第9章抗生素

Antibiotics第一節(jié)概述一.定義和發(fā)展

1、微生物藥物的定義（MicrobialMedicines）：微生物在其生命活動(dòng)過程中產(chǎn)生的生理活性物質(zhì)及其衍生物，包括抗生素，酶抑制劑，免疫調(diào)節(jié)劑等一類化學(xué)物質(zhì)的總稱，是人類控制感染等疾病，保障身體健康，以及用來防治動(dòng)、植物病害的重要化療藥物?？股仡愃幬锞S生素類藥物氨基酸類藥物核酸類藥物酶與輔酶類藥物酶抑制劑免疫調(diào)節(jié)劑甾體類激素

2.微生物藥物的分類維生素B2維生素Cβ-胡蘿卜素2）維生素β-胡蘿卜素1）抗生素3）氨基酸目前大部分氨基酸可用發(fā)酵法生產(chǎn)4）核酸類藥物如肌苷酸，腺苷酸，肌苷，腺苷等5）酶與輔酶類藥物

鏈激酶、L-天冬酰胺酶6）酶抑制劑7）免疫調(diào)節(jié)劑免疫抑制劑環(huán)抱菌素A-器官移植

8）甾體類激素克拉維酸、洛伐他汀其他還有受體拮抗劑、抗氧化劑、抗生素增效劑洛伐他汀結(jié)構(gòu)圖3、抗生素的定義：是生物（包括微生物、植物、動(dòng)物）在其生命活動(dòng)中產(chǎn)生的（或在生物產(chǎn)物的基礎(chǔ)上經(jīng)化學(xué)、生物或生物化學(xué)方法衍生的）、在低微濃度下能選擇性地抑制他種生物機(jī)能的相對(duì)低分子質(zhì)量（Mr）化學(xué)物質(zhì)。如青、鏈、紅霉素和四環(huán)素等。特點(diǎn)：1、生物體產(chǎn)生，多數(shù)是由微生物發(fā)酵生產(chǎn)。2、生理活性高，低濃度即可起作用。3、相對(duì)分子質(zhì)量低。4、對(duì)生物的抑制或殺滅作用有選擇性。溶菌酶不屬于抗生素；只能用化學(xué)方法合成，不能由微生物產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)不屬于抗生素。半合成抗生素：將生物合成法制得的天然代謝產(chǎn)物經(jīng)過化學(xué)、生物或生物化學(xué)方法進(jìn)行分子結(jié)構(gòu)改造，制成的各種衍生物稱為半合成抗生素。如ampicillin/cefotaxime(頭孢噻肟）全合成抗生素：根據(jù)天然抗生素的結(jié)構(gòu)，完全采用化學(xué)合成方法制造的化合物?？咕V：某種抗生素所能抑制或殺滅病原微生物的范圍，稱為該微生物的抗菌譜。窄譜抗生素：只對(duì)革蘭氏陰性菌或革蘭氏陽性菌有抗菌活性的抗生素。廣譜抗生素：對(duì)革蘭氏陰性和革蘭氏陽性菌都有活性，或?qū)?xì)菌及其他多種微生物都有抑制活性的抗生素。表征抗生素活性的參數(shù)：最低抑菌濃度MIC最低殺菌濃度MBC抗生素的作用擴(kuò)展：博來霉素治療鱗狀上皮癌；巴龍霉素治療原蟲引起的痢疾；多西環(huán)素鎮(zhèn)咳；新霉素降低膽固醇等。4、抗生素的發(fā)展抗生素(antibiotics）:1942年，Waksman首先定義：抗生素是微生物在其代謝過程中所產(chǎn)生的、具有抑制它種微生物生長(zhǎng)及活動(dòng)甚至殺滅它種微生物性能的化學(xué)物質(zhì)。1947年1948年1950年1952年1953年1950至80，我國(guó)譯為抗菌素1980年后，抗腫瘤、抗寄生蟲等抗生素的不斷發(fā)現(xiàn)，超出對(duì)微生物作用范圍，又改譯為抗生素。微生物來源的其他活性物質(zhì)酶抑制劑:亮肽素bestatin

免疫抑制劑：環(huán)孢菌素Aβ羥基-甲基戊二酰輔酶A還原酶抑制劑二、抗生素類藥物的分類生物來源化學(xué)結(jié)構(gòu)作用對(duì)象作用機(jī)制根據(jù)抗生素的生物來源分類：

