實驗診斷學資料第1頁/共149頁二、實驗診斷學的發(fā)展簡史（一）最早和最原始的實驗診斷·Hippoerates希臘名醫(yī)?！r間：公元前400年·方法：感官直視法（色、嗅、味等）·標本：尿液第2頁/共149頁（二）臨床血液學檢驗1、系統(tǒng)地科學地研究血細胞從16世紀末至17世紀初顯微鏡發(fā)明和改良開始。2、方法學變化傳統(tǒng)的方法：以手工操作，顯微鏡，計數(shù)板為標志現(xiàn)代方法：以血細胞自動分析儀為主要標志3、血細胞研究及檢驗方法發(fā)展簡史第3頁/共149頁第4頁/共149頁4、發(fā)展史的簡要過程：顯微鏡→RBC→WBC→PLT→計數(shù)→染色→血細胞功能→BM穿刺針→血細胞分析儀（電阻→激光→光學、電學、染色相結合）手工分析→儀器分析第5頁/共149頁（三）臨床化學檢驗發(fā)展簡史19世以前觀察人體化學組成變化↓1918年Lichtwitz提出“臨床化學”名詞↓1931年Peter等出版《臨床化學》專著↓19世紀末顯量分析和容量分析↓20世紀初；Folin比色分析↓50年代酶活力測定↓80年代自動化分析（超微量）第6頁/共149頁（四）臨床微生物學檢驗發(fā)展簡史17世紀末顯微鏡觀察微生物↓19世紀年代創(chuàng)巴氏消毒法（Pasteur）↓Lister創(chuàng)建無芯外科手術↓Koch證明微生物是傳染病的致病因子↓細胞培養(yǎng)與染色技術↓1900年后病原微生物分離證實↓1929年Fleming發(fā)現(xiàn)青霉素↓分子微生物檢驗第7頁/共149頁微生物↓病原微生物↓抗生素↓殺滅病原微生物（變異）第8頁/共149頁（五）臨床免疫學檢驗發(fā)展簡史天花（公元713~741唐代）↓預防天花（人痘苗、牛痘苗）↓細胞免疫↓體液免疫↓1901年“免疫學”名詞提出↓血清學（抗體：抗原）↓1958年Barnet克隆選擇學說↓T細胞亞群↓抗體分子結構↓1975年單克隆抗體制備↓Ig基因重排↓細胞因子（受體、基因、活性）↓分子免疫學第9頁/共149頁免疫學實驗診斷細胞免疫檢驗：ICC，淋巴細胞亞群分類與功能檢測。體液免疫檢驗：Ag，Ab，C等檢測第10頁/共149頁（六）實驗診斷學發(fā)展可發(fā)現(xiàn)以下特點：1、從簡單到復雜，從形態(tài)到功能，從手工到儀器（自動化）2、技術創(chuàng)新，方法創(chuàng)新，觀念創(chuàng)新是發(fā)展的動力3、臨床應用與實驗技術相互促進，共同提高。第11頁/共149頁三、實驗診斷學的現(xiàn)狀與展望（一）自動化（例舉10種）自動血細胞分析儀自動細胞鑒定儀自動生化分析儀自動血鏡養(yǎng)儀自動化子發(fā)光分析儀自動尿液分析儀自動放免分析儀自動染色體分析儀自動酶免分析儀流式細胞儀第12頁/共149頁（二）試劑商品化（1）FDA、SDA認可試劑（2）與儀器配套試劑（3）質優(yōu)價廉試劑（自評）第13頁/共149頁（三）方法學的標準化·國際標準化·國內標準化·區(qū)域內標準化原則：精密、準確、簡便、快速第14頁/共149頁（四）POCT（Pointofcaretest）：意譯：床邊檢驗即刻檢驗特點：操作簡便、試劑穩(wěn)定、快速、儀器設備簡單適用：急診室、診所、家庭檢測等缺點：標準化、規(guī)矩化、質檢等較差第15頁/共149頁（五）影響因素與質量保證第16頁/共149頁第17頁/共149頁（六）循證檢驗醫(yī)學

(evidencebasedlaboratorymedicine，EBLM）第18頁/共149頁四、臨床應用：·疾病診斷（病因、鑒別）·療效觀察·預后判斷·預防保健·科學研究第19頁/共149頁

