干化學(xué)尿流式儀及顯微鏡尿液沉渣檢查關(guān)系第1頁(yè)/共56頁(yè)尿液沉查鏡檢歷史Ismail（1000年前），宏觀在對(duì)尿液進(jìn)行分析Bright（1827年）首次發(fā)現(xiàn)管型Bird（1854年）Purdy（1900年）進(jìn)一步證明了尿沉渣檢查的臨床價(jià)值A(chǔ)ddis（1948年）建立了尿沉渣物定量檢查法美國(guó)NCCLS（1991年）提出了“尿常規(guī)分析”的推薦標(biāo)準(zhǔn)（GP16-P）；經(jīng)過(guò)四年實(shí)踐以提出了“尿液分析和尿液標(biāo)本采集、轉(zhuǎn)運(yùn)和保存”（1995年）的標(biāo)準(zhǔn)文件（GP-16A）日本JCCLS（1995年）制定了“尿沉渣檢查標(biāo)準(zhǔn)）中華醫(yī)學(xué)會(huì)第一次全國(guó)臨床檢驗(yàn)學(xué)術(shù)會(huì)議（1983年會(huì)議）提出了尿常規(guī)檢查標(biāo)準(zhǔn)化問(wèn)題中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)臨床血液學(xué)檢驗(yàn)與尿液分析專(zhuān)題研討會(huì)提出了我國(guó)尿沉渣的推薦標(biāo)準(zhǔn)（1995年武夷山會(huì)議）。第2頁(yè)/共56頁(yè)尿常規(guī)檢查的重要意義泌尿系統(tǒng)疾病的診斷和療效觀察其它系統(tǒng)疾病的診斷職業(yè)病的輔助診斷安全用藥的監(jiān)護(hù)第3頁(yè)/共56頁(yè)尿液常規(guī)檢查項(xiàng)目沉渣顯微鏡檢化學(xué)成份分析外觀檢查第4頁(yè)/共56頁(yè)尿液沉渣顯微鏡檢查尿沉渣顯微鏡檢的重要意義尿沉渣檢查標(biāo)準(zhǔn)化標(biāo)準(zhǔn)化尿沉渣檢查方法第5頁(yè)/共56頁(yè)標(biāo)準(zhǔn)化尿沉渣檢查方法標(biāo)準(zhǔn)沉渣檢查系統(tǒng)自動(dòng)充液儀檢查倒置顯微鏡檢查法Censide檢查系統(tǒng)第6頁(yè)/共56頁(yè)干化學(xué)紅、白細(xì)胞檢測(cè)與鏡檢的關(guān)系第7頁(yè)/共56頁(yè)干化學(xué)尿紅、白細(xì)胞檢查與鏡檢關(guān)系

尿沉渣顯微鏡檢查是診斷泌尿系統(tǒng)疾病的金標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)診斷、鑒別、予后分析具有重要的意義，迄今為止，尚無(wú)一臺(tái)儀器能完全替代顯微鏡檢查。八一8解放軍總醫(yī)院