（1）放線菌產(chǎn)生：鏈霉素（2）真菌產(chǎn)生：青霉素（3）細(xì)菌產(chǎn)生：放線菌素（4）植物及動(dòng)物產(chǎn)生：蒜素、黃連素根據(jù)抗生素的化學(xué)結(jié)構(gòu)分類：（1）β-內(nèi)酰胺類抗生素

青霉素、頭孢菌素、硫霉素、亞胺培南（2）氨基糖苷類抗生素

鏈霉素、新霉素、卡那霉素、慶大霉素（3）大環(huán)內(nèi)酯類抗生素

紅霉素、螺旋霉素、麥迪霉素（4）四環(huán)類抗生素

四環(huán)素、金霉素、土霉素（5）多肽類抗生素

多粘菌素、放線菌素、桿菌肽（6）多烯類抗生素

兩性霉素、曲古霉素、制霉菌素（7）蒽環(huán)類抗生素

柔紅霉素、阿霉素、正定霉素（8）苯羥基胺類抗生素

氯霉素、甲砜氯霉素（9）環(huán)橋類抗生素利福霉素（10）其他抗生素

磷霉素、創(chuàng)新霉素根據(jù)抗生素的作用對(duì)象分類：①抗革蘭氏陽性細(xì)菌：青霉素、紅霉素②抗革蘭氏陰性細(xì)菌：主要有多粘菌素③抗真菌：制霉菌素、灰黃霉素、兩性霉素④抗結(jié)核分枝桿菌：鏈霉素、新霉素、卡那霉素⑤抗癌:放線菌素D、博來霉素、阿霉素⑥抗病毒：四環(huán)類抗生素、艾霉素(ehrlichin)⑦抗原蟲的抗生素巴龍霉素、抗滴蟲霉素、蒜素根據(jù)抗生素的作用機(jī)制分類①抑制細(xì)菌壁合成：青霉素②影響細(xì)胞膜功能：多烯類抗生素③抑制核酸合成：如影響DNA結(jié)構(gòu)的博來霉素、絲裂霉素C及柔毛霉素等；④抑制蛋白質(zhì)合成：四環(huán)素、氯霉素、鏈霉素⑤抑制生物能作用：如抑制電子轉(zhuǎn)移的抗霉素(antimycin)、抑制氧化磷酸化作用的短桿菌肽S(gramicidinS)和寡霉素(o1igomycin)等。根據(jù)抗生素的作用機(jī)制分類三、抗生素的應(yīng)用1、在醫(yī)療上的應(yīng)用：1）抗細(xì)菌感染2）抗真菌感染：灰黃霉素-皮膚真菌；制霉菌素-念珠菌、隱球菌等深部真菌。3）抗病毒：主要是核苷酸類4）抗腫瘤：絲裂霉素、博來霉素、柔紅霉素、阿霉素。5）抗原蟲2、在農(nóng)業(yè)方面：我國(guó)能生產(chǎn)的農(nóng)業(yè)抗生素：井岡霉素；春雷霉素；殺稻瘟霉素；多氧霉素；殺粉蝶素；沙利霉素；慶豐霉素和赤霉素。應(yīng)用于抗真菌、抗細(xì)菌、殺蟲除草和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)。3、在畜牧業(yè)絕大多數(shù)醫(yī)用抗生素都可用于動(dòng)物疾病防治，但目前倡導(dǎo)醫(yī)用和動(dòng)物用藥分開。低劑量促幼畜生長(zhǎng)。4、在食品保鮮：過去食品保鮮5、工業(yè)應(yīng)用：谷氨酸發(fā)酵液中加入青霉素工業(yè)制品防霉變。6、科學(xué)研究：微生物特定生長(zhǎng)階段的控制藥物篩選和評(píng)價(jià)模型建立控制細(xì)胞、組織培養(yǎng)過程污染四、微生物藥物研發(fā)進(jìn)展1.尋找新的微生物資源稀有放線菌極端微生物海洋微生物2.新的篩選模型及手段新藥物作用靶標(biāo)微生物產(chǎn)物庫高通量篩選虛擬篩選3.組合生物合成技術(shù)的應(yīng)用酮基合成酶(KS)、?；D(zhuǎn)移酶（AT）、脫氫酶（DH）、烯醇還原酶（ER）、酮基還原酶（KR）和?；d體蛋白（ACP）等功能域4、代謝調(diào)控與基因敲除5.基因改組（DNASuffling）五抗生素制造工藝β-內(nèi)酰胺類抗生素氨基糖苷類抗生素大環(huán)內(nèi)酯類抗生素一般制備過程培養(yǎng)發(fā)酵：發(fā)酵液預(yù)處理固液分離胞內(nèi)產(chǎn)物細(xì)胞破碎固液分離胞外產(chǎn)物