結果解釋(1)(2)同一疾病不同結果同一結果不同疾病

—結合臨床第20頁/共149頁五、學習的重點與方法方法：掌握共性知識（先）：概念性、普通性、實用性注意個性知識（后）：特殊性、專業(yè)性、復雜性重點：

1、掌握各項檢驗的適應證與選用原則

2、掌握參考及其臨床意義

3、了解原理、方法、影響因素等第21頁/共149頁第一章血液檢查一、血液檢查的相關知識第22頁/共149頁1、血液的基本功能（1）參與新陳代謝（2）參與各種功能調節(jié)（3）維持內、外環(huán)境的相對平衡·參與機體的每一個功能活動第23頁/共149頁2、血液的組成第24頁/共149頁3、血液成分改變與疾病的關系血液成分改變←→疾病（質與量）（組織、器官、細胞）第25頁/共149頁4、血液常規(guī)檢驗的概念變化（1）傳統(tǒng)血常規(guī)：RBC、Hb、WBC、DC（手工法）（2）現(xiàn)代血常規(guī)：二分類、三分類、五分類全自動血細胞分析儀十多次參數(shù)至幾十項參數(shù)第26頁/共149頁5、血細胞分析儀簡介血細胞分析儀發(fā)展簡史：1953年第一名血細胞分析儀由Coulter發(fā)明問世60年代血細胞分析用于RBC、Hb、WBC、

MCV、MCH、MCHC、HCT測定70年代增加Pet測定80年代增加DC、RDW、PCV等新項目90年代增加Ret，計數(shù)及分類計數(shù)等成為醫(yī)學檢驗領域的重要儀器之一。第27頁/共149頁血細胞分析儀功能特點（1）多參數(shù)分析20或40多項（2）精確度高CV：＜5%~10%（3）速度快50~120T/h（4）用血量少＜250ml（個別＜6ul）（5）結果簡明參數(shù)、含義報告、直方圖式或散點圖（6）質檢可靠配套質控品、全國或全世界質控網(wǎng)絡監(jiān)測（7）自動清洗各標本間互染率＜1%（8）報警功能異常結果自動報警（9）有效篩查三分類復檢＜30%，五分類＜15%，提示異常細胞第28頁/共149頁血細胞分析儀的報告方式

（1）三分類報告(參數(shù)、含義報告、直方圖)第29頁/共149頁（2）五分類儀器（增加散點圖）第30頁/共149頁DF2F-單核細胞，G-淋巴細胞，H-中性粒細胞，I-血小板DF1：A-單核細胞，B-淋巴細胞，C-中性粒細胞，D-嗜性粒細胞，E-血小板。在DF1中由于淋巴細胞或小單核細胞與嗜堿性細胞分布有重疊，故不能直接觀察。只有在VCS三維圖中才能區(qū)分第31頁/共149頁第二種散點圖各分類區(qū)細胞分別與血涂片中的白細胞類型相對應：①噪聲、②幼紅細胞、③聚集血小板、④淋巴與嗜堿粒細胞、⑤大的未染色細胞（LUC），原始細胞的光散射比LUC更強、⑥單核細胞、⑦中性粒細胞、⑧嗜酸性粒細胞第32頁/共149頁二、紅細胞計數(shù)和血紅蛋白測定1、紅細胞起源，演化和發(fā)育

HIV↓EPOTHSC→BFU-E→CFU-E-→原紅→早紅→中紅→晚紅→成熟紅

IL-324-48hBM:←--------------72h----------------→|←-→blood第33頁/共149頁紅細胞分化發(fā)育成熟：5天

3-5次分裂原紅→→→→→RBC(8-16個)Hb開始合成階段：早幼紅調節(jié)：EPO/IL-3/睪丸激素/神經(jīng)體液/晚幼紅紅細胞數(shù)量動態(tài)平衡120RBC生成←←→→RBC破壞（BM）1/200（脾臟）紅細胞主要功能：攜O2/血液PH緩沖第34頁/共149頁2、Hb的特點：

MW：64458Dal

數(shù)量：2.8億/RBC

攜O2：1.34mlO2/g

染色：淡紅色/Wright第35頁/共149頁3、 RBC、Hb參考值分組 RBC Hb 男性 （4.0~5.5）×1012/L 120~160g/L 女性 （3.5~5.0）×1012/L 110~150g/L 新生兒（6.0~7.0）×1012/L 170~200g/L RBCHb變化的關系（正色RBC）

[舊制單位]RBC：Hb~100：3（萬/mm3：g/dl）

[新制單位]RBC：Hb~1：3（×1012/L：g/L）影響因素：（1）總血容量改變：大量失血早期，血濃度改變小，難反映貧血存在。（2）總血漿容量改變：濃縮或血稀釋

