轉(zhuǎn)錄第二部分詳解演示文稿現(xiàn)在是1頁\一共有42頁\編輯于星期日優(yōu)選轉(zhuǎn)錄第二部分現(xiàn)在是2頁\一共有42頁\編輯于星期日增強(qiáng)子和沉默子增強(qiáng)子（enhancer）：是一種能夠大幅度增強(qiáng)基因轉(zhuǎn)錄效率的順式作用元件。沉默子（silencer）：與增強(qiáng)子相反，是一種阻止基因表達(dá)的順式作用元件。作用特性：與啟動子不同，其作用與距離、方向和位置均無關(guān)；對臨近的基因作用最強(qiáng)；某些增強(qiáng)子或沉默子具有組織特異性?，F(xiàn)在是3頁\一共有42頁\編輯于星期日增強(qiáng)子和沉默子的作用特性現(xiàn)在是4頁\一共有42頁\編輯于星期日增強(qiáng)子作用的環(huán)出模型

現(xiàn)在是5頁\一共有42頁\編輯于星期日（三）轉(zhuǎn)錄因子（transcriptfactor,TF）反式作用因子：是能直接或間接地識別或結(jié)合各種順式作用元件，參與調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄的蛋白質(zhì)。順式作用元件必須由反式作用因子與之結(jié)合后才能對轉(zhuǎn)錄起調(diào)控作用。轉(zhuǎn)錄因子：真核RNA聚合酶不能識別DNA上的啟動子，識別這些啟動子序列的反式作用因子稱為轉(zhuǎn)錄因子。轉(zhuǎn)錄因子在轉(zhuǎn)錄中主要有兩大基本功能：一是作為裝配因子或定向因子識別和結(jié)合核心啟動子，招募RNA聚合酶正確地與啟動子結(jié)合；其次是調(diào)節(jié)RNA聚合酶的活性現(xiàn)在是6頁\一共有42頁\編輯于星期日參與RNA-polⅡ轉(zhuǎn)錄的TFⅡ

TFⅡH57（a）（）TFⅡE與RNA-polⅡ結(jié)合，解螺旋酶30，74TFⅡF促進(jìn)RNA-polⅡ結(jié)合及作為其他因子結(jié)合的橋梁33TFⅡB穩(wěn)定TFⅡD與啟動子的結(jié)合12，19，35TFⅡA輔助TBP-DNA結(jié)合TAF**結(jié)合TATA盒TBP*38TFⅡD功能亞基組成，分子量(kD)轉(zhuǎn)錄因子ATPase,解螺旋酶和CTD激酶活性促進(jìn)啟動子的解鏈和清空TFⅡH與RNA-polⅡ結(jié)合，協(xié)助招募TFⅡH，激活TFⅡH，促進(jìn)啟動子解鏈57（a）TFⅡE30，74TFⅡF促進(jìn)RNA-pol結(jié)合及作為其他因子結(jié)合的橋梁33TFⅡB12，19，35TFⅡA輔助-DNA結(jié)合TAF**結(jié)合TATA盒TBP*38TFⅡD功能亞基組成，分子量(kD)轉(zhuǎn)錄因子b34現(xiàn)在是7頁\一共有42頁\編輯于星期日（四）真核生物RNA聚合酶II所負(fù)責(zé)的基因轉(zhuǎn)錄過程1.轉(zhuǎn)錄起始真核生物的轉(zhuǎn)錄起始上游區(qū)段比原核生物多樣化，轉(zhuǎn)錄起始時，RNA-pol不直接結(jié)合模板，其起始過程比原核生物復(fù)雜。轉(zhuǎn)錄起始前復(fù)合物(pre-initiationcomplex,PIC)：真核生物RNA-pol不與DNA分子直接結(jié)合，而需依靠眾多的轉(zhuǎn)錄因子?，F(xiàn)在是8頁\一共有42頁\編輯于星期日POL-ⅡTFⅡFⅡAⅡB由RNA-PolⅡ催化轉(zhuǎn)錄的PICPOL-ⅡTFⅡFⅡHⅡETBPTAFTFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA復(fù)合物TATAⅡAⅡBTBPTAFTATAⅡHⅡECTD-PPIC組裝完成，TFⅡH使CTD磷酸化現(xiàn)在是9頁\一共有42頁\編輯于星期日POLIIIIFCTD轉(zhuǎn)錄預(yù)起始復(fù)合物的形成INRTATAUPE-20+1IIDIIAIIBHJE現(xiàn)在是10頁\一共有42頁\編輯于星期日轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成——CTD的磷酸化INRTATAUPE-20+1IIDIIAIIBHJEPOLIIIIFCTDPPPPATP現(xiàn)在是11頁\一共有42頁\編輯于星期日啟動子清空INRTATAUPE-20+1IIDIIAIIBHJEPOLIICTDPPPPNTPsmRNA前體轉(zhuǎn)錄延伸因子現(xiàn)在是12頁\一共有42頁\編輯于星期日模板理論(piecingtheory)一個真核生物基因的轉(zhuǎn)錄需要3至5個轉(zhuǎn)錄因子。