干細(xì)胞臨床應(yīng)用進(jìn)展

北京軍區(qū)生物診斷與治療中心李丁第一頁(yè)，共53頁(yè)。一、干細(xì)胞基礎(chǔ)第二頁(yè)，共53頁(yè)。干細(xì)胞概念的提出AlexanderMaksimov亞歷山大·馬克西莫夫存在于血島中的小淋巴細(xì)胞，可能是產(chǎn)生所有血細(xì)胞的鼻祖第三頁(yè)，共53頁(yè)。干細(xì)胞的“干”譯自英文“Stem”，意為“樹(shù)干”和“起源”。自我更新多向分化第四頁(yè)，共53頁(yè)。干細(xì)胞大小

干細(xì)胞

5μm

紅細(xì)胞

7μm

第五頁(yè)，共53頁(yè)。結(jié)構(gòu)特點(diǎn)漿(少)核(多)核致密比重低密度梯度離心血細(xì)胞單采術(shù)細(xì)胞篩選技術(shù)旁群細(xì)胞（SP）第六頁(yè)，共53頁(yè)。干細(xì)胞的細(xì)胞生物學(xué)特點(diǎn)具有自我更新能力與自我維持能力，也就是說(shuō)它可以(不對(duì)稱(chēng))分裂具有多向分化的能力(多能性或全能性)具有高度增殖能力既具有生理性的更新能力，也具有對(duì)損傷或疾病導(dǎo)致的反應(yīng)與修復(fù)能力干細(xì)胞的自我更新與分化需要特定的微環(huán)境。第七頁(yè)，共53頁(yè)。8

在不同生長(zhǎng)因子刺激下干細(xì)胞可表現(xiàn)出不同分化潛能在一定的微環(huán)境下可以誘導(dǎo)分化為所需要的組織細(xì)胞，如 ：心肌細(xì)胞、肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等等，有很強(qiáng)的可塑性。

第八頁(yè)，共53頁(yè)。9

將成年雄性小鼠的造血干細(xì)胞移植到雌鼠體內(nèi)，3天后在雌鼠的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中檢測(cè)到Y(jié)染色體的存在，證明成體動(dòng)物的造血干細(xì)胞可轉(zhuǎn)分化成為神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。例一例二第九頁(yè)，共53頁(yè)。

按其來(lái)源分類(lèi)

①胚胎干細(xì)胞

②成體干細(xì)胞 ③誘導(dǎo)多能干細(xì)胞ips干細(xì)胞的分類(lèi)

按其分化潛能的大小，可以分為三類(lèi)：

①第一類(lèi)是全能干細(xì)胞

②第二類(lèi)是多能干細(xì)胞

③第三類(lèi)是單能干細(xì)胞第十頁(yè)，共53頁(yè)。胚胎干細(xì)胞

是細(xì)胞的源頭,具有多能或全能性，即具有分化為機(jī)體任何一種組織器官潛能的細(xì)胞。包括胚胎干細(xì)胞（EmbryonicStemCell）、