（3）個體差異：性別、年齡、居住海拔高度第36頁/共149頁4、RBC、Hb檢測的臨床意義[RBC、Hb↓]—量變

(1).生理性↓:a.嬰幼兒（3m~15y）:造血原料不足

b.妊娠中、晚期:血容量↑

c.部分老年人:造血功能↓

(2)病理性↓各種貧血（三大類）第37頁/共149頁[RBC、Hb↑]—量變

(1)相對↑：血漿容量↓、相對性、暫時性:嘔吐、腹瀉、燒傷、多汗、多尿（2）絕對↑（缺O(jiān)2）：①生理性↑：胎兒、新生兒、高原生活、劇烈運動、應激等②病理性↑：a.代償性↑：多種心、肺疾患（嚴重、慢性）

b.持續(xù)性↑：真紅（Polycythemiavera）：（7~10）×1012/L，170~250g/LEPO↑：腫瘤（肝癌、胃癌）、腎疾（腎盂積水，多囊腎）第38頁/共149頁[RBC、Hb形態(tài)改變]—質變第39頁/共149頁第40頁/共149頁第41頁/共149頁第42頁/共149頁6、貧血的分類第43頁/共149頁第44頁/共149頁貧血的病因與發(fā)病機制分類第45頁/共149頁(續(xù))第46頁/共149頁(續(xù))第47頁/共149頁7、缺鐵性貧血檢查項目的選擇和應用第48頁/共149頁8、溶血性貧血的分類第49頁/共149頁9、溶血性貧血檢查項目的選擇和應用第50頁/共149頁三、白細胞計數(shù)和白細胞分類

1、五種白細胞形態(tài)特征及參考值第51頁/共149頁2、白細胞計數(shù)和分類的臨床意義中性粒細胞增多（neutrophilia）生理性增多：見于一天內波動（下午較早晨高）妊娠后期及分娩時，劇烈運動或勞動后、飽餐或淋浴后、高溫或嚴寒等（暫時性↑）。第52頁/共149頁病理性增多：（1）急性感染：化膿性感染最常見。輕度WBC（±），N↑。中度：WBC＞20×109/L，N↑↑極重度：WBC不高甚至減低。（2）嚴重損傷：嚴重外傷、大手術、大面積燒傷，AMI等。（3）急性大出血：見于脾破裂、宮外孕等（4）急性中毒：代謝性中毒——糖尿病癥中毒，尿毒癥和妊娠中毒；急性化學藥物中毒——急性鉛毒，汞中毒，安眠藥中毒，有機磷農(nóng)藥中毒等。（5）急性溶血：血管內嚴重溶血等（6）惡性腫瘤：非造血系統(tǒng)惡性腫瘤，如肝癌、胃癌等（7）其他：AIHA痛風、嚴重缺氧等第53頁/共149頁異常增生性增多（1）粒細胞白血病：AML（M，M2M3M4

M6）。WBC一般為（10~50）109/L，＞

100×109/L較少。（2）MPD（Myeloproliferativedisorders）：包括真紅，ITP，骨髓纖維化和慢粒等第54頁/共149頁中性粒細胞減少（neutropenia）

WBC＜4×109/L稱白細胞減少，主要以N↓為主。N＜1.5×109/L稱粒細胞減少癥。N＜0.5×109/L稱粒細胞缺乏癥。第55頁/共149頁（1）某些感染：病毒感染：流感、麻疹、病毒性肝炎、水痘、風疹、巨細胞病毒等。細菌性感染：ST、副ST、TB、膿毒血癥等。其他：年老體弱、慢性消耗性疾病或晚期惡性腫瘤患者伴嚴重感染時，WBC↓↓（但N↑）。（2）某些血液?。毫８?、粒缺、非白、惡熱等，也可見于惡貧，嚴重IDA、PNH等。（3）理化因素：放射線、同位素、化學物品及化學藥物引起N↓。（4）My功能亢進：脾亢、某些腫瘤、Gaucher病，Niemann-Pick

