第1頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五標本采集與檢驗質量鳳岡縣中醫(yī)院檢驗科陳旭飛2013.11.13第2頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五標本采集與檢驗質量概述血液標本尿液標本微生物標本第3頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五

臨床檢驗標本采集和處理相關問題已被中華人民共和國衛(wèi)生部衛(wèi)生技術標準化委員會列為國家和行業(yè)的標準化文件。概述第4頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五醫(yī)療機構臨床實驗室管理辦法質量管理要求安全管理要求第5頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五為了保證臨床檢驗質量，必須對臨床檢驗的全過程進行規(guī)范化的質量控制管理，包括實驗前﹑中、后三個階段，其中實驗前質量控制尤其重要。國內外均有報道，在實驗誤差中有60～70%的來自實驗前，且實驗前誤差即使使用再好的儀器﹑試劑﹑質控品和標準品等也是無法徹底避免的。因此，標本采集的質量直接關系到檢驗質量。第6頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五檢驗過程三階段Ⅰ：醫(yī)生診斷，開檢驗申請單（填寫病人信息），打帖條形碼、病人準備（生理特征、狀態(tài)），標本采集，標本運送Ⅱ：檢驗科收到標本后，標本處理，標本測定Ⅲ：結果審核，報告發(fā)出，對檢驗結果的正確評價和解釋ⅠⅡⅢ

分析前分析中分析后第7頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五

送檢標本的質量是保證檢驗質量的核心！是決定檢測結果“真實準確性”的前提！第8頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五患者狀態(tài)1.不可變的生物因素：

年齡、性別、種族等2.可變的生物因素：生理節(jié)律變化

(日周期、月周期、妊娠、季節(jié)、海拔）情緒、運動、飲食、藥物3.其他如采取標本時：體位、止血帶等等第9頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五不同年齡階段，檢驗參考值范圍不同新生兒：高參考范圍：FFA、LDH、ALP、無機磷、醛固酮、血漿腎素活性、AFP及血液白細胞計數(shù)低參考范圍：TP年齡第10頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五年齡幼兒：高參考范圍：ALP、膽堿脂酶及白細胞計數(shù)、淋巴細胞低參考范圍：中性粒細胞（相對數(shù)）中青年：血清TG、LDL隨年齡增長而漸增第11頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五年齡老年人：增高：血清促黃體生成素、卵泡刺激素、兒茶酚胺、甲狀旁腺激素、堿性磷酸酶、葡萄糖、免疫球蛋白減低：血清睪酮、雌二醇、降鈣素、醛固酮、總蛋白、白蛋白第12頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五性別多種血液學和生化指標存在差異

紅細胞、血紅蛋白：男﹥女甘油三酯、膽紅素、轉氨酶：男﹥女高密度脂蛋白、銅、網(wǎng)織紅：女﹥男第13頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五不同種族檢驗結果不同ATP:黑種人﹥白種人﹥黃種人WBC、粒細胞:白種人﹥黑種人VB12:黑種人﹥白種人1.35倍﹥黃種人LP（a）:黑種人﹥白種人2倍種族第14頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五晝夜生理變化第15頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五情緒原則上患者應在平靜、休息狀態(tài)下采集標本，特別是血液標本患者對采集標本時的恐懼、緊張，有時造成標本采集的失敗患者處于激動、興奮、懼狀態(tài)時，可使血紅蛋白、白細胞增高第16頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五

運動ALT、AST、LDH、CK等一時升高可引起血中鉀、鈉、鈣、白蛋白、血糖等成分的變化勞累或受冷、熱空氣刺激，往往可見白細胞的增高第17頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五飲食

一頓標準餐后，可使血中TG增高50%、GLU增高15%進食高碳水化合物食物，可引起GLU增高；進食高蛋白或高核酸食物，可引起血中BUN及UA的增高；進食高脂肪食物，可引起TG的大幅度增高餐后采集的血液標本，其血清常出現(xiàn)乳糜狀，影響到許多檢驗測定的正確性

第18頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五飲料及吸煙飲茶、咖啡

可使AMY、AST、ALT、ALP、Glu等升高飲酒

可使Glu降低，乳酸↑，使乙酸、UA↑；慢性飲酒使血中ALT、AST、ALP、BIL、TG、GGT↑，LDL-Ch↓吸煙

尼古丁可使兒茶酚胺、胃泌素、皮質醇、生長激素、血球壓積、癌胚抗原升高;使免疫球蛋白降低第19頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五注意生物學影響因素是不可避免的，醫(yī)生在評價病人檢驗結果時，一定要結合病人的年齡、人種、性別等生物學特征對于妊娠期病人一定要考慮起孕周醫(yī)生應囑咐病人采血前4h勿喝茶或咖啡、勿吸煙飲酒盡量了解病人對刺激物（煙、酒、茶或咖啡）和成癮性藥物的接觸史，供評價檢驗結果時參考第20頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五藥物的影響