胚胎生殖細(xì)胞（EmbryonicGermCell）。

胚胎干細(xì)胞的擔(dān)憂

如果從胚胎中提取干細(xì)胞，胚胎就會(huì)死亡；在歐美等國(guó)胚胎干細(xì)胞的研究受到社會(huì)倫理學(xué)的制約1、來(lái)源（宗教、法律、文化背景）2、擴(kuò)增的變異（培養(yǎng)基、模擬環(huán)境）3、技術(shù)普及的困難和質(zhì)量控制問(wèn)題4、出路是工業(yè)化供應(yīng)干細(xì)胞第十一頁(yè)，共53頁(yè)。倫理爭(zhēng)論采集胚胎干細(xì)胞毀壞了囊胚,“這是謀殺”!胚胎干細(xì)胞研究需要人類(lèi)細(xì)胞,可以創(chuàng)造出人類(lèi)細(xì)胞的商業(yè)化市場(chǎng),“這是對(duì)生命的貶值”!ReproducedbypermissionofDaveCatrowandCopleyNewsService第十二頁(yè)，共53頁(yè)。對(duì)采集胚胎干細(xì)胞的宗教爭(zhēng)論生命優(yōu)先論認(rèn)為:在受胎之時(shí)或者受胎之后就產(chǎn)生了人格由此，他們認(rèn)為從胚胎采集干細(xì)胞就是一種謀殺人類(lèi)生命的行為.他們認(rèn)為不能為了成千上萬(wàn)人的健康利益而謀殺其他人類(lèi).5-6天的囊胚第十三頁(yè)，共53頁(yè)。成體干細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)成體干細(xì)胞可從患者自身獲得，而不存在組織相容性的問(wèn)題，治療時(shí)可避免長(zhǎng)期應(yīng)用免疫抑制劑對(duì)患者的傷害。雖然胚胎干細(xì)胞能分化成各種細(xì)胞類(lèi)型，但目前尚不能精確控制胚胎干細(xì)胞在特定的部位分化成相應(yīng)的細(xì)胞，當(dāng)前的做法容易導(dǎo)致畸瘤。成體干細(xì)胞也具有類(lèi)胚胎干細(xì)胞的高度分化能力，具有可塑性。使用成體干細(xì)胞可避免一些關(guān)于胚胎處理的倫理學(xué)爭(zhēng)議。14第十四頁(yè)，共53頁(yè)。干細(xì)胞的可塑性15第十五頁(yè)，共53頁(yè)。二、干細(xì)胞治療的發(fā)展第十六頁(yè)，共53頁(yè)。FDA批準(zhǔn)的MSC治療項(xiàng)目I型糖尿病GVHD克隆氏病孤兒藥III期臨床骨科疾?。汗晒穷^壞死、半月板損傷肝臟疾?。焊闻K纖維化、肝功能衰竭心臟疾?。盒募」Ｋ劳庵苎懿。簭V泛性小動(dòng)脈硬化神經(jīng)系統(tǒng)疾病：脊髓損傷其它：先天性骨發(fā)育不良等I-II期臨床Prochymal17第十七頁(yè)，共53頁(yè)。我國(guó)干細(xì)胞治療的趨勢(shì)

（1）市場(chǎng)需求巨大

干細(xì)胞研究的突破將使干細(xì)胞治療成為防治占人口總死亡率60%以上的危重病的主要手段，患者的需求迫切，需求量大。（2）干細(xì)胞技術(shù)日益成熟普及（3）患者對(duì)干細(xì)胞治療的接受程度正在逐步的提高（4）干細(xì)胞治療蘊(yùn)含廣闊的醫(yī)療前景18第十八頁(yè)，共53頁(yè)。多能細(xì)胞（成體干細(xì)胞）的生物學(xué)特性

為開(kāi)展細(xì)胞治療奠定了基礎(chǔ)1、長(zhǎng)期存活、不斷的自我繁殖2、可以跨系、跨胚層分化,具有強(qiáng)大的可塑性3、化學(xué)趨向性生物學(xué)特性-為什么能治病第十九頁(yè)，共53頁(yè)。多能細(xì)胞的化學(xué)趨向性20第二十頁(yè)，共53頁(yè)。多能細(xì)胞可以治療的疾病心血管內(nèi)科

內(nèi)分泌內(nèi)科

神經(jīng)內(nèi)科

腫瘤科

免疫內(nèi)科

心血管病急性心肌梗塞缺血性心臟疾病心力衰竭糖尿病肌營(yíng)養(yǎng)失調(diào)卵巢早衰帕金森氏癥老年癡呆癥共濟(jì)失調(diào)脊髓外傷性癱瘓運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元病重癥肌無(wú)力面癱癲癇急性白血病慢性髓性白血病惡性淋巴瘤多發(fā)性骨髓瘤多種無(wú)法手術(shù)的實(shí)體腫瘤化療后的支持療法遺傳性免疫缺陷病類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎克隆氏病復(fù)發(fā)性硬化強(qiáng)直性脊柱炎變應(yīng)性鼻炎腎臟內(nèi)科

血管外科

神經(jīng)外科

骨科

皮膚、整形科

系統(tǒng)性紅斑狼瘡腎功能衰竭腎梗塞糖尿病足閉塞性脈管炎血栓脊髓損傷肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化癥腦外傷后遺癥腦梗死植物人腦卒中后遺癥脊髓炎后遺癥骨折股骨頭壞死骨質(zhì)疏松癥腦外傷腰椎骨折骨折不愈合白癜風(fēng)去皺美容凹陷性疤痕抗衰老消化內(nèi)科