第8頁(yè)/共56頁(yè)9解放軍總醫(yī)院

干化學(xué)尿紅、白細(xì)胞檢查與鏡檢關(guān)系

尿沉渣的標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化

操作規(guī)程為：尿液10ml，離心5分鐘，相對(duì)離心力（RCF）為400g，剩余沉淀為0.2ml，混勻后吸沉淀物約20μl，滴入玻片上，用18mm×18mm蓋玻片覆蓋后鏡檢。先用低倍鏡（10×10）觀察全片，高倍鏡（10×40）仔細(xì)觀察，細(xì)胞檢查10個(gè)高倍視野（HP），管型檢查20個(gè)低倍視野（LP）。報(bào)告方式：個(gè)細(xì)胞/HP，個(gè)管型/LP。美國(guó)NCCLS文件，推薦使用一次性尿檢測(cè)板，并用XXul報(bào)告，國(guó)內(nèi)專(zhuān)家亦認(rèn)為應(yīng)逐步在我國(guó)施行個(gè)/ul的報(bào)告。八一第9頁(yè)/共56頁(yè)干化學(xué)尿紅、白細(xì)胞檢查與鏡檢關(guān)系規(guī)范的尿沉渣鏡檢在常規(guī)工作的可行性與篩選規(guī)范的尿沉渣鏡檢是保證尿液分析結(jié)果準(zhǔn)確的基礎(chǔ)，原則上每個(gè)尿液標(biāo)本都采用這種方法檢查，但目前化驗(yàn)室人員少，工作量大，每天有幾十甚至于幾百個(gè)標(biāo)本需要及時(shí)報(bào)告，要使用規(guī)范的鏡檢及時(shí)地發(fā)出報(bào)告是困難的，最好尋找一個(gè)簡(jiǎn)單、快速的方法進(jìn)行過(guò)篩，即將完全正常的標(biāo)本篩去后，對(duì)異常的標(biāo)本進(jìn)行規(guī)范性檢查。干化學(xué)尿液分析儀提供了過(guò)篩的手段。八一10解放軍總醫(yī)院

第10頁(yè)/共56頁(yè)干化學(xué)尿紅、白細(xì)胞檢查與鏡檢關(guān)系干化學(xué)尿紅、白細(xì)胞篩選的概念與原則

所謂過(guò)篩就是在儀器、試帶符合實(shí)驗(yàn)要求，檢驗(yàn)人員相對(duì)穩(wěn)定的條件下制定的一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)，達(dá)到此標(biāo)準(zhǔn)可視為尿沉渣成份在正常范圍內(nèi)，可免去進(jìn)一步顯微鏡檢查。如果一個(gè)標(biāo)本經(jīng)過(guò)干化學(xué)、鏡檢兩種方法檢查，干化學(xué)結(jié)果符合過(guò)篩標(biāo)準(zhǔn)，鏡檢結(jié)果在正常范圍內(nèi)，說(shuō)明過(guò)篩是正確的。干化學(xué)結(jié)果不符合過(guò)篩標(biāo)準(zhǔn)，鏡檢結(jié)果也異常，也說(shuō)明過(guò)篩標(biāo)準(zhǔn)是正確的。干化學(xué)結(jié)果異常，鏡檢結(jié)果正常視為假陽(yáng)性，反之干化學(xué)結(jié)果正常，鏡檢結(jié)果異常視為假陰性。八一11解放軍總醫(yī)院

第11頁(yè)/共56頁(yè)鏡檢與試條同時(shí)檢測(cè)尿RBC對(duì)比試條鏡檢00~33~56~1011~2021~40＞40(個(gè)/ul)(個(gè)/ul)Neg1409

8110112457742594671198885073163273263351150146681732825917250120336713922325612解放總醫(yī)院

12解放軍總醫(yī)院

第12頁(yè)/共56頁(yè)不同正常篩選標(biāo)準(zhǔn)的RBC測(cè)定結(jié)果對(duì)比分析儀篩選標(biāo)準(zhǔn)鏡檢異常鏡檢正常RBC≥3~5/HPRBC≤0~2/HP敏感性(%)特異性(%)假陽(yáng)性(%)假陰性(%)

正常(RBC陰性)0149010035.855.10

異常(RBC≥u/l)21832676

正常(RBC≤10u/l)4319199.876.630.90.13

異常(RBC≥25u/l2179975

正常(RBC≤25u/l)294386286.592.713.87.1

異常(RBC≥50u/l)188930413解放軍總醫(yī)院

第13頁(yè)/共56頁(yè)鏡檢與試條同時(shí)檢測(cè)尿WBC對(duì)比八一14解放軍總醫(yī)院

鏡檢00-30-53-56-1011-20>20Neg26386141125125346107024424913243151005*3230851041294950008*5*7428223423(蛋白陽(yáng)性)9（RBC陽(yáng)性）7（Nit陽(yáng)性）3（單核,淋巴）9(蛋白陽(yáng)性)3(Nit陽(yáng)性)5(RBC陽(yáng)性)2(淋巴)2(蛋白陽(yáng)性)1(Nit陽(yáng)性)

