&以下是整理總結(jié)出來的關(guān)于農(nóng)藥殘留日常檢測過程中所遇到的一些實際問題與答案，供大家參考同時也希望大家多多交流與討論。問：農(nóng)殘檢測一般會用到哪些儀器？答：前處理部分主要用到：前處理設(shè)備，如篩網(wǎng)、樣品粉碎機、冷凍干燥機、勻漿機等，電子天平等稱量儀器，一般性的實驗室玻璃儀器，還有索氏提取器、快速溶劑萃取儀等提取設(shè)備、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，氮吹儀，SPE，超聲波清洗器、烘箱或干燥箱，保存標準溶液的冰箱。檢測儀器主要用到：GC、HPLC、GC-MS、HPLC-MS和可見光分光光度計等問：1.做666-DDT檢測時，第2和第3個DDT峰始終分不開，是什么原因？2.濃硫酸對儀器有傷害嗎？如何避免？3.分析666-DDT可以選擇什么柱子？答：1.峰分不開，可以初始溫度為110攝氏度，選擇每分鐘5度的升溫速率濃硫酸對儀器有損害，可以用濃度為2%的硫酸鈉溶液除去硫酸，然后再過無水硫酸鈉除水。(1)DB-1701毛細管柱，進樣口溫度200度,檢測器溫度270度,160度程序升溫到220度,速率為每分鐘8度；⑵19CB\8CB柱，程序升溫：150(10°C/min)-260,保留20分鐘;⑶還可以選用se54、HP1和DB-5的色譜柱。問：SPE柱如何回收再生？答：1.ENVI-18(C18小柱)，用水溶性溶劑如甲醇來浸潤填料然后在用水或樣品溶劑來平衡即可；不同的柱子處理方法也不同。處理完的柱子一定要經(jīng)過評估。一個是要測定空白本底，另一個是要測定回收率。一般反相硅膠柱可以再生3-5次。如果是高聚物為填料的薄膜柱，可以再生10次之多；C18的固相萃取小柱和膜，一般的只要是水樣不是很臟的話，用完一次可以重復(fù)使用的，我是用乙酸乙酯和丙酮清洗的，重復(fù)使用四、五次是沒有關(guān)系。問：能否用GC/MS直接判斷藥材中存在什么農(nóng)藥殘留？答：1.應(yīng)該可以用譜庫檢索來初步確定，然后用標準品對照；可以的，是可以用GC-MS來鑑定，不過最好有DATAbank會比較好；高濃度可以，但中藥中殘留值不一定很大，可能靈敏度達不到，SCAN方式中藥本底很高，有的不一定檢出，SIM方式必須有標樣才好說?？傊?，還要買標樣的；直接做是肯定不行的。任何檢測都不可能是無目的的檢測，而且所有的檢測都應(yīng)該遵守一定的標準，比如是EPA還是歐盟標準，否則檢出限就是個無底洞吧？還要要看樣品來源，和作物在生長中會合法使用哪些農(nóng)藥，會非法使用哪些農(nóng)藥，還要看這些東西是出口到哪個國家，看看他們的要求是什么。問：在農(nóng)殘檢測中以前用索氏提取的地方能否用快速溶劑萃取儀代替答：可以做實驗比對，但索提取法已經(jīng)不常用，費時且雜質(zhì)多，提取效果倒不錯。索式提取是一種經(jīng)典的方法，提取的比較完全。而加速溶劑萃取及微波萃取是正在興起的萃取方式。一般如果使用加速溶劑和微波提取的話，需要作個方法并與索式提取相比較一下問：為何需要用與供試品溶液pH值較接近的標準緩沖溶液對儀器進行校正（定位）？假如不定位會有什么不良后果？答：1.M不為?M=0,但實際上甲當玻璃膜內(nèi)外溶液H+濃度或pH值相等時，從前述公式可知，0，這說明玻膜內(nèi)外表面性質(zhì)是有差異的，如表面的幾何形狀不同、結(jié)構(gòu)上的微小差異、水化作用的不同等。由此引起的電位差稱為不對稱電位。其對pH測定的影響可通過充分浸泡電極和用標準pH緩沖溶液校正的方法加以消除。酸度計是以PH單位作為標度的，在25°C時，每單位PH標度相當于0.059V的電動勢變化值。測量時，先用PH標準溶液來校正酸度計上的標度，使指示值恰恰為標準溶液的PH值。換上試液，便可直接測得其pH值.由于玻璃電極的實際電極系數(shù)不一定等于其理論值（0.059V/pH,在25C）,為了提高測量的準確度，故測量是所選用的標準溶液PH值應(yīng)與試液的PH值相接近。