初步純化

精制初步純化方法：沉淀、吸附、萃取、超濾精制方法：層析、電泳、結(jié)晶選擇方法依據(jù)1、產(chǎn)品性質(zhì)：化學(xué)組成、分子量、穩(wěn)定性、溶解度、解離特性等2、主要雜質(zhì)屬性3、方法前后銜接要求4、產(chǎn)品質(zhì)量要求第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素

（一）結(jié)構(gòu)與性質(zhì)a青霉烷*b青霉烯c頭孢烷d頭孢烯*e單環(huán)β-內(nèi)酰胺

f碳青霉烷*g碳青霉烯*h碳頭孢烷I碳頭孢烯j氧青霉烷*k氧青霉烯l氧頭孢烷m氧頭孢烯*天然產(chǎn)物九十年代各國(guó)首次應(yīng)用的抗細(xì)菌抗生素共24種，其中有頭孢菌素14種，碳青霉烯2種，青霉烯1種，β-內(nèi)酰胺酶抑制劑與其制劑1種，氨基糖苷、大環(huán)內(nèi)酯與安莎類抗生索各2種。新上市的合成抗菌藥共10種，包括喹諾酮類化合物9種和二氫葉酸還原酶抑制劑1種。CNHCHCHCOOCNCHCH3CH3COOHSSiteofpenicillinaseaction.Breakageoftheβ-

lactamring.STRUCTUREOFPENICILLIN共性：

羧基有弱酸性：影響溶解度

β-內(nèi)酰胺環(huán)不穩(wěn)定（二）、青霉素的制備（A）、理化性質(zhì)：1、溶解性：受pH影響游離酸：易溶于有機(jī)溶劑，難溶于水鹽：易溶于水，幾乎不溶于有機(jī)溶劑，當(dāng)有機(jī)溶劑中含少量水時(shí)，溶解度增大。2、酸堿性：有機(jī)弱酸3、穩(wěn)定性：干燥純凈的鹽固體穩(wěn)定；純有機(jī)溶劑溶液穩(wěn)定；遇酸堿易分解；в-內(nèi)酰胺環(huán)易為親核或親電試劑作用而打開失活；青霉素的水溶液不穩(wěn)定。

溫度、pH對(duì)其穩(wěn)定性的影響---------------------------------------------4降解反應(yīng)5、聚合反應(yīng)氨芐青霉素在水溶液中易形成聚合物，是氨芐青霉素過敏反應(yīng)的主要過敏原之一。6、過敏反應(yīng)

可能為青霉噻唑多肽和青霉噻唑蛋白（B）、制備工藝1、菌種最早的原始菌種是點(diǎn)青霉菌(Penicillium

notatum)；現(xiàn)用產(chǎn)黃青霉菌(Pen.chrysogenum)按菌絲的形態(tài)分為絲狀菌（黃孢子和綠孢子）和球狀菌（綠孢子和白孢子）兩種。國(guó)內(nèi)青霉素生產(chǎn)廠大都采用綠色絲狀菌，有的廠家用白孢子球狀菌。2、發(fā)酵工藝流程1）絲狀菌發(fā)酵工藝流程大米茄子瓶2）球狀菌培養(yǎng)工藝流程球狀菌菌種親米孢子生產(chǎn)米孢子種子液發(fā)酵液