（1）藥理作用（2）對測定方法產(chǎn)生影響第21頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五

幾種常用抗生素對部分檢驗項目檢測結果的影響

青霉素G鉀苯唑青霉素氨芐青霉素羧芐青霉素頭孢噻酚鈉頭孢噻肟三嗪硫酸鏈霉素硫酸慶大霉素WBC↓↓↓↓↑–↓–RBC↓↓↓↓↓–↓↓Hb↓–↓↓

––↓–PLT↓↓↓↓↓–↓–ALTASTAmyALPCKLDHChGLUBUN↑↑––––––↑–↑–↑––––↑↑↑––↑––––↑↑

–↑↑↑–––↑↑

–↑––––↑↑↑–↑–––––↑↑–––↑––↓↑↑–↑–↑––↑第22頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五幾種常用鎮(zhèn)靜劑對部分檢驗項目檢測結果的影響安定利眠寧苯巴比妥奮乃靜苯妥英鈉氯丙嗪WBC↓↓↓↓↓？RBC––↓–↓？Hb––↓–↓？PLT–↓↓–↓？ALT––↑––↑AST–↑↑–––ALP↑↑↑–↑–Ch––––↑–Glu––––↑–Bil↑↑↑↑↑↑BUN––––––Ca––↓–––尿蛋白–––––↑尿糖↓–––？–第23頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五女性激素雌激素引起HDL-Ch、甲狀腺結合球蛋白、某些凝血因子增高黃體酮引起HDL-Ch降低，使LDL-Ch增高阿斯匹林類藥物、避孕藥、肝素及口服抗凝劑、有的抗生素等均可引起PT時間延長第24頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五參與化學反應的影響氧化還原反應如維生素C對部分檢驗結果的影響：

—增高：Cr、UA、Bil、ALT、AST、尿Cr —降低：Ch、TG、LDH、Glu蛋白質組成成分改變的影響顯色反應的異常：如服用磺胺類及氨基水楊酸類藥物，可影響尿膽紅素與尿膽原測定藥物對測定方法產(chǎn)生的影響第25頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五注意采血應盡可能在上午7-9時進行。如果不得不在其他時間急查一些項目，評價檢驗結果時應注意晝夜節(jié)律影響采血盡量安排在其他檢查和治療之前進行一定要在化驗單上注明采血時間第26頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五體位從立位到臥位時：

Hb下降4%；Hct下降6%K下降1%；Ca下降4%ALT下降7%；AST下降9%ALP下降9%；IgG下降7%IgA下降7%；IgM下降5%TG下降6%；T4下降11%第27頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五止血帶、攥拳的影響止血帶改變靜脈壓力，引起體位改變類似的檢驗指標也改變使用應在1min以內止血帶壓力過大或止血時間過長，可使血管內皮細胞釋放T-PA，使纖溶活性增強或加速血小板的激活及PF4分泌的增加第28頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五止血帶、攥拳的影響檢測血鉀時反復握拳、運動上臂會使血鉀值上升0.8mmol/L第29頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五注意采血時，應盡量統(tǒng)一采血姿勢；在評價檢驗結果時，要考慮到姿勢的影響應盡量使用止血帶1min內采血；看見回血，馬上解開止血帶；采血時，勿讓患者做反復握拳運動當需要重復使用止血帶時，應使用另一上臂第30頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五

采集時間（1）采血應盡可能在上午7～9時進行。如果不得不在其他時間急查一些項目，評價檢驗結果時應注意晝夜節(jié)律影響。（2）采血盡量安排在其他檢查和治療之前進行。（3）一定要在化驗單上注明采血時間。（4）最佳采樣的選擇第31頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五最具“代表性”的時間

晨起空腹時或者禁食12h盡可能減少晝夜節(jié)律帶來的影響病人處于平靜狀態(tài)，減少病人由于運動帶來的影響減少飲食的影響抽血部位正確選擇，輸液對側或遠端檢出陽性率最高的時間對診斷最有價值的時間最佳采樣時間的選擇第32頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五