婦兒科

眼科

血液科

五官科肝炎、肝硬化炎性腸病小兒腦癱

視神經(jīng)發(fā)育不良視神經(jīng)萎縮

地中海貧血再生障礙性貧血

口腔科（外）牙病第二十一頁(yè)，共53頁(yè)。多能細(xì)胞的采集第二十二頁(yè)，共53頁(yè)。細(xì)胞的處理臍帶血采集：60-100ml左右;細(xì)胞分離：109左右/份6%Hespan羥乙基淀粉離心洗滌第二十三頁(yè)，共53頁(yè)。多能細(xì)胞的治療方法1、靜脈輸入治療2、病變部位直接注射3、血管介入治療4、體腔輸入治療（如：中央腦室，珠網(wǎng)膜下腔注射）24第二十四頁(yè)，共53頁(yè)。1、靜點(diǎn)

在細(xì)胞臨床治療中靜點(diǎn)對(duì)所有疾病都可以用。（干細(xì)胞具備化學(xué)趨向性和歸巢作用。）一般用100ml生理鹽水稀釋分離出來(lái)的干細(xì)胞，通過(guò)靜脈點(diǎn)滴的方法進(jìn)行細(xì)胞治療。多能細(xì)胞可以通過(guò)血液循環(huán)到達(dá)細(xì)胞受損部位?？捎糜谌纾豪夏臧V呆、帕金森氏癥、抗衰老等等的治療。方法：25第二十五頁(yè)，共53頁(yè)。2、患病部位注射干細(xì)胞股骨頭壞死-----直接往關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射糖尿病足--------沿下肢腓腸肌走向的血管方向多點(diǎn)注射心肌梗死————梗死的心肌部位

糖尿病致眼底動(dòng)脈硬化（失明）----可從眼底血管入口處注射干細(xì)胞

脊髓損傷--------開(kāi)放式治療，在受損部位圍繞注射干細(xì)胞。

進(jìn)行性肌營(yíng)養(yǎng)不良------雙重治療：肌注+靜點(diǎn)

重癥肌無(wú)力------雙重治療：肌注+靜點(diǎn)方法：26第二十六頁(yè)，共53頁(yè)。3、介入治療腎病、腎衰-----腎總動(dòng)脈肝硬化---------肝總動(dòng)脈糖尿病---------1型和2型均可股骨頭壞死————旋內(nèi)、外支心肌梗死----------用介入法將干細(xì)胞注射到梗死的部位或接近梗死部位。方法：27第二十七頁(yè)，共53頁(yè)。小兒腦癱------腦頂囟門(mén)直接注射入中央腦室4、體腔輸入治療腦血栓后遺癥------腦頂鉆眼注入干細(xì)胞或蛛網(wǎng)膜下腔注入干細(xì)胞

帕金森氏癥-----蛛網(wǎng)膜下腔注射方法：28第二十八頁(yè)，共53頁(yè)。三、臨床應(yīng)用及效果第二十九頁(yè)，共53頁(yè)。缺血性心臟病

缺血性心臟病、心肌梗死，均可以利用自體骨髓間充質(zhì)細(xì)胞移植治療，2001年國(guó)外即已有報(bào)道，2003年被美國(guó)心臟協(xié)會(huì)評(píng)為優(yōu)秀研究成果；可采用體外分離注射、心導(dǎo)管冠脈注射、開(kāi)胸手術(shù)經(jīng)心外膜心肌注射，我國(guó)已有上萬(wàn)例開(kāi)展，總有效率95%以上。302005年11月，美國(guó)心臟協(xié)會(huì)報(bào)道了一個(gè)三國(guó)多中心用多能細(xì)胞治療心肌梗塞的報(bào)告，結(jié)論是多能細(xì)胞對(duì)心臟功能的改善是沒(méi)有任何現(xiàn)有臨床藥物能達(dá)到的。第三十頁(yè)，共53頁(yè)。修復(fù)－AMI

1oEP＝changeinEF(3-6dpost-AMIto4m)