病等。（5）其它：SLE，某些自身免疫性疾病，過敏性休克等。第56頁/共149頁淋巴細胞絕對增多的病因第57頁/共149頁淋巴細胞減少（Lymphocytopenia）：接觸放射線；應用腎上腺皮質激素、烷化劑、抗淋巴細胞球蛋白（ALG）、先天性或獲得性免疫缺陷綜合癥等。第58頁/共149頁中性粒細胞的核象變化正常：St：sg≈1：13，sg以309居多核左移：st：sg比值增大，st增多，甚至出現(xiàn)幼稚粒細胞核右移：sg增多，分析在5以上＞3%時第59頁/共149頁中性粒細胞的核象變化第60頁/共149頁中性粒細胞形態(tài)異常（1）中性粒細胞的中毒性改變：見于嚴重傳染病，惡性腫瘤，嚴重中毒，大面積燒傷等①大小不均（anisougtosis）②中毒顆粒（toxicgranulation）③空泡形成（Vacuolization）④核變性（degenerationofnucleus）⑤杜勒小體（Dohlerbodies）第61頁/共149頁（2）巨多分葉核中性粒細胞：φ10~25ηm，＞509，少數(shù)＞

1009，見于巨幼貧或應用抗代謝藥物后（3）棒狀小體（auerbodies）：急粒、急單時可見，急淋（無）（4）其他：均與遺傳有關的異常變化。

Pelger-Hilet畸形：無分葉功能——核畸形、如腎形、啞鈴形、槍生形等。常染色體顯性性疾病。某些感染、白血病或MDS等

Chediak-Higashi畸形：常染色體急性遺傳性疾病，患者易感染，常伴白化病

Ader-Reilly畸形：常伴有脂肪軟骨營養(yǎng)不良或遺傳性粘多糖代謝障礙。

May-Hegglin畸形：患者粒細胞終身含有淡藍色包涵體。第62頁/共149頁淋巴細胞形態(tài)異常主要見于病毒感染，如傳單，病毒性肝炎，出血熱，濕疹，過敏等。Ⅰ型：泡沫型Ⅱ型：不規(guī)則型Ⅲ型：幼稚型第63頁/共149頁嗜酸性細胞增多（eosinophilia）（1）過敏性疾?。篍＞10%見于支氣管哮喘、藥物過敏，蕁麻疹、食物過敏、血清病等。（2）寄生蟲?。篍＞10%血吸蟲病、肺吸蟲病、蛔蟲病、鉤蟲病等。

E＞90%見于嗜酸性粒細胞型類白反應。（3）皮膚?。簼裾?，剝脫性皮炎，天皰瘡，銀屑病等。（4）血液?。郝?，嗜酸粒細胞白血病，淋巴瘤，MM等。（5）某些惡性腫瘤：如肺癌等。（6）某些傳染?。盒杉t熱等。第64頁/共149頁嗜酸性粒細胞減少（cosinopenia）見于ST，副ST，大手術，燒傷等，或長期應用腎上腺皮質激素。第65頁/共149頁嗜堿性粒細胞增多（basophilia）（1）過敏性疾?。航Y腸炎、藥物、食物、吸入物過敏反應、紅斑及RA等。（2）血液?。郝?、嗜堿性粒細胞白血病，骨髓纖維化等。（3）惡性腫瘤：特別是移植癌時。（4）其他：某些內分泌癥患者如糖尿病，傳染病如水痘、流感、天花、結核等。嗜堿性粒細胞減少（basophilopenia）無臨床意義。第66頁/共149頁單核細胞增多（monocytosis）（1）某些感染：如感染性心內膜炎、瘧疾、黑熱病、急性感染恢復期、活動性肺結核等。（2）某些血液?。簡魏思毎籽?、粒缺、MM、惡組、淋巴瘤、MDS等。單核細胞減少（monocytopenia）：無臨床意義。第67頁/共149頁血細胞分析其他參數(shù)及臨床意義1、紅細胞比容測（hematocrit，Hct）指抗凝血經(jīng)離心（2264×g/30min）沉淀后，測得下沉的紅細胞在全血中所容積的百分比值。參考值：男性：0.42~0.49L/L，女性：0.37~0.48L/L臨床意義：（1）Hct↑：血液濃縮（如嚴重嘔吐，腹瀉；大量出汗，大面積燒傷）、真紅↑、新生兒、高原生活、慢性肺疾患。（2）Hct↓：各種類型的貧血第68頁/共149頁2、紅細胞平均值參數(shù)（1）平均紅細胞容積（meanCorpuscularVolume，

MCV）第69頁/共149頁（2）平均紅細胞血紅蛋白量（meanCorpuscularHemoglobin，MCH）第70頁/共149頁（3）平均紅細胞血紅蛋白濃度（meanCorpuscularHemoglobinConcentration，MCHC）第71頁/共149頁3.紅細胞容積分布寬度（redbloodcellvolumedistributionwidth,RDW反映外周血紅細胞異質性的參數(shù)臨床意義：（1）IDA與地貧鑒別：IDA-RDW↑↑