采取具代表性的標本采取最合乎要求的標本抗凝劑的正確應用防溶血、防污染防止過失性的采樣第33頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五避免溶血只有當血紅蛋白≥0.3g/L時才能被肉眼看見而肉眼不可見的溶血稱非顯性溶血第34頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五不良習慣和傳統(tǒng)采血器具限制造成的溶血將血從注射器中推到試管中，血細胞受外力而溶血采血時定位或進針不準，針尖在靜脈中探來探去，造成血腫和血樣溶血混勻含添加劑的試管時用力過猛，或運輸時動作過大爭對采樣試管中的添加劑來說采血量不足，由于滲透壓的改變發(fā)生溶血第35頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五采血時空氣進入，產(chǎn)生泡沫，發(fā)生溶血擠壓穿刺部位或從皮膚上直接吸血運輸過程不當造成溶血不正確的存放第36頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五接收標本應注意已發(fā)生溶血的標本不能使用為了避免溶血，應規(guī)范采血步驟、運輸和貯存方法不能及時送檢的血標本放室溫第37頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五避免血液凝固需要抗凝的標本，抽血后應立即顛倒混勻，如有小凝血塊會對以下結果造成影響：WBCPLT凝血功能檢測血沉糖化血紅蛋白流式細胞術檢測藥物濃度監(jiān)測第38頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五抗凝劑的選擇及影響EDTA、NaF、草酸鹽等不能用于測定血Ca測定含有K、Na的抗凝劑不能用于測定K、Na標本的抗凝草酸鹽、氟化物不能用于測定醇及用酶法測定：草酸鹽可抑制Amy、Acp、LDH的活性；氟化物可激活尿素酶、淀粉酶等凝血因子檢測用枸櫞酸鈉抗凝優(yōu)于草酸鹽——李艷，中華檢驗醫(yī)學雜志，2008,31(1):18第39頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五血液比例過高，抗凝劑相對不足，可造成微凝塊血液比例過低，抗凝劑相對過剩，造成血漿的稀釋，對很多實驗造成影響：凝血試驗：溶液與血液按1：9比例，抗凝劑pH<7.1或>7.4，

APTT、PT延長。血常規(guī)：中性粒細胞腫脹、分葉消失，血小板腫脹、崩解，產(chǎn)生正常血小板大小的碎片血培養(yǎng)：采血過少會降低培養(yǎng)的陽性率抗凝劑的濃度與比例第40頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五血常規(guī)生化速凝管血沉管生化管第41頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五采血順序→血常規(guī)(2ml)→凝血功能(2ml)→肝功+其他(5ml)→血沉

(2ml)第42頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五

注意

血常規(guī)、凝血功能、血沉采2.0ml；凝血功能必須采準2.0ml，多了不行，少了不行；生化5.0ml；血培養(yǎng)8-10ml,在使用抗生素之前采血。第43頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五尿液標本環(huán)節(jié)的控制第44頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五

尿液標本的種類首次晨尿：清晨排出的第一次尿液，適于尿沉渣檢查，特別是對細菌、亞硝酸鹽、蛋白、管型等的檢查隨機尿：隨機留取任何一個時間的尿液標本空腹尿標本：即進餐前的尿液標本餐后尿：即餐后2小時收集的尿液標本時段尿：適用于定量分析尿液標本的正確采集

第45頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五最好留取中斷尿應避免女病人陰道分泌物污染記錄好標本留取時間，盡快交送實驗室分析留取標本后應要求在2小時內進行分析收集的注意事項第46頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五

尿中紅細胞、白細胞、管型在不同溫度及不同間隔時間下的結果變化

RBC/UL25℃RBC/UL6℃WBC/UL25℃WBC/UL6℃管型/LP25℃管型/LP6℃立即1705170533333332282h1622168030131027254h1310144714726816226h108012531112217158h78010397613239第47頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五

超過2h的尿液樣本檢測中可能影響到的結果外觀沉渣鏡檢結果顏色變深RBC↓濁度變渾WBC↓氣味帶有明顯氨臭管型↓結晶↑細菌↑第48頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五尿滲透壓及尿pH對細胞和管型形態(tài)的影響

成分高滲尿低滲尿酸性尿堿性尿白細胞存在崩壞性強縮小，不定形膨脹，多呈塊狀紅細胞葡萄狀膨脹不定形無色輪狀存在縮小，完全破壞時形成褐色顆粒塊狀管型存在溶解存在溶解第49頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五如果無法達到規(guī)定要求時間，則應將標本貯存在4℃～8℃冰箱內，但保存時間不得超過6小時，因為隨著時間的延長，尿中有形成分將會有不同程度的破壞第50頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五常用化學防腐劑

