球菌及檢驗(yàn)球菌（coccus）是引起人類化膿性感染主要細(xì)菌,又稱化膿性球菌（pyogeniccoccus）。常見需氧和兼性厭氧球菌包括：革蘭陽(yáng)性球菌奈瑟菌屬Neisseria

卡他布蘭漢菌B.catarrhalis

葡萄球菌屬Staphylococcus鏈球菌屬Streptococcus腸球菌屬Enterococcus革蘭陰性球菌葡萄球菌屬

Staphylococcus二、細(xì)菌特性（一）形態(tài)染色

革蘭陽(yáng)性球菌，菌體呈球形，散在或呈葡萄狀排列（圖1、圖2），無(wú)鞭毛、無(wú)芽胞，少數(shù)菌株能形成莢膜。在青霉素等藥物誘導(dǎo)下可形成L型（圖3）。（圖1）（圖2）（圖3）(二)培養(yǎng)特性多數(shù)為兼性厭氧，少數(shù)為專性厭氧菌；營(yíng)養(yǎng)要求不高，最適生長(zhǎng)溫度37℃，最適pH7.4。多數(shù)菌株具有耐鹽性，能在含10%～15%NaCl的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。在肉湯培養(yǎng)基中生長(zhǎng)迅速，呈均勻混濁生長(zhǎng)血瓊脂平板上：菌落中等大小、圓形凸起、表面光滑、濕潤(rùn)、邊緣整齊、不透明，呈金黃色、白色或檸檬色。金黃色葡萄球菌（圖1）菌落周圍有明顯的β-溶血環(huán)，腐生葡萄球菌（圖3）和大多數(shù)表皮葡萄球菌（圖2）無(wú)溶血環(huán)。圖1圖2圖3（三）生化試驗(yàn)

觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性（圖1）。分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣（圖2）。金黃色葡萄球菌能分解甘露醇，凝固酶試驗(yàn)及耐熱DNA酶試驗(yàn)陽(yáng)性。（圖1）（圖2）（四）抗原結(jié)構(gòu)主要有兩種抗原：1.葡萄球菌A蛋白（SPA）有種、屬特異性。2.多糖抗原有型特異性，存在于細(xì)胞壁。

三、臨床意義（一）致病物質(zhì)外毒素葡萄球菌溶素、殺白細(xì)胞素、腸毒素、表皮剝脫毒素、毒性休克綜合征毒素-1等。侵襲性酶類血漿凝固酶、耐熱核酸酶、透明質(zhì)酸酶等

組織器官及全身性感染肺炎、心包炎、骨髓炎、腦膜炎、腎盂腎炎、尿道感染、敗血癥、膿毒血癥等。醫(yī)院感染偽膜性腸炎、人工瓣膜性心內(nèi)膜炎、靜脈導(dǎo)管感染等。毒素性疾病

食物中毒燙傷樣皮膚綜合征毒性休克綜合征四、微生物學(xué)檢驗(yàn)（一）檢驗(yàn)程序

（三）檢驗(yàn)方法

1．顯微鏡檢查除血液標(biāo)本外，其他標(biāo)本均可直接涂片作革蘭染色檢查。膿液直接涂片（革蘭染色）血標(biāo)本培養(yǎng)后涂片（革蘭染色）2.分離培養(yǎng)

血液標(biāo)本增菌培養(yǎng)分離培養(yǎng)（血平板）

一般標(biāo)本分離培養(yǎng)（血平板）

污染標(biāo)本（糞便、嘔吐物等）分離培養(yǎng)（高鹽甘露醇平板）3.鑒定（玻片法）（試管法）血漿凝固酶試驗(yàn)?zāi)z乳凝集試驗(yàn)新生霉素敏感試驗(yàn)葡萄球菌屬與微球菌屬的鑒別方法葡萄球菌屬微球菌屬形態(tài)葡萄狀排列為主，菌體較小四聯(lián)排列為主，菌體較大O-F試驗(yàn)發(fā)酵型氧化型

鏈球菌屬

Streptococcus

一、分類Bergy’s分類40個(gè)種和亞種溶血現(xiàn)象分類

甲型溶血性鏈球菌α溶血。草綠色鏈球菌、肺炎鏈球菌等乙型溶血性鏈球菌β溶血?；撔枣溓蚓?、無(wú)乳鏈球菌等丙型鏈球菌γ溶血。牛鏈球菌

Lancefield血清學(xué)分類A、B、C、D……20群，最常見A群

兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求較高，普通培養(yǎng)基中不能生長(zhǎng)，在血瓊脂平板上生長(zhǎng)良好。最適溫度37℃，最適pH7.4～7.6。菌落小、圓形、凸起，表面光滑濕潤(rùn)，邊緣整齊，灰白色、半透明或不透明，周圍有α、β、γ三種不同的溶血。(二)培養(yǎng)特性肺炎鏈球菌：菌落扁平，中央呈臍狀凹陷，α溶血。三、臨床意義（一）致病物質(zhì)細(xì)菌表面結(jié)構(gòu)M蛋白、脂磷壁酸、莢膜外毒素鏈球菌溶血素O（SLO）、鏈球菌溶血素S（SLS）、致熱外毒素（紅疹毒素）侵襲性酶類鏈激酶、鏈道酶、透明質(zhì)酸酶等A群鏈球菌(化膿性鏈球菌)