（親米孢子培養(yǎng)）親米錐形瓶25度，6-8d冷凍管（生產(chǎn)米孢子培養(yǎng)）大米茄子瓶25度，8-10d種子罐培養(yǎng)種子罐28度，50-60h，1.5v/(v*min)發(fā)酵罐培養(yǎng)發(fā)酵罐26度，PH6.7-7.0，6-7d，0.8-1.0v/(v*min)3、發(fā)酵工藝要點(diǎn)1）絲狀菌：種子：砂土孢子接入斜面上，25℃培養(yǎng)6～7天，制成懸液，接入大米茄子瓶?jī)?nèi)，經(jīng)25℃培養(yǎng)6～7天，制成大米孢子，真空干燥。生產(chǎn)時(shí)按接種量移入種子罐（葡萄糖、玉米漿、尿素），25℃培養(yǎng)40～45小時(shí)，菌絲濃度達(dá)40%以上，按10%-15%接種量移入繁殖罐（花生餅粉、葡萄糖）內(nèi)。經(jīng)25℃培養(yǎng)13～15小時(shí)，菌絲體積40%以上，殘?zhí)窃?.0%左右，無菌檢查合格便可作為種子，按30%接種量移入發(fā)酵罐。

2）球狀菌：首先由冷凍管孢子接入混合有0.5-1.0%玉米漿的搖瓶培養(yǎng)原始親米孢子，再接入大米茄子瓶生產(chǎn)大米孢子，兩者都是在25度下靜置培養(yǎng)10天可收獲。保存在5度冰箱。種子培養(yǎng)：冷藏10天以內(nèi)的生產(chǎn)米，接入種子罐（花生餅粉、玉米胚芽粉、葡萄糖、飴糖）28度培養(yǎng)50-60h，當(dāng)PH降為5.5-5.0，菌絲呈菊花團(tuán)狀，平均直徑在100-130微米，每毫升球菌數(shù)6萬-8萬只，沉降率在85%以上，可用。接入發(fā)酵罐。培養(yǎng)基碳源：提供能量如乳糖、蔗糖、葡萄糖、淀粉、天然油脂等。乳糖能被產(chǎn)生菌緩慢利用而維持青霉素分泌的有利條件，故為最佳碳源，但價(jià)格高，普遍使用有困難。天然油脂如玉米油、豆油也能被緩慢利用作為有效的碳源，但不可能大規(guī)模使用。目前生產(chǎn)上用的碳源是葡萄糖母液和工業(yè)用葡萄糖。絲狀菌補(bǔ)糖一般在殘?zhí)墙抵?.6%左右、PH上升后開始加，0.07-0.15%/次，次/h;球狀菌在PH高于6.5時(shí)開始加糖。氮源：提供蛋白合成原料

玉米漿?，F(xiàn)因國(guó)內(nèi)玉米漿產(chǎn)量少，經(jīng)調(diào)整配方以花生餅粉代替，生產(chǎn)水平也可達(dá)到技術(shù)指標(biāo)。目前生產(chǎn)上用的氮源是花生餅粉、麩質(zhì)粉玉米胚芽粉及尿素等。

前體作為芐青霉素生物合成的前體有苯乙酸、苯乙酰胺等。它們一部分能直接結(jié)合到青霉素分子中。這些前體對(duì)青霉菌都有一定的毒性，加入量不能大于0.1%。加入硫代硫酸鈉能減少它們的毒性。無機(jī)鹽①硫和磷:硫濃度降低時(shí)青霉素產(chǎn)量減少3倍，磷濃度降低時(shí)青霉素產(chǎn)量減少1倍。②鈣、鎂和鉀：青霉素的生物合成中合適的陽離子比例以鉀30%、鈣20%、鎂41%為宜。如鎂離子少，鉀離子多時(shí)，菌絲細(xì)胞將培養(yǎng)基中氮源轉(zhuǎn)化成各種氨基酸的能力強(qiáng)。鈣離子影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和培養(yǎng)基的pH。③鐵離子：鐵易滲入菌絲內(nèi)，它對(duì)青霉素發(fā)酵有毒害作用。發(fā)酵液中鐵含量6微克/毫升時(shí)無影響；60微克/毫升時(shí)降低產(chǎn)量30%；300微克/毫升時(shí)降低產(chǎn)量90%。要低于30微克/ml

培養(yǎng)條件控制

產(chǎn)黃青霉菌分三個(gè)不同代謝時(shí)期。①菌絲生長(zhǎng)繁殖期:發(fā)芽、菌絲增殖、形成脂粒、積累藏物。

②青霉素分泌期:菌絲生長(zhǎng)趨勢(shì)減弱，間隙添加葡萄糖作碳源和間隙加入花生餅粉、尿素作氮源，并間隙加入前體，此期間球狀菌pH要求6.6～6.9，絲狀菌pH要求6.2～6.4，青霉素分泌旺盛。③菌絲自溶期:控制要點(diǎn)：

