第一節(jié)概述抗生素的定義微生物在代謝中產(chǎn)生的具有抑制它種微生物生長(zhǎng)活動(dòng)，甚至殺滅它種微生物的化學(xué)物質(zhì)；在低微濃度下即可對(duì)某種生物的生命活性有特異抑制作用的微生物次級(jí)代謝產(chǎn)物及其衍生物；在低微濃度下即可對(duì)某些生物的生命活動(dòng)有特異抑制作用的化學(xué)物質(zhì)的總稱。第一頁(yè)，共131頁(yè)?？股氐膩?lái)源1.生物合成（發(fā)酵）2.化學(xué)合成或半合成第二頁(yè)，共131頁(yè)?？股刭|(zhì)量的復(fù)雜性

產(chǎn)品穩(wěn)定性差分子結(jié)構(gòu)大多不穩(wěn)定，降解后療效下降、失效或增加毒副作用發(fā)酵過(guò)程不易控制易受污染生產(chǎn)工藝復(fù)雜第三頁(yè)，共131頁(yè)。發(fā)酵液中雜質(zhì)無(wú)機(jī)鹽、脂肪、各種蛋白質(zhì)、各種降解產(chǎn)物、色素、熱原、毒性物質(zhì)增加異常毒性、細(xì)菌內(nèi)毒素、熱原、降壓物質(zhì)、無(wú)菌[檢查]第四頁(yè)，共131頁(yè)。含量測(cè)定方法（一）微生物檢定法測(cè)定抗生素抑菌或殺菌的能力管碟法濁度法第五頁(yè)，共131頁(yè)。含量測(cè)定方法（一）微生物檢定法優(yōu)點(diǎn)1、與臨床效果一致2、靈敏度高3、干擾物質(zhì)少缺點(diǎn)1、操作繁瑣2、培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)2、測(cè)定誤差大第六頁(yè)，共131頁(yè)。（二）化學(xué)及物理化學(xué)方法以理化方法測(cè)定主藥含量?jī)?yōu)點(diǎn)1.準(zhǔn)確度高2.簡(jiǎn)單、快速1.不一定代表生物效價(jià)缺點(diǎn)2.易受雜質(zhì)干擾第七頁(yè)，共131頁(yè)。分類（按結(jié)構(gòu)與性質(zhì)）：β–內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類、多烯大環(huán)類、多肽類、苯烴胺類、蒽環(huán)類、其他抗生素類第八頁(yè)，共131頁(yè)。第二節(jié)β–內(nèi)酰胺類抗生素

青霉素族ABA：β–內(nèi)酰胺環(huán)B：氫化噻唑環(huán)***1234第九頁(yè)，共131頁(yè)。頭孢菌素族A：β–內(nèi)酰胺環(huán)B：氫化噻嗪環(huán)AB**23456178第十頁(yè)，共131頁(yè)。青霉素（青霉素G、芐青霉素）第十一頁(yè)，共131頁(yè)。氨芐西林

（氨芐青霉素）第十二頁(yè)，共131頁(yè)。阿莫西林

（羥氨芐青霉素）第十三頁(yè)，共131頁(yè)。普魯卡因青霉素第十四頁(yè)，共131頁(yè)。頭孢氨芐第十五頁(yè)，共131頁(yè)。頭孢拉定第十六頁(yè)，共131頁(yè)。頭孢羥氨芐第十七頁(yè)，共131頁(yè)。頭孢噻吩鈉第十八頁(yè)，共131頁(yè)。酸性結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、Na與堿金屬(Na+、K+)成鹽

（一）羧基易溶于水

酸白色沉淀第十九頁(yè)，共131頁(yè)。與有機(jī)堿(普魯卡因)成鹽難溶于水普魯卡因青霉素第二十頁(yè)，共131頁(yè)。（二）手性C(5%頭孢唑啉鈉溶液–18～–24°)頭孢菌素類C6C7青霉素類C3C5C6