問：我查中藥農(nóng)藥殘留文獻中多用有水的溶劑進行萃取，如：含30%水的丙酮或是用水浸泡過夜。不知加水的用途是什么？如果直接用有機溶劑萃取還需過SPE柱凈化處理嗎？答：1.是為了充分的與植物組織浸潤，提取溶劑能提取完全。至于直接用有機溶劑萃取還否需過SPE柱凈化處理，視情況而定，不過大多是要的。2?另外如果用有機溶劑提取，看你用什么儀器的檢測器了，如果是fpd就不用特別的凈化，如果其他的ecd或者液譜等，當然就需要好好凈化了。問：蔬菜水果農(nóng)殘檢測樣品的提取有些什么方法？答：最經(jīng)典的方法還是索式提取，勻漿法在水果蔬菜中用得最多，目前使用的有微波萃取、超聲波萃取、加速溶劑萃取及固相基質(zhì)分散技術(shù)等問：農(nóng)殘的國標方法有GC-MS嗎？答：GB/T19648-2005水果和蔬菜中446種農(nóng)藥多殘留測定方法氣相色譜-質(zhì)譜和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法GB/T19649-2005糧谷中405種農(nóng)藥多殘留測定方法氣相色譜-質(zhì)譜和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法GB/T19650-2005動物組織中437種農(nóng)藥多殘留測定方法氣相色譜-質(zhì)譜和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法問：除了食品，土壤，中草藥，還有什么東西里有農(nóng)殘？答：農(nóng)藥殘留是一個非常嚴重的問題，除了在施用的對象（果樹、蔬菜、糧食作物、經(jīng)濟作物、衛(wèi)生等）上存在殘留外，還可以殘留在環(huán)境中（如土壤和水），進一步通過食物鏈的作用和大氣、水等循環(huán)使得分布范圍加大。因此，農(nóng)藥殘留不僅僅在施用的對象上存在，即使在沒有使用過農(nóng)藥的地方也可能會存在。問：請問在做茶葉有機氯農(nóng)殘檢測時，如果不凈化測得的值會不會誤差很大？我做茶葉有機磷農(nóng)藥的檢測用NPD檢測器，但是得出的峰很奇怪，做標樣也總是找不到相應(yīng)的峰答：1.NPD用的是洳珠，是個消耗品，得集中時間做，否則靈敏度會變化，當然，其氣體流量的比例也很重要，否則，就當fid用了；有機磷標樣應(yīng)該還是很容易在儀器上作出來的，調(diào)節(jié)一下儀器看看！關(guān)鍵是氣體和洳珠電壓。茶葉中有機氯可以用ECD效果不錯，一般現(xiàn)在這種農(nóng)藥很少用只要基體干擾不大就沒有必要用硫酸磺化，很麻煩的要磺化好多次，我感覺檢測出陽性后可以考慮用磺化排除一下比較省事，當然要是做八氯二苯（丙）迷就一定要磺化，有機磷我感覺還是用FPD結(jié)果會好一點，干擾小幾乎沒有雜質(zhì)峰。問：在用氨基鍵合丙基硅膠SPE柱處理蔬菜、水果樣品檢測氨基甲酸酯類農(nóng)藥時它主要去除的是樣品中的那類干擾物質(zhì)？答：氨基鍵合丙基柱的功能團屬于伯氨基，pKa為9.8。要用NH基柱吸附陰離子，系統(tǒng)的pH值必須低于其pKa兩個pH單位，同時，樣品的pH必須使得分析物呈陰離子狀態(tài)。主要作用力是極性、陰離子交換，第二作用力是非極性、陽離子交換。做蔬菜/水果中的農(nóng)殘用PSA柱效果會更好。問：農(nóng)殘前處理如何脫脂?效果怎么樣?答：牛奶、大豆的前處理脫脂，我用SPE前處理可以用磺化，一般用佛羅里硅土柱凈化或者是凝膠滲透色譜法問：什么是回收率，回收率怎么作呢？答：1.回收率是反應(yīng)待測物在樣品分析過程中的損失的程度，損失越少，回收率越高。例：添加5ppm的待測物，最后測的結(jié)果也是5ppm，那么你的回收率就是100%。做回收率一般找一個待測樣品中沒有此待測物的樣品，這樣做出來的更能接近理想要求回收率等于測定值減去本底值除以加入量乘以100。