地貧：88%RDW正常（2）IDA早期診斷：IDA早期，RDW↑（MCV，MVH正常）（3）Bessman貧血分類第72頁/共149頁4.網(wǎng)織紅細胞測定（reticulocyte，Ret）Ret是尚未完全成熟的紅細胞（年青紅細胞）參考值：0.05~0.015/（24~84）109/L。臨床意義：（1）Ret↑：BM紅系增生旺盛，常見于溶貧（常＞5%，嚴重時20%，少數(shù)＞40%）亦可見于急性失血（↑↑），IDA（±↑）、巨貧（±↑）及貧血試驗性治療診斷。（2）Ret↓：BM造血功能減低，常見于AA。亦見于骨髓病性貧血（如急白淋巴病、MM）。第73頁/共149頁5、紅細胞沉降率測定（eryhrocyte，sedimentationrate，ESR）

ESR指紅細胞在一定條件下沉降的速率。影響因素：（1）血漿多種蛋白的比例變化

RBC間排斥力↓：α＜β＜γ＜Fbg（帶正電荷）

RBC間排斥力↑：A/b（帶負電荷）（2）紅細胞數(shù)量和形態(tài)：RBC↓→ESR↑，RBC↓→ESR↓。

RBC大→ESR↑，RBC→ESR↓。（3）其他因素：Chol，TG→ESR↑，卵磷脂→ESR↓參考值：男性：0~15mm/1小時未，女性：0~20mm/1小時未第74頁/共149頁臨床意義：（1）生理性增快：12歲以下兒童、60歲以上老年人、婦女月經(jīng)期、妊娠3個月以上與生理性貧血或Fbg↑

有關。（2）病理性增快：

①多種炎癥性疾?。篊PR↑（acutephasereactant）-α2-M、

CRP、α1-AT、Hp、Tf、Fbg等增加。②組織損傷及壞死：AMI（ESR↑與心絞痛（ESR正常）鑒別③惡性腫瘤：良性腫瘤（ESR正常）與（ESR↑）鑒別④高球蛋白血癥：慢性腎炎、肝硬化、MM、-α2-M血癥、SLE、亞急性心內膜炎、黑熱病等。⑤其他：部分貧血患者、動脈住粥樣硬化、糖尿病、腎病綜合癥等。（3）血沉減慢：臨床意義不大第75頁/共149頁6、血小板計數(shù)（PlateletCount，Plt）參考值：（100~300）×109/L，臨床意義：（1）Plt↓：Plt＜100×109/L，①Plt生成降低：AA，放損、急白、巨貧、骨髓纖維化②Plt破壞或消耗增多：ITP、SLE、惡淋、風疹、DIC、

TTP新生兒血小板減少癥、輸血后血小板減少癥。③Plt分布異常：脾亢、大量輸血、大量輸液等。（2）Plt↑：Plt＞400×109/L，①原發(fā)性增多：慢粒、真紅、ITP、骨髓纖維化早期②繼發(fā)性增多：急性感染、急性溶血、某些癌癥。第76頁/共149頁7、平均血小板體積（meanplateletsvolume，MPV）

MPV指血小板的平均體積。用fl表示臨床意義：（1）MPV與Plt呈非線性負相關，隨著Plt增高，MPV數(shù)值越來越小。（2）Plt和MPV結合對血小板異?？煞譃椋孩貾lt和MPV正常②Plt減少，MPV隨之增高，如血小板破壞增多③Plt增高，MPV正常，如反應性血小板增多④MPV異常增高，如地中海貧血，慢性髓性白血?、軲PV異常減低，如血小板增加不良第77頁/共149頁第一章第四節(jié)血型檢查一、血型定義1、狹義血型：指紅細胞表面抗原的差異2、廣義血型：指各種血液成分具有抗原的差異，即遺傳多志性標記，包括紅細胞、白細胞、血小板及其某些血漿蛋白。3、血型系統(tǒng)：由若干個相互關聯(lián)的抗原、抗體組成的血型體系血型系統(tǒng)。第78頁/共149頁二、血型發(fā)展簡史（一百多年）（1）1900年Landstello血液相互混合試驗：將人血的凝集反應分為三種，同時指出它們在輸血中的主要性。（2）1902年Decastello等又加成4種反應（3）1902年Jan’sRg根據(jù)這4人血之間的反應交互凝集現(xiàn)象而分類，稱Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ。（4）1910年MOSS單獨的發(fā)現(xiàn)了同樣的現(xiàn)象，也分為4型（5）1921年國際統(tǒng)一命名，即A、B、O法。由于ABO血型系統(tǒng)的鑒定應用，使輸血治療在臨床應用上開創(chuàng)了新紀元。（6）1940年Landsteiner等發(fā)現(xiàn)了Rh因子，即Rh系血型。（7）以后相繼發(fā)現(xiàn)了一系列血型系統(tǒng)：ABO、MNSS、P、Rh、