旋光性﹡﹡﹡﹡﹡第二十一頁(yè)，共131頁(yè)。

（三）共軛體系頭孢菌素類母核有共軛體系

青霉素類母核無(wú)明顯UV多數(shù)有苯環(huán)取代基

UV第二十二頁(yè)，共131頁(yè)。青霉素鈉UV7-20第二十三頁(yè)，共131頁(yè)。第二十四頁(yè)，共131頁(yè)。（四）β–內(nèi)酰胺環(huán)水溶液不穩(wěn)定干燥純凈穩(wěn)定不穩(wěn)定性因素四元環(huán)張力大酰胺鍵易水解第二十五頁(yè)，共131頁(yè)。（某些金屬離子）（溫度）某些氧化劑第二十六頁(yè)，共131頁(yè)。例青霉素的降解反應(yīng)青霉素青霉噻唑酸H2O/OHˉ青霉素酶青霉酸H2OpH2100℃α–青霉噻唑酰基羥胺酸NH2OH青霉烯酸pH4青霉胺CO2青霉醛HgCl2第二十七頁(yè)，共131頁(yè)。(頭孢噻吩鈉水溶液25℃24h失活8%)第二十八頁(yè)，共131頁(yè)。二、K+、Na+反應(yīng)（一）鑒別焰色→鮮黃色+醋酸氧鈾鋅→↓黃

Na+

焰色→紫色+0.1%四苯硼鈉+Ac→↓白

K+第二十九頁(yè)，共131頁(yè)。（二）呈色反應(yīng)1.羥肟酸鐵反應(yīng)β-內(nèi)酰胺類NaOH呈色Fe3+/3H+第三十頁(yè)，共131頁(yè)。H+Fe3+/3（紅、棕、褐）哌拉西林鈉、磺芐西林鈉、頭孢哌酮第三十一頁(yè)，共131頁(yè)。2.茚三酮反應(yīng)△α-氨基第三十二頁(yè)，共131頁(yè)。α-氨基、伯胺某些羥基胺類酮式烯醇式茚三酮茚三酮縮合藍(lán)紫色第三十三頁(yè)，共131頁(yè)。3.雙縮脲反應(yīng)β-內(nèi)酰胺類（開(kāi)環(huán)分解）似肽鍵第三十四頁(yè)，共131頁(yè)。藍(lán)紫色第三十五頁(yè)，共131頁(yè)。4.與重氮苯磺酸反應(yīng)（偶合）酚羥基頭孢哌酮第三十六頁(yè)，共131頁(yè)。（偶合）第三十七頁(yè)，共131頁(yè)。第三十八頁(yè)，共131頁(yè)。（三）沉淀反應(yīng)1.遇酸→↓在過(guò)量HCl或有機(jī)溶劑中溶解第三十九頁(yè)，共131頁(yè)。2.有機(jī)胺鹽反應(yīng)重氮化-偶合反應(yīng)重氮化-偶合反應(yīng)芳伯氨基第四十頁(yè)，共131頁(yè)。普魯卡因普魯卡因青霉素第四十一頁(yè)，共131頁(yè)。第四十二頁(yè)，共131頁(yè)。光譜法（四）1、UV法樣品頭孢氨芐λmax=262nm青霉素V鈉A280nm/A264nm=1.30～1.50第四十三頁(yè)，共131頁(yè)。2、IR法β-內(nèi)酰胺環(huán)酰胺第四十四頁(yè)，共131頁(yè)。3、NMR法利用不同結(jié)構(gòu)的原子核在D2O中有不同的NMR光譜進(jìn)行鑒別JP以吸收峰頻率對(duì)峰強(qiáng)度進(jìn)行作圖主要研究原子核的磁化性質(zhì)及其在外磁場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng)規(guī)律第四十五頁(yè)，共131頁(yè)。色譜法（五）1、TLC法對(duì)照品對(duì)照法2、HPLC法第四十六頁(yè)，共131頁(yè)。三、特殊雜質(zhì)的檢查（一）聚合物（二）有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體（三）吸光度（四）有機(jī)溶劑（五）結(jié)晶性第四十七頁(yè)，共131頁(yè)。三、特殊雜質(zhì)的檢查（一）聚合物