他用來表征你測定結(jié)果的準確度，一般加入量與樣品測定值比較接近即可?；厥章士梢源笥诨蛐∮?00，這與你選擇的方法與操作等多方面的因素有關(guān)，回收率越接近100越好。回收率有多種情況：有空白回收率，添加回收率，某一前處理過程的回收率，根據(jù)您不同的實驗?zāi)康挠胁煌倪x擇，可以驗證某一因素對實驗結(jié)果的影響大小。問：農(nóng)殘?zhí)崛〉娜軇┤绾芜x呀？答：級別的選擇應(yīng)該是對分析結(jié)果干擾較少；種類應(yīng)該按照“相似相溶”原理，最好使用混合溶劑。問：農(nóng)殘檢測中出現(xiàn)這樣的問題:同樣的東西進到氣相色譜中結(jié)果卻不同，一次的檢出物質(zhì)只有甲胺磷;一次卻有兩種物質(zhì)，其一為甲胺磷，另一為久效磷.答：可以多進幾針，如果每針都不一樣，那說明你的標樣有問題，或者室儀器有問題，可以用另外的幾種比較穩(wěn)定的有機磷農(nóng)藥標樣去進樣，能判斷是否是儀器的問題。因為甲胺磷相對容易分解。問：敵百蟲標樣在氣譜上還沒發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)換成敵敵畏，但上了質(zhì)譜就變成了敵敵畏，匹配率達95以上，不知是啥原因？答：這可能是由于你沒有很好的扣本底底緣故，譜庫底檢索是參考性的，這兩個東西本來一些是一樣的，應(yīng)該保留時間是不一樣的，同時用敵百蟲和敵敵畏的標準選擇離子上氣質(zhì)就可以看得到兩者的區(qū)別問：大蒜的檢測很難，干擾素太多，該如何去除？答：將大蒜去皮后（整瓣，不要切片）放入微波爐中中火40秒鐘。然后用PSA柱進行SPE萃取，干擾物很少。問：最近在做空白實驗和加標回收.我用蒸餾水代替樣品，做回收率，有機磷有幾種檢不出，有機氯空白中也有，哪位大蝦能給指教一下，怎么做空白和添加回收啊?答：做蔬菜中的農(nóng)藥殘留，空白和加標試驗必須用蔬菜做，不能用自來水代替，它們的基質(zhì)不同，干擾物質(zhì)也不一樣?？瞻拙褪怯媚闼龅氖卟耍稣麄€試驗從頭到尾走一遍，加標和空白的試驗過程必須是一樣的，而且必須用同一種同一批菜，所不同的就是加入了標準。問：氣相色譜雙柱定性的優(yōu)勢答：不同的物質(zhì)在同一根柱子上可能會有相同的保留時間，但在兩根不同極性的柱子上一般不可能會有相同的保留時間，雙柱定性就是利用這個原理來排除假陽性。GC毛細管柱可以同時分析多種成分農(nóng)藥，但有些卻分離不開，換一根極性不同的柱子有時就可以分離開，有些樣品中的內(nèi)含物在某些柱子中與標準農(nóng)藥也分離不開，造成假陽性，雙柱定性也有助于對結(jié)果的正確判定。問：做完農(nóng)殘前處理后，玻璃儀器一般都會附著很多有機溶劑，我試了很多方法，都無法清洗干凈，不知道各位有什么好的建議答：先用洗潔精洗，然后超聲波超，不怕麻煩就用重鉻酸鉀洗液洗。問：植物性食品、動物性食品農(nóng)殘檢測（有機磷、有機氯等）的回收率能達到多少？答：1.70%就低了點，甲胺磷和百菌清的回收率比較難做，前者一般是在80%左右，后者是在70%左右。做回收率要考慮檢測限，一般添加量是在回收率的3到5倍。一般選擇的樣品為色素影響低的，雜質(zhì)少的。還有溶劑的選擇也比較重要，不同溶劑對不同農(nóng)藥的提取效果是不同的。2.有機磷類回收率一般都在70—90%之間，當然一些易分解的可能還要低一些。菊酯類回收率一般都會偏高，一般會在90—110%之間。有機氯類回收率一般都在70—90%。問：多種農(nóng)藥殘留檢測的標準溶液怎么配置？答：多種農(nóng)藥標準品的配置和單種農(nóng)藥標準品配置的道理是一樣的。例如你舉的例子，你要配置0.05ml/l的標準溶液，分別吸取0.05ml你要配置的標準品，10種標準品,總共為0.5ml,定容至1L,那么這1L溶液中所含的每種標準品的濃度均為0.05ml/l問：關(guān)于氨基酸的分離，柱前成本低還是柱后，有誰知道的，怎么個算法?