含量作用主要用途甲苯數(shù)滴防止細菌污染尿酮體甲醛40%,0.5ml/100ml尿抑制細菌生長固定有形成分鹽酸1ml/100ml尿維持尿液pH17-羥皮質類固醇、17-酮類固醇、兒茶酚胺、丙酮定量等第51頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五標本的拒收下列情況可拒收（各臨床實驗室應有規(guī)定）溶血、脂血嚴重者抗凝血中有凝塊；該抗凝未加抗凝劑者血量不足（如血沉、PT等等)不應接觸空氣的接觸了空氣采集標本離送檢間隔過長者該加防腐劑未加防腐劑者用錯真空采血管的惟一性標志錯誤或不清楚的細菌培養(yǎng)被污染者輸血/輸液中采集的標本第52頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五標本質量的描述

溶血、脂血、黃疸血必須描述有其他缺陷的也應描述第53頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五“標本采集規(guī)范”

檢驗項目名稱采集何種標本采集最佳時間標本采集量是否抗凝？用何種抗凝劑？抗凝劑的用量是否需防腐?用何種防腐劑?防腐劑的用量保存方法及輸送時間第54頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五共性問題抽血量太少肝炎類、肝功標本至少4ml凝血、血沉有抗凝比的問題，管子自然平衡抽血管不能混用生化切忌用EDTA-k2抗凝免疫系列（Ag、Ab）不能用肝素抗凝第55頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五共性問題抽血量太少肝炎類、肝功、離子標本至少4ml：

項目檢測不全凝血功能：時間延長血沉：增快全血細胞計數(shù)結果減低第56頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五共性問題抽血量多凝血、血沉、血細胞計數(shù)、均存在有抗凝比和抗凝能力問題

未凝：可能會導致血凝時間縮短、血沉減慢。微凝：血凝時間延長、血沉增快、血細胞計數(shù)結果減低甚至造成儀器堵孔。第57頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五共性問題抽血管混用生化切忌用EDTA-k2抗凝免疫系列（Ag、Ab）不能用肝素抗凝抽血管混用生化切忌用EDTA-k2抗凝免疫系列（Ag、Ab）不能用肝素抗凝第58頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五微生物標本的采集處理微生物項目開展的意義:填補我院細菌鑒定與藥敏監(jiān)測的空白讓抗生素的運用具有合理性實時進行院感監(jiān)測，控制醫(yī)院感染率

第59頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五目的:

制定臨床標本采集的方法，減少污染，提高檢出率。由臨床醫(yī)生及護士，對每一個標本認真采集。第60頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五標本采集的一般原則：早期采集無菌采集根據(jù)目的菌的特性用不同的方法采集采集適量標本安全采集第61頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五血培養(yǎng)血培養(yǎng)查病原菌對診斷以下疾病很重要血流感染感染性心內膜炎臨床不明原因感染假體植入后感染(如人工關節(jié),人工瓣膜)導管相關血流感染關節(jié)炎細菌性肺炎第62頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五血培養(yǎng)的主要病原菌：沙門菌、布氏桿菌、其他革蘭陰性桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌樹脂需氧培養(yǎng)瓶：采用BD專利的樹脂吸附技術，可全面吸附培養(yǎng)瓶中的抗生素，減少抗生素對血培養(yǎng)結果的影響。一般應在病人發(fā)熱初期或高熱期采集，最好在抗生素使用前采集。采樣以無菌法靜脈采集，成人每次采血16-20ml,先注入8-10ml蘭色的需氧血培養(yǎng)瓶中，剩下的注入紅色厭氧血培養(yǎng)瓶中。樹脂兒童培養(yǎng)瓶：專門為嬰幼兒設計，在最大限度降低采血量的同時，添加了大量的生長因子。保證陽性標本檢出率。采血的范圍:1~4ml,最適采血量為:3-5ml。含溶血素厭氧菌培養(yǎng)瓶：用于厭氧菌以及厭氧型L型細菌等特殊細菌的快速檢測。特殊的溶血素配方，可提高被白細胞吞噬細菌的檢出。破壞紅細胞和血小板，釋放營養(yǎng)。培養(yǎng)基特殊的專利配方，可提高L型細菌/厭氧菌的陽性檢出率并縮短檢出時間。第63頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五痰標本