203(個(gè)/ul)(個(gè)/ul)試條第14頁(yè)/共56頁(yè)以試條WBCneg為篩選標(biāo)準(zhǔn)

鏡檢

異常(WBC≥5~10/HP)正常(WBC為0~5/HP)試條正常(WBC為陰性)74(10)3364異常(WBC≥25/ul）1171174015解放軍總醫(yī)院

第15頁(yè)/共56頁(yè)以WBC≥25/ul為標(biāo)準(zhǔn)篩選鏡下管型WBC陰性WBC＞25/ul0~12~56~10＞100~12~56~10＞10（個(gè)/LP）透明管型10840811531558顆粒管型152136141121細(xì)胞管型11512

4

臘樣管型6116解放軍總醫(yī)院

八一第16頁(yè)/共56頁(yè)以RBC≥25/ul為標(biāo)準(zhǔn)篩選鏡下管型RBC≤10/ulRBC0≥25/ul0~12~56~10＞100~12~56~10＞10（個(gè)/LP）透明管型83283278271017顆粒管型972202555細(xì)胞管型5218

7臘樣管型24117解放軍總醫(yī)院

八一第17頁(yè)/共56頁(yè)以蛋白≥75mg/dl為標(biāo)準(zhǔn)篩選鏡下管型蛋白≤25mg/dl蛋白≥75mg/dl0~12~56~10＞100~12~56~10＞10（個(gè)/LP）透明管型1061345542919顆粒管型962202637細(xì)胞管型7516

4臘樣管型18解放軍總醫(yī)院

八一第18頁(yè)/共56頁(yè)以WBC≥25/ulRBC≥25/ul蛋白≥75mg/dl為標(biāo)準(zhǔn)篩選鏡下管型WBC陰性蛋白25≤mg/dl0~12~56~10＞10（個(gè)/LP）透明管型29000顆粒管型0000細(xì)胞管型0000臘樣管型0000RBC≤10/ul19解放軍總醫(yī)院

八一第19頁(yè)/共56頁(yè)干化學(xué)法檢測(cè)白細(xì)胞紅細(xì)胞存在的問(wèn)題干化學(xué)法檢查尿內(nèi)白細(xì)胞的原理是基于粒細(xì)胞漿內(nèi)有酯酶可作用于試帶中的吲哚酚酯，釋放吲哚酚與重氮鹽反應(yīng)形成縮合物，其顏色與細(xì)胞的多少成比例。此法只能測(cè)定粒細(xì)胞，不與淋巴細(xì)胞反應(yīng)。尿液中污染甲醛或高濃度膽紅質(zhì)或使用某些藥物（如呋喃咀啶），可產(chǎn)生假陽(yáng)性；尿蛋白>5g/L或尿液中含有大劑量先鋒Ⅳ或慶大霉素等藥物時(shí)，可使結(jié)果出現(xiàn)假陰性。引起紅細(xì)胞試驗(yàn)假陽(yáng)性：肌紅蛋白，易熱酶引起紅細(xì)胞試驗(yàn)假陰性：維生素C八一20解放軍總醫(yī)院

第20頁(yè)/共56頁(yè)干化學(xué)尿紅、白細(xì)胞檢查與鏡檢關(guān)系細(xì)胞破壞造成的“假陽(yáng)性”現(xiàn)象：所謂“假陽(yáng)性”、“假陰性”是以顯微鏡檢查為基礎(chǔ)的。由于干化學(xué)是檢測(cè)細(xì)胞胞漿內(nèi)涵物來(lái)確定細(xì)胞的有無(wú).在實(shí)際工作中可能存在下列問(wèn)題：⑴由于尿液在膀胱貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，導(dǎo)致白細(xì)胞破壞，酯酶釋放到尿液中，造成干化學(xué)陽(yáng)性，鏡檢陰性的所謂“假陽(yáng)性”現(xiàn)象。⑵腎病患者，紅細(xì)胞在腎臟或泌尿道破壞，或尿比重過(guò)低、尿PH偏高均易造成經(jīng)細(xì)胞破壞血紅蛋白釋放尿中，造成所謂紅細(xì)胞干化學(xué)檢查的“假陽(yáng)性”現(xiàn)象。八一21解放軍總醫(yī)院