答：柱后衍生化一般來說常常是氨基酸自動分析儀上的,柱前衍生化一般是高效液相色譜測定氨基酸采用的衍生化方式,前者儀器費用投入較大,應(yīng)用范圍較窄一般只做氨基酸,后者儀器費用投入較小,應(yīng)用面較寬。在后期使用過程中,柱后衍生化所需費用相對較小一些。問：農(nóng)殘檢測中，為何與MS連用才可進行多殘留檢測？答：1.一般測定農(nóng)殘的檢測器比如FPD、NPD是選擇性檢測器,FPD只對含S和P的化合物有響應(yīng),NPD只對含N和P的化合物有響應(yīng)。而MSD是通用型檢測器,只要選擇待測化合物的特征離子,就有響應(yīng)。MS分析中的定性和定量能力，與GC、LC不可同日而語，能通子離子碎片分析，有效防止了假陽性的出現(xiàn),對于多組分分析更有效；靈敏度更是相差幾個數(shù)量級！MS的另一特點在于其不需要實現(xiàn)所有化合物完全的色譜分離，只要是質(zhì)量數(shù)不同的化合物就可以分通道進行檢測，即使同時出峰，相互之間也沒有干擾.所以可以在相對較短的時間內(nèi)進行多種物質(zhì)同時檢測。多殘留檢測時，樣品峰很多，有的樣品峰分離不好，活基體復(fù)雜，因此要ms來定性，同時多殘留檢測，各個參數(shù)得靈敏度不一致，因此用ms可以提高靈敏度。問：怎樣做方法檢測限？答：方法檢出限應(yīng)該是指，在滿足其它質(zhì)控要求的條件下，實驗所用的方法能從樣品中檢出目標物的最小濃度。在25g中添加1mL0.01ppm標樣，即在樣品中的濃度為(0.01ug/mLx1mL)=25g=0.4ng/g，這個是實際添加的濃度，在回收實驗之后，將會得到一個測定的濃度，如0.38ng/g，這個值是你通過添加回收實驗得到的，若重復(fù)5次。會得到5個在0.4左右的濃度,對這五個濃度計算標準偏差SD,然后根據(jù)公式方法檢出限MDL(ng/g)=SDxt,t是指在滿足一定的置信度下的值，可以從t值表查得，如5次重復(fù)，在置信度為0.99時，t值為3.7469，此時得的方法檢出限為MDL=3.75xSD(ng/g)。問：(1)對于前處理過程中的萃取率該怎么考察，如何確定？(2)分離度怎么確定？跟萃取率是什么關(guān)系？如果已經(jīng)有萃取率了，在做分離度是不是重復(fù)？答：1.(1)萃取效率可以計算出來，通過物質(zhì)在兩種溶劑中的分配系數(shù)和溶劑的體積，可以自己計算，最后的結(jié)論是同樣體積的萃取劑，少量多次比一次效率高。具體計算過程可以參考一些教材。(2)分離度是色譜的術(shù)語，就是色譜把相鄰的化合物分離開來的程度。具體計算方法自己可以去看書。萃取效率和分離度是兩個不同的概念。前者是前處理萃取時的，后者是上儀器，色譜的術(shù)語。2.分離度是兩個峰之間得事情，和萃取率無關(guān)，萃取率得確定只能和實物標樣比，其他根本不行，可惜食品中得實物標樣少的可憐，幾乎沒有。所以很多時候只是在同一萃取條件下考察凈化得回收率而已。問：精喹禾靈和喹禾靈有什么區(qū)別?答：精喹禾靈『(R)-2-[4-6-氯喹喔啉-2-基氧)苯氧基]丙酸乙酯』屬雜環(huán)氧基苯氧基丙酸類內(nèi)吸傳導(dǎo)型、選擇性莖葉處理除草劑，抑制禾本科雜草分生組織。喹禾靈化學名稱：(RS)-2-[4-(6-氯－2－喹惡啉氧基)苯氧基]丙酸乙酯，化學分子式：C19H17ClN2O4問：當用GC-ECD時，進丙酮配的樣品可以嗎？答：1.還是用正己烷或石油醚的好，雖然這可以根據(jù)你的柱子來選擇可否用丙酮，但是ECD對丙酮還是有一些響應(yīng)的，可能會影響你的樣品峰。2.丙酮對柱子中的聚合物有溶漲作用，ECD檢測器對其響應(yīng)也比較高，所以最好不要用丙酮做溶劑進樣。否則對柱子，對檢測器都不利。問：做菊酯類農(nóng)藥殘留檢驗時，經(jīng)常出現(xiàn)基線漂移(向上漂移)，有時候非常嚴重?？赡苁鞘裁丛蚰兀看穑褐永匣缓?