適合抗酸染色查找抗酸桿菌、一般細菌培養(yǎng)和藥敏檢測。采集痰標本最好在清晨早餐前進行。刷牙后用清水漱口，再用力從深部咳出第一口痰采入滅菌痰盒中，立即送檢。注意取深部痰，避免留取唾沫。主要病原菌：肺炎鏈球菌、克雷伯菌屬、流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌，其中酵母菌、草綠色鏈球菌、凝固酶陰性的葡萄球菌為口咽部定植菌,一般為非致病菌.第64頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五尿

采樣時必須先用皮膚消毒液清潔外陰，再收集中段尿標本于滅菌一次性痰盒中，立即送檢。最好留取晨尿。主要病原菌：大腸埃希菌、變形桿菌、克雷伯菌屬、其他陰性桿菌、腸球菌、腐生葡萄球菌、純的金黃色葡萄球菌第65頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五胸水、腹水、關節(jié)液等無菌部位標本

對局部周圍皮膚進行消毒，嚴格無菌操作，用無菌注射器抽取2-5ml標本立即送檢，或注入盛于穿刺包內的無菌試管中，立即送檢。厭氧培養(yǎng)應排空注射器內空氣，再注入專用厭氧培養(yǎng)瓶送檢.主要病原菌：金黃色葡萄球菌、化膿鏈球菌、銅綠假單胞菌、其他革蘭陰性桿菌、梭狀芽孢桿菌、梭狀菌、其他β-溶血鏈球菌、其他厭氧菌第66頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五大便

取含膿、血或粘液的糞便置于清潔容器內送檢。對排便困難的病人及嬰幼兒可用直腸拭子采樣，拭子應保持濕潤，采樣前可將拭子用無菌生理鹽水浸濕。主要病原菌：沙門菌、志賀菌、彎曲桿菌、霍亂弧菌、副溶血弧菌、產(chǎn)毒性大腸桿菌。第67頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五創(chuàng)傷、組織

組織損傷標本用拭子采取，如損傷范圍大，應從不同部位采集多份標本。外科清創(chuàng)或活檢材料，置于無菌容器內立即送檢。標本較小應加無菌生理鹽水以防干燥。主要病原菌：金黃色葡萄球菌、化膿鏈球菌、銅綠假單胞菌、其他革蘭陰性桿菌第68頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五腦脊液標本

腰穿法采集腦脊液2—5ml,盛于穿刺包內的無菌試管中，立即送檢，否則會影響檢出率，同時注意保溫，不可置冰箱保存，會使病原菌死亡。

主要病原菌：B群β-溶血鏈球菌(新生兒)、流感嗜血桿菌(2月-2歲的兒童)、肺炎鏈球菌、腦膜炎奈瑟氏菌。第69頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五生殖道標本陰道、子宮及前列腺等分泌物應由醫(yī)師采集，收集于無菌瓶內送檢，要避免陰道正常菌群污染拭子。淋病奈瑟菌檢查時，需用拭子插入尿道及宮頸取樣,立即送檢，要避免陰道正常菌群污染拭子。主要病原菌：淋病奈瑟菌、滴蟲、酵母菌、孕婦攜帶的B群β-溶血鏈球菌。第70頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五物體表面監(jiān)測采集采集時間：根據(jù)采樣目的選擇時間，如進行常規(guī)物體表面監(jiān)測，潛在污染區(qū)、污染區(qū)選擇消毒處理后進行采樣，清潔區(qū)根據(jù)現(xiàn)場情況確定；若是暴發(fā)流行時的環(huán)境微生物學檢測，則盡可能對未處理的現(xiàn)場進行采樣。采樣面積：常規(guī)監(jiān)測時被采物體表面＜100cm2，取全部表面；被采物體表面≥100cm2，取100cm2。暴發(fā)流行時采樣不受此限制是。第71頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五采集方法：棉拭子法：、規(guī)則物體表面，用5cm×5cm大小的滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用浸有無菌0.03mol/L磷酸鹽緩沖液（PBS）或0.9%氯化鈉采樣液的棉拭子1支，在規(guī)格板內橫豎往返各涂抹5次，并隨這轉動棉拭子，連續(xù)采樣1-4個規(guī)格板面積剪去手接觸部分，將棉拭子放入裝有10ml采樣液的試管中送檢。、門把手、金屬、玻璃等不規(guī)則小型物體則采用棉拭子直接涂抹物體表面采樣。第72頁，共79頁，2023年，2月20日，星期五壓印法：采用一直徑為5.6cm（面積約為25100cm2