的組成淋巴細(xì)胞細(xì)胞：胞體圓形或近圓形核：圓形、偏于一側(cè)血細(xì)胞的組成單核細(xì)胞細(xì)胞：圓形或橢形，體積最大核：不分葉，心型、腎型、馬蹄型血細(xì)胞的組成核：2-4葉中性粒細(xì)胞血細(xì)胞的組成1－嗜酸性細(xì)胞2－嗜堿性細(xì)胞嗜酸性細(xì)胞核：兩葉胞漿：桔紅色嗜酸性顆粒嗜堿性細(xì)胞胞漿：充滿大小、排列不均顆粒核：不明顯實(shí)驗(yàn)用品器材：醫(yī)用一次性采血針、酒精棉球、鑷子、經(jīng)脫脂洗凈的載玻片、顯微鏡、消毒牙簽。試劑：抗A型和抗B型標(biāo)準(zhǔn)血清、生理鹽水、75%酒精、瑞氏染液、PBS緩沖液。實(shí)驗(yàn)步驟

注意：有嚴(yán)重暈血史的同學(xué)請(qǐng)不要參加實(shí)驗(yàn)！準(zhǔn)備（1）取三張載玻片，用吸水紙將兩面擦干，放于白紙上；（2）取一張玻片，如圖在兩端分別滴上抗A、抗B血清，在白紙上標(biāo)明；（3）取未用過(guò)的采血針，檢查包裝是否破損、是否干燥，檢查牙簽；AB第一張：血型鑒定第二張：血涂片第三張：血涂片推片采血（4）用酒精棉球?qū)⒆笫譄o(wú)名指消毒，以穿刺法，用一次性醫(yī)用采血針無(wú)名指指腹迅速扎一下，取血；注意：采血針、牙簽、棉花等請(qǐng)勿混用，以免造成交叉感染，用完即棄入垃圾桶中！酒精棉球消毒扎取無(wú)名指采血血型鑒定（5）用右手自無(wú)名指指腹下端擠壓，流出適量血液；（6）用第一根牙簽蘸取少許血液混于抗A血清，攪拌混勻，將牙簽放入垃圾桶；再用另一根牙簽蘸取血液混于抗B血清（切記換牙簽?。?；（7）將此玻片靜置與空閑處，觀察血液是否凝集；血型鑒定請(qǐng)問(wèn)：上圖是什么血型？？血涂片制作（8）取末捎血一滴置于玻片的一端，左手持，載片上保留下一薄層血膜載玻片，右手以邊緣平滑的推片的一端從血滴前方后移接觸血滴，待血滴即沿推片散開。然后使推片與載片夾角保持30-45度平穩(wěn)地向前移動(dòng)；血涂片制作①②③④推片動(dòng)作血涂片制作(9)血涂片制成后可手持玻片在空氣中揮動(dòng)，使血膜迅速干燥，以免血細(xì)胞皺縮；(10)將干燥后的血膜平放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，加瑞氏染液2-3滴,使覆蓋整個(gè)血膜，固定5-10min，注意不要讓染液干掉，如若有干燥請(qǐng)覆以少量清水；血涂片制作(11)用流水小心沖去染液，待自然干燥后或用吸水紙吸干，即可置血涂片于顯微鏡下進(jìn)行鏡檢、照相；(12)鏡檢完畢請(qǐng)將載玻片放入垃圾桶，將顯微鏡收好、桌面擦拭干凈。請(qǐng)從低倍鏡到高倍鏡進(jìn)行鏡檢，并用手機(jī)或相機(jī)拍照，將照片貼在實(shí)驗(yàn)報(bào)告上。血涂片注意事項(xiàng)一張良好的血片，要求厚薄適宜，頭體尾分明，分布均勻，邊緣整齊，兩側(cè)留有空隙；血片制好后，最好立即固定染色，以免細(xì)胞變化影響觀察；血膜未干透，細(xì)胞尚未牢固附在玻片上，在染色過(guò)程中容易脫落，因此血膜必需充分干燥；注意事項(xiàng)染液不可過(guò)少，以防蒸發(fā)干燥，染料沉著于血片上難沖洗干凈；沖洗時(shí)應(yīng)用流水將染液沖去，不能先倒掉染液，以免染料沉著于血片上；染色時(shí)應(yīng)注意保護(hù)血膜尾部細(xì)胞，不能劃掉，因?yàn)轶w積較大細(xì)胞常在此處出現(xiàn)。實(shí)驗(yàn)報(bào)告繪制各種不同類型的血細(xì)胞，并說(shuō)明它們的主要作用。完成血型檢測(cè)