1）加糖控制：一般殘?zhí)墙抵?.6%左右、pH上升后可開始加糖。

2）補(bǔ)料及添加前體：絲狀菌發(fā)酵于接種后8～12小時(shí)，發(fā)酵液中殘余苯乙酰胺濃度為0.05～0.08%。球狀菌在發(fā)酵10h后加入尿素、氨水和苯乙酸的混合料，每3h加入一次，加入量視生長(zhǎng)狀況。

3）pH控制：主要通過加葡萄糖控制pH，在PH大于6.5時(shí)可以加入硫酸銨4）溫度控制：青霉菌生長(zhǎng)最適溫度（27度）高于青霉素分泌的最適溫度（20度）。種子罐培養(yǎng)絲狀和球狀菌菌要求25℃，發(fā)酵罐培養(yǎng)絲狀菌要求26℃-24℃-23℃-22℃、球狀菌要求26℃--25℃-24℃，前期罐溫高于后期。5）通氣與攪拌深層培養(yǎng)需通入一定量空氣，并不停地?cái)嚢枰员ＷC溶氧的濃度。試驗(yàn)證明，通氣量0.8-1.0v/v*min.中、后期減慢轉(zhuǎn)速對(duì)球狀菌的生理生化代謝有利，它能提高發(fā)酵單位，并能節(jié)約能源。6）泡沫與消沫用化學(xué)合成消沫劑——“泡敵”等4、提煉工藝流程工業(yè)鉀鹽生產(chǎn)工藝流程p5811.工業(yè)鉀鹽生產(chǎn)工藝流程發(fā)酵液一次濾液和其余發(fā)酵液二次濾液一次丁酯萃取液緩沖液萃取液二次丁酯萃取液脫色脫水液結(jié)晶液青霉素鉀濕結(jié)晶體洗滌后濕晶體過篩顆粒干燥粉末青霉素鉀成品（鼓式真空過濾）

1/3-1/2發(fā)酵液10度以下（板框過濾）10%硫酸，0.07%PPB,0.7%硅藻土，28%水PH4.5-5.0，10度以下（一次丁酯萃?。?0%硫酸，1/3體積醋酸丁酯，0.1%PPBPH1.8-2.2，10度以下（緩沖液萃取）1.6%碳酸氫鈉PH6.8-7.4，10度以下二次丁酯萃取，硫酸，丁酯PH1.8-2.2，10度以下脫色脫水過濾活性炭-10度以下無菌過濾結(jié)晶，過濾醋酸鉀乙醇溶液10--20度洗滌丁醇，醋酸乙酯過篩，制粒真空干燥90-95度，20mmHg,8-10h涼粉40度左右2.青霉素鈉鹽制備（共沸蒸餾結(jié)晶）發(fā)酵液二次丁酯萃取液脫色二次丁酯萃取液青霉素鈉鹽水萃取液結(jié)晶液青霉素鈉鹽濕結(jié)晶洗后濕結(jié)晶干燥粉末青霉素鈉鹽成品過濾，一次丁酯萃取，緩沖液萃取，二次丁酯萃取與制青霉素鉀鹽相同脫色過濾活性炭水萃取，0.5molNaOH溶液，10度以下共沸蒸餾2.5倍體積丁醇PH6.4-6.8，16-26度，5-10mmHg過濾洗滌分離丁醇，乙酸乙酯真空干燥90-95度，10mmHg,8-10h涼粉40度左右5、提煉工藝要點(diǎn)1）發(fā)酵液預(yù)處理和過濾放罐后，首先要冷卻目前采用鼓式過濾及板框過濾，加助濾劑。酸化時(shí)pH應(yīng)控制得高些(pH4～5)，再加些絮凝劑如十五烷基溴代吡啶(PPB)等,過濾。隨著高效高速萃取離心機(jī)的出現(xiàn)，如德國(guó)Westfalia公司出品的傾析器(decantor)，可革去過濾工序，比用板框過濾除去菌絲后再提取的收率高出2～3%。2）影響青霉素提取的主要因素青霉素提取效果除了已選定適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶媒，破乳化劑和離心分離設(shè)備外，還與下列主要因素有關(guān):pH值一般從濾液萃取到醋酸丁酯時(shí)，pH選擇2.0～2.5，而從丁酯反萃取到水相時(shí)，pH選擇6.8～7.2之間。溫度要求提取在低溫(10℃以下)條件下進(jìn)行較為有利。在設(shè)備上要考慮用冷鹽水進(jìn)行冷卻，以降低溫度，特別是酸化崗位，溫度要求更低些。時(shí)間