第21頁(yè)/共56頁(yè)690例標(biāo)本尿干化學(xué)紅細(xì)胞檢查與統(tǒng)檢結(jié)果分析八一22解放軍總醫(yī)院

鏡檢鏡檢干化學(xué)檢查單克隆潛血板陽(yáng)性105例(細(xì)胞破壞引起“假陽(yáng)性”)加熱煮沸后干化學(xué)檢查全部為陰性(易熱酶引起假陽(yáng)性)690例陽(yáng)性360例陰性330例陰性330例(符合)陽(yáng)性0例陽(yáng)性142例(符合)陰性218例

陰性113例第22頁(yè)/共56頁(yè)干化學(xué)過(guò)篩應(yīng)用范圍的局限性(1)腎科及泌尿科病人尿液不適合于干化學(xué)過(guò)篩顯微鏡檢查。即無(wú)論干化學(xué)結(jié)果如何，均應(yīng)做顯微鏡檢查。鏡檢結(jié)石、結(jié)晶、腫瘤細(xì)胞作為診斷依據(jù)或觀察療效時(shí)，不宜用干化學(xué)方法過(guò)篩。由于干化學(xué)分析干擾因素較多，且不可避免的有一定的假陰性率，因此要結(jié)合臨床表現(xiàn)判斷結(jié)果，決不可只看干化學(xué)分析，忽視鏡檢。尿液的外觀（特別是顏色、濁度）與尿沉渣有一定相關(guān)關(guān)系，當(dāng)尿液外觀異常時(shí)，應(yīng)注意顯微鏡檢查。八一23解放軍總醫(yī)院

第23頁(yè)/共56頁(yè)干化學(xué)過(guò)篩應(yīng)用范圍的局限性(2)干化學(xué)試帶的質(zhì)量、穩(wěn)定性及質(zhì)量控制與過(guò)篩的準(zhǔn)確性密切相關(guān)。儀器及干化學(xué)試帶一定要符合要求：儀器的正常運(yùn)轉(zhuǎn)和試帶質(zhì)量合格取得是實(shí)驗(yàn)結(jié)果的基本保證。筆者制定上述標(biāo)準(zhǔn)使用的是BM公司的Midiitron尿液分析儀及Combur10TestM配套試帶.每個(gè)實(shí)驗(yàn)室使用過(guò)篩標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，首先必須做對(duì)照觀察（所用干化學(xué)試帶與顯微鏡對(duì)比），確認(rèn)儀器試帶的敏感性與特異性是否符合過(guò)篩標(biāo)準(zhǔn)的要求。八一24解放軍總醫(yī)院