檢查藥物：青霉素鉀（鈉）、阿莫西林、頭孢拉定、頭孢噻肟鈉等檢查方法：分子排阻色譜第四十八頁(yè)，共131頁(yè)。三、特殊雜質(zhì)的檢查（二）有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體檢查方法：色譜法檢查藥物：多數(shù)規(guī)定有關(guān)物質(zhì)檢查頭孢氨芐：7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸；α-苯甘氨酸氨芐西林：N,N-二甲基苯胺頭孢拉定：頭孢氨芐芐星青霉素：N,N’-二芐基乙二胺第四十九頁(yè)，共131頁(yè)。三、特殊雜質(zhì)的檢查（三）吸光度檢查目的：控制雜質(zhì)含量檢查藥物：青霉素鈉（鉀）檢查方法：1.80mg/ml水溶液；A280nm<0.10A264nm=0.80~0.88第五十頁(yè)，共131頁(yè)。三、特殊雜質(zhì)的檢查（四）有機(jī)溶劑氨芐西林鈉：二氯甲烷（GC）頭孢哌酮鈉：丙酮（GC）頭孢硫脒：二氯甲烷，乙醇，丙酮（GC）頭孢他啶：吡啶（HPLC）第五十一頁(yè)，共131頁(yè)。三、特殊雜質(zhì)的檢查（五）結(jié)晶性第一法：偏光顯微鏡法第二法：X射線粉末衍射法第五十二頁(yè)，共131頁(yè)。四、含量測(cè)定（一）可見(jiàn)-紫外分光光度法*（二）HPLC法第五十三頁(yè)，共131頁(yè)。（水解）可見(jiàn)-紫外分光光度法（一）1、酸水解法（銅鹽法）（1）原理穩(wěn)定劑JP青霉素族第五十四頁(yè)，共131頁(yè)。第五十五頁(yè)，共131頁(yè)。（2）方法△（3）特點(diǎn)實(shí)驗(yàn)條件隨各藥物穩(wěn)定性不同而定標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照法第五十六頁(yè)，共131頁(yè)。（4）計(jì)算第五十七頁(yè)，共131頁(yè)。2、羥肟酸比色法USPJPFe3+/3H+紅色β-內(nèi)酰胺類NaOH第五十八頁(yè)，共131頁(yè)。HPLC法*（二）內(nèi)標(biāo)法＋校正因子外標(biāo)法特點(diǎn)快速、高效、靈敏專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好

一法多用（鑒別、檢查、含測(cè)）第五十九頁(yè)，共131頁(yè)。哌拉西寧原料藥含量測(cè)定色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇–0.2mol/L磷酸二氫鈉溶液–10％氫氧化四乙基銨溶液–水（400︰50︰3︰547）用磷酸調(diào)節(jié)pH值至5.5為流動(dòng)相。檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm。第六十頁(yè)，共131頁(yè)。第三節(jié)氨基糖苷類抗生素鏈霉素雙氫鏈霉素新霉素卡那霉素慶大霉素巴龍霉素第六十一頁(yè)，共131頁(yè)。鏈霉素鏈霉胍+鏈霉糖+N-甲基-L-葡萄糖胺

苷元糖鏈霉雙糖胺第六十二頁(yè)，共131頁(yè)。鏈霉胍鏈霉糖N-甲基-L-葡萄糖胺第六十三頁(yè)，共131頁(yè)。鏈霉胍鏈霉糖N-甲基-L-葡萄糖胺第六十四頁(yè)，共131頁(yè)。慶大霉素

