2023.03.09歐陽(yáng)法創(chuàng)編2023.03.092023.03.09歐陽(yáng)法創(chuàng)編2023.03.092023.03.09歐陽(yáng)法創(chuàng)編2023.03.092023.03.09歐陽(yáng)法創(chuàng)編2023.03.09人類X染色質(zhì)標(biāo)本的制備與觀看時(shí)間：2023.03.09時(shí)間：2023.03.09創(chuàng)作：歐陽(yáng)法張皓予 15335203一、試驗(yàn)?zāi)康陌盐杖梭w口腔黏膜上皮細(xì)胞制備的方法。正確識(shí)別巴氏小體的特征及其所在位置。X體數(shù)目之間存在的關(guān)系。二、試驗(yàn)原理X平或三角形，直徑約1μm大小的小體。女性細(xì)胞核中消滅率為40%~60%。Barr和Bertram首先〔1949〕在雌性貓的神經(jīng)細(xì)到。這種染色質(zhì)小表達(dá)在稱為“性染色質(zhì)”(sexchromatin)，或稱為“巴氏小體”(Barrbody)。這種小體常位于核膜的內(nèi)外表，呈Feulgen陽(yáng)性反響，說明是DNA于在雌性哺乳動(dòng)物核中存在兩個(gè)X染色體，其中一個(gè)XX男人有XXY表現(xiàn)為男性。同樣，XXX體。因此，性染色質(zhì)實(shí)質(zhì)上是一個(gè)失活的X體。為什么失活的X示出來?目前，已有很多證據(jù)證明，在雌性個(gè)體中那根失活的X質(zhì)。使用放射自顯影的方法已經(jīng)證明，失活的X色體的固縮周期與其它染色體是不同步的，它在S是晚復(fù)制的。此外，人們也已覺察，晚復(fù)制的這根X消滅的位置。1.儀器與用具子，吸水紙。2.試劑95%乙醇，1mol/L四、試驗(yàn)材料五、試驗(yàn)步驟受檢者用水漱口，用牙簽刮取受檢者口腔頰部黏膜，把第一次刮取物棄去，然后再次用牙簽刮取黏干。9520min，取出晾干。1MHCl37攝氏度下水解20min，取出后自來水緩緩沖洗。8min，不枯燥，輕輕蓋上蓋玻片，用吸水紙蓋住輕輕壓片。六、試驗(yàn)結(jié)果1、2、3女性口腔上皮細(xì)胞被染色的細(xì)胞核與巴氏小體〔箭頭〕圖4男性口腔上皮細(xì)胞被染色的細(xì)胞核1、2所示，可在染成淡紫色的女性上皮細(xì)胞即巴氏小體。圖3右下角的有一不明顯的深色斑塊，可能是巴氏小體。4到明顯的巴氏小體。經(jīng)觀看男性、女性細(xì)胞個(gè)五十個(gè)覺察：50個(gè)女性細(xì)胞有21個(gè)有巴氏小體，占42%；50個(gè)男性細(xì)胞有0個(gè)有巴氏小體。七、爭(zhēng)論1、鏡檢時(shí)覺察女性上皮細(xì)胞標(biāo)本中的細(xì)胞數(shù)較少，密度低較分散〔圖3比照?qǐng)D4〕?？赡苁怯捎谕科瑫r(shí)不夠均勻，大局部涂在玻片邊緣導(dǎo)致在后續(xù)固定、沖洗、染色、壓片等步驟時(shí)有細(xì)胞流失。也有可能是染色時(shí)間不夠或者刮取細(xì)胞時(shí)刮得太少所致。2、觀看覺察女性上皮細(xì)胞當(dāng)中的巴氏小體形態(tài)多致。本試驗(yàn)染色時(shí)間為8min，后續(xù)試驗(yàn)可以適當(dāng)延長(zhǎng)染色時(shí)間〔>10min〕以使試驗(yàn)效果更加明顯。八、思考題1、男性沒有巴氏小體的理論根底為維持雌雄兩性生物基因表達(dá)全都，細(xì)胞中存在一種劑量補(bǔ)償效應(yīng)，使細(xì)胞中只含有一份有活性的X染色體，而多余的染色體失活形成巴氏小體，雌性的兩個(gè)X染色體所攜帶的兩份基因的遺傳效應(yīng)即可與雄性一個(gè)X染色體所具有的一份基因的遺傳效應(yīng)根本相當(dāng)。而由于男性本身就只有一條X染色體，所以不需要使多出的X染色體失活，從而也就沒有巴氏小體。2、男變女的變性手術(shù)后，該女性有無巴氏小體？體的構(gòu)成，故該個(gè)體仍只有一條X染色體，不行能形成巴氏小體。3、鑒定巴氏小體有什么臨床意義？性別。通過巴氏小體檢查可確定胎兒性別和查出性染色體特別的患者，如克氏〔Klinefelter′s〕綜合征患者外貌為男性，但有一個(gè)巴氏小體，可判定患者的核型是47，XXY；而外表為女性的特納氏〔Turner”s〕綜合征患者卻無巴氏小體，故推斷患者的核型是 45，XO。其他性染色體