Latherun、LewisKell、Duffy、Kidd、Diego、Yt、I、Xg、

Domberock、Colton等（8）至今，人類紅細胞血型已有27個系統(tǒng)400多種抗原。第79頁/共149頁三、ABO系統(tǒng)抗原

（一）ABO血型抗原抗體第80頁/共149頁（二）ABO系統(tǒng)亞型

A、B血型均有亞型，但以A亞型最多見且有臨床意義。常見的有A1、A2、A3

、Ax和Am，以A1和A2最重要。第81頁/共149頁（三）ABO血型鑒定第82頁/共149頁（四）交叉配血試驗主側：Dc+Ps次側：Ds+Pc第83頁/共149頁（五）ABO血型檢測的臨床意義1、安全輸血：同型輸血→同亞型輸血2、新生兒溶血病（hemolyticdiseaseofnewborn，

HDN）

ABO系統(tǒng)母嬰血型不合：母O型，胎兒A或B型，約90%。

Rh系統(tǒng)母嬰血型不合：少數(shù)，約10%3、器官移植：供受體ABO血型必須相合4、其他：系統(tǒng)鑒定、法醫(yī)鑒定、某些疾病的相關性調查第84頁/共149頁（六）Rh血型系統(tǒng)

1940年Landsteiner和Wiener用恒河猴（Rhesusmonkey）的紅細胞免疫家免，所得抗血清能與85%的白人紅細胞發(fā)生凝集反應，因此認為這些人的紅細胞上有恒沙猴紅細胞相同的抗原，因此而以Rh命名之。第85頁/共149頁（七）Rh系統(tǒng)的抗原和抗體

抗原：C、c、D、E、e，5種抗原性D＞E＞C>c＞e

抗體：antiC、antic、antiD、antiE、antie5種通常稱含D抗原的RBC為Rh（+），無D抗原者為Rh（—）。Rh系統(tǒng)亞型：

Dμ—有臨床意義。Dμ只能與7%~25%的抗D反應

Dμ易誤定為Rh（—），用間接抗人球蛋白試驗可查出。Rh抗體屬IgG，系不完全抗體第86頁/共149頁（八）Rh系統(tǒng)檢測的臨床意義（1）溶血性輸血反應：Rh（—）者再次接受Rh

（+）血液——血管外溶血（2）新生兒Rh溶血病：母嬰Rh血型不合。第87頁/共149頁第88頁/共149頁（九）其他血型系統(tǒng)檢測（1）白細胞抗原系統(tǒng)紅細胞血型抗原白細胞特有抗原與其它組織共有抗原

HLA：humanleukocyteantigen第89頁/共149頁（2）血小板抗原和抗體血小板非特異抗原：ABO、Nn、P、Ii、HLA等血小板特異性抗原：HPA-1、HPA-2、HPA-3、

HPA-4和HPA-5

血小板同種抗原：由輸血、輸血小板或妊娠等同種免疫反應產(chǎn)生。血小板自身抗體：PAIgG、PAIgM、PAIgA等（3）血清蛋白抗原：

Ig、HP、Tf、血清酶、清蛋白等均有抗原差型，具有特異抗原。Ig與輸血反應有關。第90頁/共149頁第六章臨床免疫學檢查一、體液免疫檢查和細胞免疫檢查檢查分子：Ag、Ab、Ig，C等檢查細胞：免疫細胞（T、B、NK、Mφ、LAK、

TIL）第91頁/共149頁二、臨床常用的免疫學檢查（一）免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）檢測（二）MProtein（三）ComplementC（四）淋巴細胞表面標志物和淋巴細胞功能檢測（五）病毒性肝炎血清標志物檢查（六）感染免疫檢查（七）自身抗體檢查（八）腫瘤標志物檢查第92頁/共149頁一、概述免疫學:自身防御識己排異發(fā)展簡史:

免疫學的經(jīng)驗時期（12世紀—16世紀人痘苗預防天花）經(jīng)典免疫學時期（18世紀末至20世紀中，實驗時期）牛痘苗（1798）減毒疫苗（1880）抗毒素（1888）補體（1894）血清學方法（1896）免疫化學（1908）抗體生成理論（1930）近代免疫學時期（20世紀中至60年代）細胞免疫（1935）免疫耐受（1945）克隆選擇學說（1955）免疫技術發(fā)展（1959）現(xiàn)代免疫學時期（20世紀60年代––）第93頁/共149頁4.60年代的重要變動:(1)T和B細菌亞群概念

(2)免疫球蛋白分類

70年代的重要變動:(1)免疫應答細胞(T,B,Mф)(2)T細胞亞群的發(fā)現(xiàn)

(3)免疫網(wǎng)絡學說的提出

(4)單克隆抗體生成

80年代的重要變動:(1)抗體多樣性遺傳控制(Ig基因結構)(2)T細胞抗原受體的證明(TCR)(3)細胞因(LF,MF,IL,IFN,TNF,CSF,TGF)(4)免疫學技術發(fā)展2

〇細胞融合技術(McAb)

〇T細胞克隆技術的建立〇轉基因技術的應用〇分子雜交技術的應用第94頁/共149頁免疫學與醫(yī)學

免疫學：滲透，分支，交叉〇免疫病理學〇免疫遺傳學〇免疫藥理學〇免疫毒理學〇神經(jīng)免疫學〇移植免疫學〇生殖免疫學

〇臨床免疫學第95頁/共149頁臨床免疫學1.定義:應用免疫學的理論和技術研究疾病的發(fā)病機制,

診斷和治療。2.作用:生長、遺傳、衰老、感染、腫瘤以及自身免疫病等等。第96頁/共149頁二、臨床免疫檢測的任務和范圍

〇臨床免疫檢測是利用抗原抗體反應檢測標本中微量物質的方法〇Ag或Ab都可測定（定性或定量）第97頁/共149頁表1臨床免疫檢測的任務和范圍第98頁/共149頁三、免疫檢測技術的發(fā)展血清學試驗傳統(tǒng)免疫測定三大標記技術免疫微球技術免疫滲濾和層析免疫全自動化檢測第99頁/共149頁四、臨床免疫檢測的熱點熱點：研究較多，價值較高（一）、自身免疫病的免疫檢測（二）、腫瘤標志物檢測（三）、Th1、Th2檢測

(四)、全身性炎癥反應免疫標志物（五）、病原體和新傳染的抗原抗體檢測（六）、細胞凋亡（apoptosis）檢測（七）、肌紅蛋白、肌鈣蛋白與心肌缺血性損傷（八）、淋巴細胞免疫表型分類第100頁/共149頁三、體液免疫檢測第101頁/共149頁（續(xù)）第102頁/共149頁四、淋巴細胞亞群分型檢測（一）T淋巴細胞分解

CD3+61%~85%CD4+28%~58%CD8+19%~48%CD4+/CD8+1.66±0.33第103頁/共149頁表2T細胞亞群功能分類第104頁/共149頁（二）T細胞亞群變化的意義1、CD4+↑：RA活動期

CD4+↓：某些病毒感染：AIV、CMV；嚴重創(chuàng)傷、全身麻醉、大手術、免疫抑制2、CD8+↓：RA、重癥肌無力、Ⅰ型糖尿病、膜型腎小球腎炎

CD8+↑：傳單、CMV、慢肝第105頁/共149頁3、CD4+/CD8+↓：HIV、瘤型麻風病、惡性腫瘤、感染

CD4+/CD8+↑：RA活動初期、多發(fā)性硬化癥、

SLE、重癥肌無力等4、CD3+↑：甲亢、淋巴細胞性甲狀腺炎、重癥肌無力、移排等

CD3+↓：免疫缺陷病、惡性腫瘤、SLE、某些感染、化療、放療等。第106頁/共149頁（三）B細胞表面標志物檢測1、SmIg測定方法：熒光顯微鏡檢測第107頁/共149頁參考值：SmIg+：16~28%（21%）

SmIgG+：4~13%（7%）

SmIgM+：7~13%（2.2%）

SmIgA+：1~4%（2.2%）

SmIgD+：5~8%（6.2%）

SmIgE+：0~1.5%（6.2%）意義：①SmIg+↑：B細胞惡性增殖、白血?。?、毛白）、巨球蛋白血癥②SmIg+↓：體液免疫缺陷第108頁/共149頁2、B細胞CD抗原測定：