轉(zhuǎn)錄因子之間互相結(jié)合，生成有活性，有專一性的復(fù)合物，再與RNA聚合酶搭配而有針對性地結(jié)合、轉(zhuǎn)錄相應(yīng)的基因?，F(xiàn)在是13頁\一共有42頁\編輯于星期日（二）轉(zhuǎn)錄延長轉(zhuǎn)錄因子TFⅡS參與延伸真核生物轉(zhuǎn)錄延長過程與原核生物大致相似，但因有核膜相隔，沒有轉(zhuǎn)錄與翻譯同步的現(xiàn)象。RNA-pol前移處處都遇上核小體。轉(zhuǎn)錄延長過程中可以觀察到核小體移位和解聚現(xiàn)象。現(xiàn)在是14頁\一共有42頁\編輯于星期日RNA-PolRNA-PolRNA-Pol核小體轉(zhuǎn)錄延長中的核小體移位轉(zhuǎn)錄方向現(xiàn)在是15頁\一共有42頁\編輯于星期日5------AAUAAA-5------AAUAAA--核酸酶-GUGUGUGRNA-polAATAAAGTGTGTG轉(zhuǎn)錄終止的修飾點(diǎn)55333加尾AAAAAAA······3mRNA——和轉(zhuǎn)錄后修飾密切相關(guān)。（三）轉(zhuǎn)錄終止-3’末端的產(chǎn)生和多聚腺苷酸化現(xiàn)在是16頁\一共有42頁\編輯于星期日轉(zhuǎn)錄后加工Post-transcriptionalProcessing第三節(jié)現(xiàn)在是17頁\一共有42頁\編輯于星期日一、真核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄后加工（一）首、尾的修飾5端形成帽子結(jié)構(gòu)(m7GpppGp—)3端加上多聚腺苷酸尾巴(polyAtail)現(xiàn)在是18頁\一共有42頁\編輯于星期日帽子結(jié)構(gòu)現(xiàn)在是19頁\一共有42頁\編輯于星期日5’端加帽：現(xiàn)在是20頁\一共有42頁\編輯于星期日5端帽子結(jié)構(gòu)的功能提高mRNA的穩(wěn)定性參與識別起始密碼子的過程，提高mRNA的可翻譯性有助于mRNA通過核孔從細(xì)胞核運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞質(zhì)提高剪接反應(yīng)的效率?，F(xiàn)在是21頁\一共有42頁\編輯于星期日變性與成熟的mRNA雜交；在電鏡下觀察DNA模板鏈成熟的mRNA（二）mRNA的剪接R-環(huán)技術(shù)發(fā)現(xiàn)基因斷裂現(xiàn)象現(xiàn)在是22頁\一共有42頁\編輯于星期日雞卵清蛋白成熟mRNA與DNA雜交電鏡圖DNAmRNA目錄R-環(huán)技術(shù)發(fā)現(xiàn)基因斷裂現(xiàn)象現(xiàn)在是23頁\一共有42頁\編輯于星期日真核生物結(jié)構(gòu)基因，由若干個編碼區(qū)和非編碼區(qū)互相間隔開但又連續(xù)鑲嵌而成，去除非編碼區(qū)再連接后，可翻譯出由連續(xù)氨基酸組成的完整蛋白質(zhì)，這些基因稱為斷裂基因。1.斷裂基因(splitegene)CABD編碼區(qū)A、B、C、D非編碼區(qū)現(xiàn)在是24頁\一共有42頁\編輯于星期日2.外顯子(exon)和內(nèi)含子(intron)外顯子在斷裂基因及其初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物上出現(xiàn)，并表達(dá)為成熟RNA的核酸序列，也就是基因中編碼氨基酸的序列。