糖苷元絳紅糖胺+脫氧鏈霉胺+加洛糖胺

糖第六十五頁(yè)，共131頁(yè)。絳紅糖胺紫素胺2-脫氧鏈霉胺加洛糖胺N-甲基-3-去氧-4-甲基戊糖胺第六十六頁(yè)，共131頁(yè)。絳紅糖胺紫素胺2-脫氧鏈霉胺加洛糖胺N-甲基-3-去氧-4-甲基戊糖胺第六十七頁(yè)，共131頁(yè)。慶大霉素C復(fù)合物慶大霉素C1R=HR1、R2=CH3慶大霉素C2R=R2=H

R1=CH3慶大霉素C1aR、R1、R2=H慶大霉素C2aR=CH3R1=R2=H

慶大霉素C2bR=R1=HR2=CH3第六十八頁(yè)，共131頁(yè)。一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)多與硫酸成鹽鏈霉素3個(gè)慶大霉素5個(gè)堿性中心堿性（一）水溶性溶解性（二）第六十九頁(yè)，共131頁(yè)。鏈霉素pH5～7.5慶大霉素pH2～12穩(wěn)定UV（三）穩(wěn)定性（五）鏈霉素水解產(chǎn)物反應(yīng)（六）鏈霉素230nm旋光性（四）氨基糖第七十頁(yè)，共131頁(yè)。坂口反應(yīng)N-甲基葡萄糖胺反應(yīng)麥芽酚反應(yīng)第七十一頁(yè)，共131頁(yè)。二、鑒別茚三酮反應(yīng)（一）△氨基糖苷結(jié)構(gòu)第七十二頁(yè)，共131頁(yè)。Molisch試驗(yàn)（二）五碳糖或六碳糖結(jié)構(gòu)α-萘酚蒽酮紅紫色藍(lán)紫色第七十三頁(yè)，共131頁(yè)。紅紫色第七十四頁(yè)，共131頁(yè)。N-甲基葡萄糖胺反應(yīng)（三）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物對(duì)二甲氨基苯甲醛H+櫻桃紅色（Elson-Morgan反應(yīng)）第七十五頁(yè)，共131頁(yè)。(縮合)第七十六頁(yè)，共131頁(yè)。櫻桃紅色對(duì)二甲氨基苯甲醛H+第七十七頁(yè)，共131頁(yè)。麥芽酚反應(yīng)（四）

鏈霉糖特有反應(yīng)H+分子重排第七十八頁(yè)，共131頁(yè)。紫紅麥芽酚第七十九頁(yè)，共131頁(yè)。鏈霉胍特有反應(yīng)（或α-萘酚）8-羥基喹啉坂口反應(yīng)（五）α-萘酚第八十頁(yè)，共131頁(yè)。R-N=C=N-NH2第八十一頁(yè)，共131頁(yè)。（六）硫酸鹽反應(yīng)H+UV法（七）IR法（八）慶大霉素?zé)oUV吸收TLC法（九）第八十二頁(yè)，共131頁(yè)。三、檢查（一）鏈霉素雜質(zhì)鏈霉素B（甘露糖鏈霉素）雜質(zhì)來(lái)源：反應(yīng)中間體檢查方法：TLC（對(duì)照品法）(EP)ChP2010檢查“有關(guān)物質(zhì)”：HPLC法第八十三頁(yè)，共131頁(yè)。對(duì)微生物的活性無(wú)明顯差異毒副作用和耐藥性不同發(fā)酵菌種不同工藝差別C組分比例不一致規(guī)定控制各組分的相對(duì)百分含量ChPUSPBPJP慶大霉素C組分的測(cè)定（二）第八十四頁(yè)，共131頁(yè)。λmax=330nm1.衍生化（USP）第八十五頁(yè)，共131頁(yè)。1-烷基硫代-2-烷基異吲哚衍生物第八十六頁(yè)，共131頁(yè)。RP－HPLC方法2.規(guī)定C125~50%C1a15~40%C2a+C220~50%計(jì)算3.峰面積歸一化法第八十七頁(yè)，共131頁(yè)。*4.蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ChP2010）5.電化學(xué)檢測(cè)器（BP）第八十八頁(yè)，共131頁(yè)。三、含量測(cè)定鏈霉素、慶大霉素微生物檢定法本法系利用抗生素在瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)的擴(kuò)散作用量反應(yīng)平行線原理的設(shè)計(jì)，比較標(biāo)準(zhǔn)品與供試品兩者對(duì)接種的試驗(yàn)菌產(chǎn)生抑菌圈的大小，以測(cè)定供試品效價(jià)的一種方法。第八十九頁(yè)，共131頁(yè)。第四節(jié)四環(huán)素類抗生素ABCD第九十頁(yè)，共131頁(yè)。123456789101112第九十一頁(yè)，共131頁(yè)。第九十二頁(yè)，共131頁(yè)。四環(huán)素（TC）tetracycline765第九十三頁(yè)，共131頁(yè)。金霉素(CTC)