酸化時(shí)速度應(yīng)快些。堿化時(shí)速度可放慢些，因青霉素在中性下半衰期要長(zhǎng)些，破壞要緩和些，故以能分離得清為原則。萃取方式和濃縮比

萃取劑和萃取方式選擇目前生產(chǎn)上采用二級(jí)逆流萃取方式。濃縮比的選擇也很重要，因?yàn)槎□サ挠昧颗c收率和質(zhì)量都有關(guān)系。丁酯用量為濾液體積的25～30%時(shí)，色素相對(duì)含量低，濃縮比為1.5～2.5倍。3）精制脫色脫水：活性碳脫色；冰凍脫水法，用冷鹽水降溫至-18----20度，水結(jié)冰析出。青霉素鉀鹽結(jié)晶：青霉素丁酯二次提取液中，加入醋酸鉀乙醇溶液，青霉素鉀鹽結(jié)晶析出。青霉素鈉鹽：A、從二次丁酯萃取液中直接結(jié)晶，加入醋酸鈉乙醇溶液。B、共沸蒸餾結(jié)晶：0.5mol/L濃度的NaOH溶液、在PH6.4-6.8下萃取，得到青霉素鈉的水萃取液，濃度為15*104--25*104U/ml。然后加入2.5倍體積的丁醇，在16-26度、5-10mmHg下蒸餾，當(dāng)濃縮到原來水萃取液體積時(shí)，停止蒸餾，有鈉鹽析出。第三節(jié)氨基糖苷類抗生素(一)、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)胍基pK11.5甲氨基pK7.7鏈霉素新霉素卡那霉素妥布霉素慶大霉素主要結(jié)構(gòu)是氨基糖和氨基環(huán)醇結(jié)構(gòu)治療G-菌和抗結(jié)核菌鏈霉素的理化性質(zhì)1、游離堿為白色粉末，無嗅，味微苦溶解性：易溶于水，難溶于有機(jī)溶劑2、酸堿性：強(qiáng)堿性在水溶液中依PH降低而以四種形式存在：鏈霉素游離堿（Str）、一價(jià)陽離子（Str-H1+）、Str-H2+、Str-H3+。中性溶液中以Str-H3+形式存在，可用離子交換法提取。3、穩(wěn)定性：較穩(wěn)定pH4~7溶液數(shù)周內(nèi)穩(wěn)定,

pH4.0~4.5最穩(wěn)定降解反應(yīng)：酸、堿條件下水解出鏈霉胍等4、醛基反應(yīng)：與伯胺形成席夫堿在不同pH下各種型式的鏈霉素的平衡濃度6789101112pH%10080604020Str-H33+StrStr-H22+Str-H+5、成鹽：與磷鎢酸、苦味酸、甲基橙等成鹽沉淀，用于鑒別與磺酸、羧酸、磷酸酯成鹽，可溶于有機(jī)溶劑中，可用于溶媒萃取法。與某些鹽形成復(fù)鹽，用于精制，如：鏈霉素鹽酸鹽與氯化鈣（在甲醇中）形成復(fù)鹽，從甲醇中析出。復(fù)鹽溶于水，可通過陰離子交換樹脂（SO4）轉(zhuǎn)為硫酸鹽。（二）鏈霉素的生產(chǎn)工藝流程1、發(fā)酵工藝流程灰色鏈霉菌生產(chǎn)菌種原始斜面孢子生產(chǎn)斜面孢子母瓶培養(yǎng)液子瓶培養(yǎng)液一級(jí)種子液二級(jí)種子液三級(jí)種子液發(fā)酵液原始斜面27度，6-7d生產(chǎn)斜面27度，6d母瓶培養(yǎng)27度，68-72h子瓶培養(yǎng)27度，45-48h一級(jí)種子罐27度，62-63h，1.4v/v*min二級(jí)種子罐27.5度，4-8h，1.6v/v*min三級(jí)種子罐27.5度，54-56h，1.1v/v*min發(fā)酵罐27.5度，PH6.8-7.0，8-9d，0.58v/v*min2、鏈霉素的制備工藝流程工藝過程1、菌種：灰色鏈霉菌2、孢子制備：原始斜面，培養(yǎng)基成分：葡萄糖、蛋白胨、豌豆汁，蛋白胨是關(guān)鍵的原料。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：菌落分布均勻，密度適中，顏色潔白，單菌落豐滿。生產(chǎn)斜面：原始斜面的單菌落接種子斜面。標(biāo)準(zhǔn)：白色豐滿的梅花型或饅頭型。背面有淡棕色色素。合格的孢子存放在冰箱中。影響工藝的因素1.發(fā)酵液的過濾處理2樹脂的吸附、洗脫3活性炭脫色、低溫濃縮第四節(jié)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素（一）、概述：結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：以大環(huán)內(nèi)酯為母體共性：

