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實(shí)驗(yàn)三細(xì)菌的芽孢染色第1頁,共12頁,2023年,2月20日,星期六實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆昭挎呷旧把挎咝螒B(tài)掌握印片染色法及插片觀察放線菌的形態(tài)第2頁,共12頁,2023年,2月20日,星期六實(shí)驗(yàn)原理---芽孢染色芽孢壁比營養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)復(fù)雜而且致密,透性低,著色和脫色較營養(yǎng)細(xì)胞難。采用堿性染料并在微火上加熱,或延長染色時(shí)間,使菌體和芽孢同時(shí)染色后,用蒸餾水沖洗,脫去菌體顏色,保留芽孢的顏色。并用另一種對(duì)比鮮明的染料使菌體著色。第3頁,共12頁,2023年,2月20日,星期六第4頁,共12頁,2023年,2月20日,星期六實(shí)驗(yàn)原理---放線菌形態(tài)的觀察第5頁,共12頁,2023年,2月20日,星期六第6頁,共12頁,2023年,2月20日,星期六實(shí)驗(yàn)器材1、材料枯草芽孢桿菌;吸水鏈孢霉;紫色直絲鏈孢霉2、試劑孔雀綠染液(5%),復(fù)紅染液3、其他接種環(huán)、木夾、刀片等第7頁,共12頁,2023年,2月20日,星期六實(shí)驗(yàn)步驟---芽孢染色(1)制片(2)孔雀石綠染色:加孔雀綠染液覆蓋涂片區(qū),再用木夾夾住載玻片,在微火上加熱,致蒸汽徐徐冒出,保持1min(3)冷卻、水洗、吸干(4)復(fù)紅復(fù)染1~2min(5)水洗、吸干(6)鏡檢第8頁,共12頁,2023年,2月20日,星期六實(shí)驗(yàn)步驟---印片染色法觀察吸水鏈孢霉印片→微熱固定→石炭酸復(fù)紅染色1min→水洗→晾干→鏡檢印片:用解剖刀取放線菌培養(yǎng)體一塊,將菌面朝上放在一載玻片上,另取一潔凈載玻片置于火焰上微熱后,蓋在菌苔上,輕輕按壓,使培養(yǎng)物(氣絲、孢子絲或孢子)粘附(“印”)在后一塊載玻片的中央,有印跡的一面朝上,通過火焰2-3次固定;第9頁,共12頁,2023年,2月20日,星期六實(shí)驗(yàn)步驟---插片法觀察紫色直絲鏈孢霉用鑷子輕輕取出紫色直絲鏈孢霉平皿中的蓋玻片。將蓋玻片直接放在一塊干凈的載玻片上鏡檢。效果如果不理想,可以用印片法觀察紫色直絲鏈孢霉,方法同吸水鏈孢霉的觀察.第10頁,共12頁,2023年,2月20日,星期六實(shí)驗(yàn)作業(yè)繪出芽孢桿菌芽孢及菌體形態(tài)圖;繪出吸水鏈孢霉及紫色直絲鏈孢霉孢子及菌絲的形態(tài)。第11頁,共12頁,2023年,2月20日,星期六實(shí)驗(yàn)思考題1.試比較兩種觀察放線菌方法的優(yōu)缺點(diǎn)。
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