CD19、CD20、CD21、CD22測定方法：免疫熒光法或FCM

參考值：CD19+：11.74%±3.73%

意義：CD19+↑：B系惡性腫瘤；

CD19+↓：體液免疫缺陷

CD20+：B細胞激活后丟失

CD21+：Cd3R/EBRCD22+：存在于成熟B細胞第109頁/共149頁五、淋巴細胞功能檢測（一）淋巴細胞轉化試驗

LTT：有絲分裂原刺激轉化

SLTT：特異性抗原刺激轉化參考值：60.1%±7.6%（T）第110頁/共149頁（二）混合淋巴細胞反應（MLR）1、雙向反應：兩個無關個體細胞混合培養(yǎng)2、單向反應：一方抑制處理后混合培養(yǎng)3、意義：細胞免疫功能/移植排斥反應預測第111頁/共149頁（三）NK細胞活性測定

（四）中性粒細胞功能檢測

第112頁/共149頁六、細胞因子檢測1、CK：LK、MK、其他CK2、CK-R3、常用檢測的CK：

IL-2、IL-4、IL-6、IL-8；TNF-2、

IFN、GCSF、EPO；第113頁/共149頁4、方法：（1）RIA或ELISA（2） DNA分析法（3） 分子雜交法（4） PCR：測mRNA表達（5） 定量PCR：TGF、IL-2、IL-1、TNF等第114頁/共149頁七、病毒性肝炎血清標志物檢查1、病毒性肝炎病原體特征第115頁/共149頁第116頁/共149頁2、肝炎病毒標志物

5種肝炎病毒的標志物第117頁/共149頁3、乙型肝炎五次血清標志物

檢測的意義第118頁/共149頁（1）乙肝標志物的變化特征第119頁/共149頁（2）乙肝標志物單項陽性的意義HBsAg（+）：表示體內有HBV存在，有傳染性。HBsAb（+）：中和性抗體，曾感染HBV，主動或被動免疫。HBeAg（+）：病毒復制、傳染性強。HBeAb（+）：AB中和抗體，仍有傳染性，

HbeAg轉陰。HBcAb（+）：非中和抗體，“窗口”期，既往感染。第120頁/共149頁（3）“二對半”檢測的意義表6-3HBV五項血清標志物聯(lián)合檢測的臨床意義第121頁/共149頁（一）、自身免疫病的免疫檢測自身免疫與自身免疫病的概念有顯著區(qū)別。健康個體自身耐受自身免疫生理自穩(wěn)自身免疫異常自身免疫病第122頁/共149頁自身免疫與自身免疫病

的關系（三種）自身免疫引起疾病疾病引起自身免疫某些因素同時引起前兩者第123頁/共149頁自身免疫病的免疫檢測項目1、抗核抗體（ANA）：細胞核成分為靶抗原非特異性抗DNA抗體：抗dsDNA抗體：70%SLE陽性，與病情正相關抗ssDNA抗體：特異性差，見于多種疾病抗Z-DNA抗體：臨床意義不明第124頁/共149頁抗ENA抗體：DNA以外的針對核內可提取性核抗原的抗體〇15種以上抗原及其相應抗體〇抗Smith抗體：對SLE特異性高，陽性30～40%〇抗Scl-70抗體：系統(tǒng)性硬化癥（PSS），特異性抗體；〇抗PM-1抗體：多發(fā)性肌炎（PM），皮肌炎（DM），〇抗ss-A抗體和抗ss-B抗體：干燥綜合癥（SS），SLERA〇抗RNP抗體：混合結締組織?。?00%+）—MCTD。〇抗組蛋白抗體：多種自身免疫病，藥物性狼瘡。第125頁/共149頁2、其它自身抗體抗胞漿內線粒體抗體抗核糖體抗體抗溶酶體抗體抗紅細胞抗體抗血小板抗體抗淋巴細胞抗體抗受體抗體抗平滑肌抗體抗橫紋肌抗體第126頁/共149頁3、循環(huán)免疫復合物（CIC）CIC-抗原杭體復合物，易沉積于皮膚，腎臟結節(jié)性多動脈炎（+）SLE（+）AS（+）局部免疫性炎癥反應第127頁/共149頁（二）腫瘤標志物檢測TM種類:30多種免疫檢測項目作用:輔助診斷、療效現(xiàn)察、預后判斷端粒酶:一種新的TM第128頁/共149頁表3常見腫瘤標志物診斷價值及應用(一)第129頁/共149頁表3常見腫瘤標志物診斷價值及應用(二)注：★首選指標☆第一補充指標◎第二補充指標第130頁/共149頁TM檢測的注意事項