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PharmaceuticalAnalysis

PharmaceuticalAnalysis分光光度法

分光光度法

（二）熒光分析法1.熒光及熒光分析法熒光分析法利用熒光的物理特性進(jìn)行定性與定量測(cè)定的方法。分光光度法

S2S1S0T1吸收發(fā)射熒光發(fā)射磷光系間跨越內(nèi)轉(zhuǎn)換振動(dòng)弛豫能量l

2l

1l

3

外轉(zhuǎn)換l

2T2內(nèi)轉(zhuǎn)換振動(dòng)弛豫分光光度法

2.分子產(chǎn)生熒光必須具備的條件具有一定的熒光量子產(chǎn)率（熒光效率）；01熒光效率具有合適的結(jié)構(gòu)；02躍遷類型*→有利于熒光的產(chǎn)生；分光光度法

具有合適的結(jié)構(gòu)；02共軛效應(yīng)提高共軛度有利于增加熒光效率并產(chǎn)生紅移剛性平面結(jié)構(gòu)分子剛性平面越大，熒光效率越大取代基效應(yīng)芳環(huán)上有供電基，能增加電子共軛程度，使熒光增強(qiáng)。分光光度法

3.影響熒光強(qiáng)度的外部因素溶劑的影響溶劑極性↑，熒光效率↑溫度的影響溫度↑，熒光效率↓，熒光強(qiáng)度↓。溶液pH當(dāng)熒光物質(zhì)為弱酸或弱堿時(shí)，溶液pH的改變對(duì)熒光強(qiáng)度有很大影響。熒光熄滅劑的影響散射光的干擾瑞利散射和拉曼散射分光光度法

4.熒光光度計(jì)組成光源、單色器、樣品池、檢測(cè)器。熒光分析儀基本部件示意圖分光光度法

5.在含量測(cè)定中的應(yīng)用定量依據(jù)低濃度時(shí)，溶液熒光強(qiáng)度與熒光物質(zhì)濃度成正比F=KC定量方法標(biāo)準(zhǔn)曲線法比例法分光光度法

6.特點(diǎn)靈敏度高，可達(dá)10-10g/ml～10-12g/ml；A選擇性好；B適用于

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