chlortetracycline氯四環(huán)素765第九十四頁(yè)，共131頁(yè)。土霉素(OTC)

oxytetracycline氧四環(huán)素765第九十五頁(yè)，共131頁(yè)。一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)兩性（一）1.與酸、堿均能成鹽2.強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中溶解度↑

酚羥基、烯醇型羥基弱酸性二甲胺基弱堿性第九十六頁(yè)，共131頁(yè)。吸濕性（二）多含結(jié)晶水與金屬離子生成有色配位化合物Ca2+Mg2+Fe3+Al3+

UV（三）與金屬離子絡(luò)合（四）第九十七頁(yè)，共131頁(yè)。第九十八頁(yè)，共131頁(yè)。不穩(wěn)定性（四）1.差向異構(gòu)化淡黃→黑藍(lán)色熒光第九十九頁(yè)，共131頁(yè)。差向四環(huán)素第一百頁(yè)，共131頁(yè)。（土霉素、多西環(huán)素不易差向異構(gòu)化）第一百零一頁(yè)，共131頁(yè)。2.降解反應(yīng)（1）酸性下降解λmax=445nmλmax=435nm橙黃色第一百零二頁(yè)，共131頁(yè)。脫水四環(huán)素第一百零三頁(yè)，共131頁(yè)?！玊CETCATCEATC＜＜第一百零四頁(yè)，共131頁(yè)。（2）堿性下降解（熒光）第一百零五頁(yè)，共131頁(yè)。二、鑒別試驗(yàn)H2SO4反應(yīng)（一）第一百零六頁(yè)，共131頁(yè)。FeCl3反應(yīng)（二）第一百零七頁(yè)，共131頁(yè)。熒光法（三）UV綠色熒光H+UV第一百零八頁(yè)，共131頁(yè)。三、檢查·4-差向四環(huán)素（ETC）·脫水四環(huán)素（ATC）·差向脫水四環(huán)素（EATC）·鹽酸金霉素（CTC）有關(guān)物質(zhì)（一）TLC法（1995版）HPLC法（2000、2005、2010版）標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照法鹽酸四環(huán)素第一百零九頁(yè)，共131頁(yè)。吸收度（二）第一百一十頁(yè)，共131頁(yè)。雜質(zhì)吸收度第一百一十一頁(yè)，共131頁(yè)。四、含量測(cè)定ChP、USPHPLC法（外標(biāo)法）系統(tǒng)適用性試驗(yàn)1.ODS柱（pH值適應(yīng)范圍大于8）2.預(yù)試溶液4-差向脫水四環(huán)素四環(huán)素3.RSD≤2.0%第一百一十二頁(yè)，共131頁(yè)。第五節(jié)抗生素類藥物中高分子雜質(zhì)的檢查高分子雜質(zhì)：分子量大于藥物本身的雜質(zhì)總稱。第一百一十三頁(yè)，共131頁(yè)。蛋白、多肽、多糖或抗生素與蛋白、多肽、多糖的結(jié)合物。主要來(lái)自于發(fā)酵工藝，致敏，如青霉噻唑蛋白、青霉噻唑多肽。