1、無色弱堿性化合物

2、微溶于水，在水中溶解度隨溫度上升而下降

3、酸性條件苷鍵易水解，堿性內(nèi)酯環(huán)易破壞（二）、紅霉素的主要性質(zhì)1、酸堿性：二甲氨基呈堿性2、溶解性：易溶于醇、丙酮、氯仿、酯，微溶于乙醚和水，在水中溶解度55℃時(shí)最小3、穩(wěn)定性：pH6~8最穩(wěn)定（三）、制備工藝工藝要點(diǎn)：發(fā)酵液的預(yù)處理和過濾；樹脂的吸附、洗滌和解吸、反萃取、結(jié)晶四、四環(huán)類抗生素（一）、概述結(jié)構(gòu)上都含有四并苯母核（二）、四環(huán)素性質(zhì)1、溶解性：

在pH4.5~7.5之間難溶于水游離堿能溶于吡啶、甲醇、丁醇等有機(jī)溶劑和稀酸、稀堿鹽酸鹽能溶于水，不溶或微溶于有機(jī)溶劑2、穩(wěn)定性：干燥低溫穩(wěn)定水溶液堿性條件下不穩(wěn)定，酸性條件下（pH4~5）較穩(wěn)定3、化學(xué)反應(yīng)：差向異構(gòu)化：弱酸性pH2~6

脫水反應(yīng)：較強(qiáng)酸性pH<2時(shí)脫水堿性條件下降解：弱堿性pH8，C環(huán)打開螯合反應(yīng)：與高價(jià)金屬離子成鹽：四環(huán)素與尿素形成復(fù)鹽，用于精制與長(zhǎng)鏈季胺堿成鹽，帶同萃取反應(yīng)（三）、提取工藝工藝要點(diǎn)：發(fā)酵液的預(yù)處理中酸化的作用、純化劑的選擇；結(jié)晶與尿素復(fù)鹽第三節(jié)其他微生物藥物一、微生物產(chǎn)生的酶抑制劑（一）β-內(nèi)酰胺酶抑制劑克拉維酸舒巴坦

克拉維酸，英文名稱Clavulanic

acid，簡(jiǎn)稱CVA，又名棒酸1975年，美國(guó)哈佛大學(xué)教授Woodward提出如把青霉素和頭孢菌素的骨架進(jìn)行組合的青酶烯一定會(huì)有很強(qiáng)的抗菌活力的假說S-------oc-3β-羥基乙叉取代基C-6上沒有酰氨基1976年從棒狀鏈霉菌的代謝產(chǎn)物中分離得到了克拉維酸，本身抗菌活性很弱，但與羥氨芐青霉素組成的復(fù)合劑奧格門汀、與羧噻吩青霉素組成的復(fù)合劑timentin都具有很好的協(xié)同作用，并應(yīng)用于臨床?？死S酸提取純化工藝工藝要點(diǎn)：萃取與濃縮沉淀：與堿性有機(jī)胺成鹽而沉淀析出；10℃，攪拌加入5%（2－（二甲氨基）乙基）醚的乙醇溶液轉(zhuǎn)型（二）降血脂作用的酶抑制劑：洛伐他汀

----膽固醇的生物合成途徑洛伐他汀lovastatin1223A2000年，降血脂藥（降膽固醇藥）成為全球第二大治療藥物類別，全年銷售額達(dá)15