第24頁(yè)/共56頁(yè)尿流式細(xì)胞儀與鏡檢關(guān)系第25頁(yè)/共56頁(yè)流式細(xì)胞儀的原理與分類(lèi)流式細(xì)胞儀通用型專(zhuān)用型科研型臨床型網(wǎng)織紅細(xì)胞分析儀血細(xì)胞分析儀尿沉渣分析儀第26頁(yè)/共56頁(yè)導(dǎo)電率尿?qū)щ娐是跋蛏⑸涔饬魇郊?xì)胞測(cè)定法熒光電阻抗測(cè)定電阻抗信號(hào)前向散射光強(qiáng)度熒光脈沖寬度熒光強(qiáng)度前向散射光脈沖寬度細(xì)胞體積細(xì)胞長(zhǎng)度染色部分長(zhǎng)度染色強(qiáng)度細(xì)胞大小電阻抗紅細(xì)胞散射圖酵母細(xì)胞結(jié)晶小圓上皮病理管型細(xì)菌白細(xì)胞上皮細(xì)胞管型前向散射光直方圖前向散射光直方圖紅細(xì)胞參數(shù)白細(xì)胞參數(shù)氬激光尿樣品電極電阻信號(hào)放大器稀釋導(dǎo)電率感應(yīng)器熒光信號(hào)放大器染色鞘液前向散射光信號(hào)放大器流式細(xì)胞儀測(cè)定原理簡(jiǎn)圖第27頁(yè)/共56頁(yè)流式細(xì)胞儀原理FscFlFlwFscwFlFl2Fscw250ch250chRBCWBCFscFsc第28頁(yè)/共56頁(yè)尿流式細(xì)胞儀與鏡檢的關(guān)系UF可提供客觀的形態(tài)學(xué)指標(biāo)，尤其對(duì)球性血尿和非球性血尿的鑒別UF可直接進(jìn)行定量檢測(cè)，簡(jiǎn)單、快速

尿流式細(xì)胞儀紅、白細(xì)胞檢查仍是鏡檢篩選

干化學(xué)尿與流式“篩選”之比較

尿流式較鏡檢的優(yōu)勢(shì)與局限性第29頁(yè)/共56頁(yè)再見(jiàn)第30頁(yè)/共56頁(yè)尿沉渣檢查的重要意義檢查內(nèi)容：上皮細(xì)胞、血細(xì)胞、管型及結(jié)晶臨床意義：

上皮細(xì)胞扁平上皮大圓上皮尾型上皮小圓上皮血細(xì)胞白細(xì)胞及膿細(xì)胞紅細(xì)胞第31頁(yè)/共56頁(yè)尿沉渣檢查的重要意義臨床意義：

管型透明管型細(xì)胞管型顆粒管型蠟樣管型白細(xì)胞管型紅細(xì)胞管型上皮細(xì)胞管型細(xì)粒管型粗粒管型脂肪管型腎衰竭管型第32頁(yè)/共56頁(yè)尿沉渣檢查的重要意義臨床意義：

結(jié)晶磺胺結(jié)晶堿性結(jié)晶酸性結(jié)晶亮氨酸及絡(luò)氨酸結(jié)晶三價(jià)磷酸鹽尿酸銨結(jié)晶非晶型磷酸鹽尿酸結(jié)晶草酸鈣結(jié)晶非晶型磷酸鹽第33頁(yè)/共56頁(yè)尿沉渣鏡檢進(jìn)展1.采用干涉、相差、偏振光、掃描及透射電鏡鑒別管型2.有用活體染色及細(xì)胞化學(xué)染色識(shí)別各種管型3.應(yīng)用單克隆抗體技術(shù)識(shí)別各種細(xì)胞第34頁(yè)/共56頁(yè)尿沉渣鏡檢進(jìn)展尿中紅細(xì)胞形態(tài)尿中白細(xì)胞形態(tài)第35頁(yè)/共56頁(yè)尿沉渣鏡檢進(jìn)展S染色各種上皮細(xì)胞形態(tài)第36頁(yè)/共56頁(yè)尿沉渣鏡檢進(jìn)展S染色各種管型形態(tài)第37頁(yè)/共56頁(yè)尿沉渣鏡檢進(jìn)展S染色各種管型形態(tài)第38頁(yè)/共56頁(yè)第39頁(yè)/共56頁(yè)第40頁(yè)/共56頁(yè)第41頁(yè)/共56頁(yè)復(fù)檢條件一REVIEW標(biāo)記計(jì)數(shù)錯(cuò)誤總數(shù)40,000電導(dǎo)率錯(cuò)誤電導(dǎo)率5ms/cm或38ms/cm界標(biāo)錯(cuò)誤RBC-Fl-DWSD40ch或紅細(xì)胞數(shù)2.5/l且其Fsc>200ch或紅細(xì)胞數(shù)15/l時(shí)未溶解的RBC%