藥物的自身聚合物，來(lái)自于生產(chǎn)、貯存過(guò)程?？梢l(fā)過(guò)敏。

外源性雜質(zhì)內(nèi)源性雜質(zhì)第一百一十四頁(yè)，共131頁(yè)。練習(xí)與思考[A型題]

1、下列哪個(gè)藥物會(huì)發(fā)生羥肟酸鐵反應(yīng)A.青霉素B.慶大霉素C.土霉素D.鏈霉素E.維生素C第一百一十五頁(yè)，共131頁(yè)。練習(xí)與思考[A型題]

2、中國(guó)藥典(2010年版)測(cè)定頭孢菌素類藥物的含量時(shí)，多數(shù)采用的方法是A.微生物法B.碘量法C.汞量法D.正相高效液相色譜法E.反相高效液相色譜法第一百一十六頁(yè)，共131頁(yè)。練習(xí)與思考[A型題]

3、能發(fā)生重氮化-偶合反應(yīng)的抗生素類藥物是A.青霉素B.慶大霉素C.芐星青霉素D.鹽酸四環(huán)素E.普魯卡因青霉素第一百一十七頁(yè)，共131頁(yè)。練習(xí)與思考[A型題]

4、四環(huán)素在酸性條件下的降解產(chǎn)物是A.差向四環(huán)素B.脫水四環(huán)素C.異四環(huán)素D.去甲四環(huán)素E.去甲氧四環(huán)素第一百一十八頁(yè)，共131頁(yè)。練習(xí)與思考[A型題]

5、慶大霉素和鏈霉素可以發(fā)生Molisch反應(yīng)，因?yàn)樗鼈兎肿咏Y(jié)構(gòu)中含有A.羰基B.五碳糖或六碳糖C.羧基D.羥基E.氨基第一百一十九頁(yè)，共131頁(yè)。練習(xí)與思考[A型題]

6、麥芽酚與硫酸鐵銨作用顯示的顏色是A.紫紅色B.黃色C.橙紅色D.綠色E.藍(lán)紫色第一百二十頁(yè)，共131頁(yè)。練習(xí)與思考[A型題]

7、鹽酸四環(huán)素中有關(guān)物質(zhì)的檢查在《中國(guó)藥典2010版》中采用的方法是A.GC-MSB.IRC.HPLCD.UVE.TLC第一百二十一頁(yè)，共131頁(yè)。練習(xí)與思考[A型題]

8、能區(qū)別鏈霉素和慶大霉素，為鏈霉素特有的鑒別反應(yīng)是A.茚三酮反應(yīng)B.三氯化銻反應(yīng)C.坂口反應(yīng)D.硫色素反應(yīng)E.N-甲基葡萄糖胺反應(yīng)第一百二十二頁(yè)，共131頁(yè)。練習(xí)與思考[A型題]

9、青霉素在堿性或青霉素酶作用下發(fā)生降解反應(yīng)的產(chǎn)物是A.青霉烯酸B.青霉醛C.青霉酸D.青霉噻唑酸E.青霉胺第一百二十三頁(yè)，共131頁(yè)。練習(xí)與思考[A型題]

10、四環(huán)素在堿性溶液中發(fā)生降解的產(chǎn)物是A.異四環(huán)素B.青霉烯酸C.差向脫水四環(huán)素D.脫水四環(huán)素E.差向四環(huán)素第一百二十四頁(yè)，共131頁(yè)。練習(xí)與思考[A型題]

11、可發(fā)生N-甲基葡萄糖胺反應(yīng)的藥物是A.硫酸奎寧B.硫酸阿托品C