，進樣口漏氣，新?lián)Q襯管，檢測器污染或沒穩(wěn)定，沒有良好接地都會導(dǎo)致漂移.進樣口\檢測器高溫有利于基線穩(wěn)定，當然如果是這方面的原因時.一些原因需要在穩(wěn)定或修正常規(guī)容易導(dǎo)致飄逸的位置后，再逐項排除.我用的是3800，出現(xiàn)這種問題時，我大多先換進樣墊，然后350度烘襯管，350-380烘檢測器，高溫老化柱子.然后等待，看看漂移的趨勢，還不能解決，就給工程師電話聯(lián)系一下。問：有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥能用酶抑制法作為速測的方法，有機氯農(nóng)藥有速測方法嗎？答：有機磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥是乙酰膽堿酯酶的抑制劑，所以可以制成快速檢測的方法。而有機氯農(nóng)藥的作用原理與它們不一樣。用GC測定時時間也一不定很長的。問：怎樣判斷固相萃取中農(nóng)藥已經(jīng)完全被洗脫了?答：在認為是已經(jīng)洗脫的情況下，再用溶劑洗脫一次，用儀器檢測一下看看有沒有目標物了，如果還有說明沒有完全的洗脫。在用洗脫液之前，應(yīng)該先對高低濃度的目標物做一條洗脫曲線，這樣才能確定準確的洗脫體積。問：從植物油中把溶解在里面的辣椒色素提取出來,想問問有什么辦法?答：用硅膠柱層析的辦法就可以了，查一下辣椒色素溶于何種溶劑用他做流動相洗脫就可以了，如果不能完全分開，在調(diào)整一下極性。為了能節(jié)省時間，先用薄層來試。問：檢農(nóng)殘用的襯管臟了怎么清洗？答：1.可用細鐵絲扎些棉花，沾上有機溶劑，深入襯管中清洗．然后再用有機溶劑泡和超聲清洗．2.如果是石英或玻璃的，可以用酸來洗，也可以用鉻酸洗液先浸泡再洗。如果要去活可以用硅烷化試劑來浸泡。3?不是很臟可以用lmol/L的硝酸洗，比較臟的話就用洗液洗，然后硅烷化(1)先要小心的把襯管內(nèi)的填充物拿出來。(2)因為雜質(zhì)通常是以碳的形式存在,所以要用濃鉻酸泡它24個小時.把表面的積碳除去。(3)在用水，甲醇和丙酮超聲波清洗.105度下烘干。(4)用干燥空氣或氮氣吹出管內(nèi)的顆粒。(5)如果有必要，做去活化處理。問：農(nóng)殘檢測中進樣口襯管選用得原則，臟的襯管用丙酮清洗過后還能不能又來做有機磷？答：做有機磷最好不用玻璃棉，用去活的襯管，襯管要經(jīng)常換或者清洗。問：固相萃取和固相微萃取的區(qū)別是什么？答：1.固相萃取的概念很寬泛，玻璃填充柱（填充硅膠或者無水硫酸鈉）也是其中一種，固相萃取是一種樣品前處理技術(shù).固相微萃取是一個比較新的技術(shù)，主要靠各種fiber吸附樣品，建立一個平衡，然后直接進氣相或者液相，fiber都是產(chǎn)品，有個類似自動進樣器的東西，把fiber接上去，不用的時候可以縮回去，fiber使用成本很高.2.固相萃取是利用吸附劑（如C8,C18等）將樣品中的目標物富集吸附在吸附劑上，然后利用不同極性的溶劑將目標物洗脫下來的過程。固相微萃取是利用目標物在纖維物質(zhì)和樣品基質(zhì)中達到分配平衡,然后在進行熱解吸。問：樣品處理好之后多長時間內(nèi)上機檢測有效？答：最好處理完就立即上機，要是有特殊情況不能及時上機的，也得冷藏。問：請問檢測農(nóng)藥殘留時對輔助儀器有何要求？答：空氣需要無油低噪音空氣泵（也叫空氣發(fā)生器），氫氣發(fā)生器最好是能達到99.999%，還要考慮流量問題，而且不管鋼瓶還是發(fā)生器都最好裝上凈化器，穩(wěn)壓電源。問：有機磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯農(nóng)藥標準品可不可以混合一起測定？答：可以，參考GB/T-5009-2003；可以,但要注意各農(nóng)藥之間的配比問：檢測時標準樣和樣品的出峰時間有偏差，該怎么判斷？答