20%二菌尿第42頁(yè)/共56頁(yè)第43頁(yè)/共56頁(yè)UF在鑒別血尿來(lái)源中的應(yīng)用301醫(yī)院用此儀器對(duì)隨機(jī)95例腎小球性和非腎小球性出血病人的尿紅細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行了觀察，以臨床診斷腎小球病變（腎活檢）為標(biāo)準(zhǔn)，以此儀器檢測(cè)尿非均一性紅細(xì)胞為腎小球病變?cè)\斷依據(jù)，結(jié)果：敏感性：100％，特異性：78.2％第44頁(yè)/共56頁(yè)UF在鑒別血尿來(lái)源中的應(yīng)用急性腎小球性腎炎病人尿液測(cè)定結(jié)果第45頁(yè)/共56頁(yè)UF在鑒別血尿來(lái)源中的應(yīng)用慢性腎小球性腎炎病人尿液測(cè)定結(jié)果第46頁(yè)/共56頁(yè)UF在鑒別血尿來(lái)源中的應(yīng)用前列腺癌病人尿液測(cè)定結(jié)果第47頁(yè)/共56頁(yè)UF在鑒別血尿來(lái)源中的應(yīng)用腎結(jié)石病人尿液測(cè)定結(jié)果第48頁(yè)/共56頁(yè)UF在鑒別血尿來(lái)源中的應(yīng)用慢性膀胱炎病人尿液測(cè)定結(jié)果第49頁(yè)/共56頁(yè)

尿沉渣成分 主要臨床意義

紅細(xì)胞 月經(jīng)、過(guò)度運(yùn)動(dòng)、各種腎，泌尿系統(tǒng)如外傷、腎小管炎癥、結(jié)石、結(jié)核、腫瘤、急性腎小球腎炎

白細(xì)胞各種腎損害、泌尿道感染、腎盂腎炎 上皮細(xì)胞 腎小管上皮細(xì)胞腎實(shí)質(zhì)腎小管受損 鱗狀上皮細(xì)胞正常人或污染

管型

寬型 嚴(yán)重腎疾病 腎上皮細(xì)胞腎小管退化、變性 脂肪 腎病綜合征 顆?；蛳灅幽I實(shí)質(zhì)損害 透明 酸性尿-含高鹽，多為病理性 細(xì)菌 泌尿道感染

脂肪體(卵圓小體)

腎病綜合征

各種尿沉渣成分主要臨床意義第50頁(yè)/共56頁(yè)尿沉渣染色的臨床意義SM染色：管型的鑒別巴氏染色：識(shí)別細(xì)胞甲苯胺蘭：觀察管型與核結(jié)構(gòu)過(guò)氧化酶：鑒別粒細(xì)胞與上皮細(xì)胞管型非特異酯酶：識(shí)別單核細(xì)胞油紅O、蘇丹Ⅲ：脂肪變性細(xì)胞酸性磷酸酶：區(qū)分腎上皮細(xì)胞與前列腺細(xì)胞第51頁(yè)/共56頁(yè)

方法 白細(xì)胞 紅細(xì)胞普通載玻片不加蓋玻片法 15.0 17.0 載玻片加蓋玻片法 12.0 15.0 改良Neubauer 10.2 9.9 Fast-Read-10R定量板法 9.3 7.0 四種常見(jiàn)尿沉渣檢查法CV%值比較第52頁(yè)/共56頁(yè)單克隆抗體免疫過(guò)氧化物酶染色檢查特異細(xì)胞抗體名稱(chēng)對(duì)應(yīng)的特異細(xì)胞 FMC10粒細(xì)胞 FMC32單核細(xì)胞 AMDT4 輔助/支持T淋巴細(xì)胞 Huly-m8 細(xì)胞毒/抑制T淋巴細(xì)胞 URO1 腎小球/輸尿管上皮細(xì)胞 URO3 近曲小管上皮細(xì)胞 URO5