內(nèi)含子隔斷基因的線性表達(dá)而在剪接過程中被除去的核酸序列，也就是基因中不編碼氨基酸的序列?，F(xiàn)在是25頁\一共有42頁\編輯于星期日雞卵清蛋白基因hnRNA首、尾修飾hnRNA剪接成熟的mRNA雞卵清蛋白基因及其轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后修飾現(xiàn)在是26頁\一共有42頁\編輯于星期日3.mRNA的剪接（RNAsplicing）mRNA的剪接：除去hnRNA中的內(nèi)含子，并將相鄰的外顯子連接起來，形成成熟的mRNA。snRNP與hnRNA結(jié)合成為剪接體（splicesome）核內(nèi)的蛋白質(zhì)小分子核糖核酸蛋白體（snRNP發(fā)音為snurps

）snRNA參與剪接的主要有：U1-snRNP、U2-snRNP、U4-snRNP、U5-snRNP和U6-snRNP?，F(xiàn)在是27頁\一共有42頁\編輯于星期日①剪接體組裝過程剪接供體位點(diǎn)剪接受體位點(diǎn)分支點(diǎn)現(xiàn)在是28頁\一共有42頁\編輯于星期日②③UACUACA-AGUGU4U5U6E1E2U1U2UACUACA-AGUGU6E1E2U1、U4無活性的剪接體U5激活的剪接體現(xiàn)在是29頁\一共有42頁\編輯于星期日剪接過程中的兩次轉(zhuǎn)酯反應(yīng)現(xiàn)在是30頁\一共有42頁\編輯于星期日二、真核細(xì)胞tRNA的轉(zhuǎn)錄后加工tRNA前體RNApolⅢTGGCNNAGTGCGGTTCGANNCCDNA目錄現(xiàn)在是31頁\一共有42頁\編輯于星期日RNAaseP（外切酶）、內(nèi)切酶目錄1.剪切和修剪：核糖核酸酶催化現(xiàn)在是32頁\一共有42頁\編輯于星期日tRNA核苷酸轉(zhuǎn)移酶、連接酶ATPADP目錄2.添加CCA現(xiàn)在是33頁\一共有42頁\編輯于星期日3.堿基修飾（2）還原反應(yīng)如：UDHU（3）核苷內(nèi)的轉(zhuǎn)位反應(yīng)如：Uψ（4）脫氨反應(yīng)如：AI如：AAm（1）甲基化（1）（1）（3）（2）（4）目錄現(xiàn)在是34頁\一共有42頁\編輯于星期日4.酵母Pre-tRNA的剪接真核細(xì)胞Pre-RNA具有小的內(nèi)含子現(xiàn)在是35頁\一共有42頁\編輯于星期日三、真核細(xì)胞rRNA前體的后加工1)剪切、修剪和修飾2)剪接（某些真核生物，如四膜蟲）現(xiàn)在是36頁\一共有42頁\編輯于星期日四膜蟲rRNA內(nèi)含子的二級結(jié)構(gòu)1.四膜蟲rRNA的剪接采用自我剪接方式5′-端核苷酸序列四、核酶現(xiàn)在是37頁\一共有42頁\編輯于星期日最簡單的核酶二級結(jié)構(gòu)——錘頭狀結(jié)構(gòu)(hammerheadstructure)通常為60個核苷酸左右同一分子上包括有催化部份和底物部份催化部份和底物部份組成錘頭結(jié)構(gòu)除rRNA外，tRNA、mRNA的加工也可采用自我剪接方式。2.核酶：具有催化性質(zhì)的RNA底物部分現(xiàn)在是38頁\一共有42頁\編輯于星期日3.核酶研究的意義核酶的發(fā)現(xiàn)，對中心法則作了重要補(bǔ)充；核酶的發(fā)現(xiàn)是對傳統(tǒng)酶學(xué)的挑戰(zhàn)；利用核酶的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)合成人工核酶；生命的起源：“RNA世界”？現(xiàn)在是39頁\一共有42頁\編輯于星期日反轉(zhuǎn)錄ReverseTranscription現(xiàn)在是40頁\一共有42頁\編輯于星期日反轉(zhuǎn)錄酶(reversetranscriptase）：

以RNA為模板，四種dNTP為底物，依據(jù)堿基互補(bǔ)原則指導(dǎo)合成DNA鏈的酶，又稱逆轉(zhuǎn)錄酶、反向轉(zhuǎn)錄酶。含有此種酶的病毒稱為反轉(zhuǎn)錄病毒?，F(xiàn)在是41頁\一共有42頁\編輯于星期日反