GroupPlaceboStemcellpallpts35.50.014EF<49%02EF>49%3.74.00.81<5days2>5days1.97.00.004Schachinger,etal.NEJM2006;355;12-121031第三十一頁(yè)，共53頁(yè)。我國(guó)多能細(xì)胞移植治療心血管疾病的臨床應(yīng)用復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院等自2003年開(kāi)展了骨髓干細(xì)胞移植治療冠心病、缺血性心臟病及心衰的臨床研究，2006年入組600多病例。隨訪6個(gè)月。患者心臟功能改善顯著，而對(duì)于發(fā)病時(shí)間超過(guò)6個(gè)月的前壁心肌梗死患者和擴(kuò)張型心肌病患者，左室收縮功能的改善有限。浙江大學(xué)附屬第二醫(yī)院等利用骨髓間質(zhì)干細(xì)胞移植治療對(duì)ST段抬高心肌梗死、亞急性心肌梗死、慢性缺血性心肌病、缺血性心衰以及原發(fā)性擴(kuò)張性心肌病患者有效，但對(duì)陳舊性心肌梗死和擴(kuò)張性心肌病患者的左心室收縮功能改善有限。第三十二頁(yè)，共53頁(yè)。治療前治療后3個(gè)星期第三十三頁(yè)，共53頁(yè)。肢體缺血性疾病

下肢缺血性疾病是一類(lèi)常見(jiàn)病，現(xiàn)有治療方法的療效很不理想，病程長(zhǎng)、患者痛苦大、殘肢率高、喪失勞動(dòng)能力高、經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)重。多能細(xì)胞療法采用多次嵌合移植，通過(guò)導(dǎo)管技術(shù)或局部組織注射進(jìn)行細(xì)胞移植，促進(jìn)血管重新生成。34第三十四頁(yè)，共53頁(yè)。糖尿病足總有效率達(dá)87.2%，使患者疼痛、冷感緩解，行走間距延長(zhǎng)，潰瘍愈合，免除了截肢致殘的嚴(yán)重后果。35第三十五頁(yè)，共53頁(yè)。給藥6小時(shí)注射部位36第三十六頁(yè)，共53頁(yè)。治療前后患者足部情況37第三十七頁(yè)，共53頁(yè)。第三十八頁(yè)，共53頁(yè)。第三十九頁(yè)，共53頁(yè)。骨科疾病

利用不同的載體將多能細(xì)胞移植于損傷部位，可以治療軟骨損傷、剝脫性骨軟骨炎、骨折不愈合、延遲愈合、股骨頭壞死等。40第四十頁(yè)，共53頁(yè)。41病例一股骨頭壞死第四十一頁(yè)，共53頁(yè)。第四十二頁(yè)，共53頁(yè)。多能細(xì)胞移植6m血管造影前后對(duì)照43第四十三頁(yè)，共53頁(yè)。術(shù)后3天術(shù)后3月術(shù)后9個(gè)月PicturesprovidedbyDr.Wang病例二44第四十四頁(yè)，共53頁(yè)。（十）干細(xì)胞修復(fù)骨損傷促進(jìn)骨損傷修復(fù)開(kāi)放性肱骨骨折固定髂骨移植物+多能細(xì)胞二個(gè)月后五個(gè)月后五個(gè)月后第四十五頁(yè)，共53頁(yè)。神經(jīng)系統(tǒng)疾病

多能細(xì)胞也可分化為神經(jīng)細(xì)胞，可用于治療多種由于神經(jīng)細(xì)胞壞死或功能障礙引發(fā)的疾病，如：腦卒中、側(cè)索硬化癥、腦癱、脊髓脊柱損傷等。46第四十六頁(yè)，共53頁(yè)。肝硬化

無(wú)特效藥！放腹水加輸白蛋白第四十七頁(yè)，共53頁(yè)。

分離的多能細(xì)胞經(jīng)肝動(dòng)脈或門(mén)靜脈輸入，使其在肝臟內(nèi)落戶，在肝臟的微環(huán)境調(diào)節(jié)下可以分化為肝細(xì)胞，新生的肝細(xì)胞承擔(dān)肝臟的工作改善肝功能。48第四十八頁(yè)，共53頁(yè)。國(guó)外資料：擬行肝癌（肝右葉）部分肝切除患者，術(shù)前給予多能細(xì)胞治療（肝左葉），21天后肝左葉成倍增大。StemCells2005;23;463-470第四十九頁(yè)，共53頁(yè)。治療AD的適應(yīng)證

免疫風(fēng)濕病(1)系統(tǒng)性硬化癥(SSc)(早期有明顯的皮膚和內(nèi)臟受累);(2)系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)(3)類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)(4)自身免疫性肺動(dòng)脈高壓50第五十頁(yè)，共53頁(yè)。治療AD的適應(yīng)證(5)壞死性血管炎

(6)