約占臨床上鏈球菌感染的90%。（1）化膿性感染皮膚軟組織感染癰、蜂窩織炎、膿皰瘡、丹毒、淋巴結(jié)炎、醫(yī)源性傷口感染

（二）所致疾病組織器官及全身性感染扁桃體炎、急性咽炎、咽峽炎、中耳炎、乳突炎和產(chǎn)后感染等。（2）毒素性疾病

猩紅熱（3）變態(tài)反應(yīng)性疾病

急、慢性風(fēng)濕熱和急性腎小球腎炎等。以A群12型多見。扁桃體炎猩紅熱乳突炎2.B群鏈球菌（無(wú)乳鏈球菌）新生兒敗血癥和腦膜炎的主要病原菌。3.草綠色鏈球菌（α鏈球菌）亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎的常見病原菌。4.肺炎鏈球菌大葉性肺炎、支氣管肺炎、化膿性腦膜炎、鼻竇炎、中耳炎等。四、微生物檢驗(yàn)（一）檢驗(yàn)程序

（二）標(biāo)本采集

根據(jù)病變部位不同，采集相應(yīng)標(biāo)本。痰液、血液、腦脊液等（三）檢驗(yàn)方法

1.顯微鏡檢查除血液標(biāo)本外，其他標(biāo)本均可直接涂片作革蘭染色檢查。肺炎鏈球菌腦脊液涂片化膿性鏈球菌膿汁涂片2.分離培養(yǎng)

血液標(biāo)本增菌培養(yǎng)分離培養(yǎng)（血平板）37℃18～24h

一般標(biāo)本分離培養(yǎng)（血平板）3.鑒定（1）Lancefield血清學(xué)分群（2）化膿性鏈球菌鑒定桿菌肽敏感

（3）無(wú)乳鏈球菌鑒定CAMP試驗(yàn)＋馬尿酸鈉試驗(yàn)＋（4）D群鏈球菌膽汁七葉苷試驗(yàn)＋65g／LNaCl耐鹽試驗(yàn)－（5）肺炎鏈球菌鑒別菊糖＋Optochin敏感試驗(yàn)＋膽汁溶菌試驗(yàn)＋莢膜腫脹試驗(yàn)＋草綠色鏈球菌與肺炎鏈球菌的鑒別菌名細(xì)菌形態(tài)菌落膽汁溶菌試驗(yàn)Optochin敏感試驗(yàn)菊糖分解莢膜腫脹小鼠毒力肺炎鏈球菌矛頭狀，成雙，有莢膜梢大，扁平，濕潤(rùn)，臍狀+++++草綠色鏈球菌圓形，鏈狀，無(wú)莢膜較小，凸起，稍干，圓形－－－－－腸球菌

Enterococcus

一、分類

1984年從鏈球菌屬分離出來(lái)。Bergy’s分類19種糞腸球菌、鳥腸球菌、屎腸球菌等Lancefield血清學(xué)分群D群二、細(xì)菌特性(一)形態(tài)染色

革蘭陽(yáng)性球菌，單個(gè)、成雙或呈短鏈狀排列。無(wú)芽胞、無(wú)莢膜，個(gè)別菌種有稀疏鞭毛。(二)培養(yǎng)特性

與鏈球菌相似。兼性厭氧，厭氧要求較高，在血瓊脂平板上形成較小、灰白色、濕潤(rùn)、凸起、α、β或γ溶血。(三)生化反應(yīng)觸酶試驗(yàn)－膽汁七葉苷試驗(yàn)＋65g/L氯化鈉生長(zhǎng)試驗(yàn)＋吡咯烷酮芳基酰胺酶（PYR）試驗(yàn)＋二、臨床意義

人類腸道和女性生殖道的正常菌群。醫(yī)院感染最常見的革蘭陽(yáng)性球菌，僅次于金黃色葡萄球菌。最多見于尿路感染，其次為腹腔和盆腔等部位的創(chuàng)傷和外科手術(shù)后感染。四、微生物檢驗(yàn)（一）檢驗(yàn)程序

膿液、尿液、穿刺液

初報(bào)挑選可疑菌落

血液涂片染色分離培養(yǎng)增菌培養(yǎng)（5％CO2）（血平板、5％CO2）(葡萄糖肉湯等)鑒定試驗(yàn)

PYR試驗(yàn)?zāi)懼呷~苷試驗(yàn)6.5％NaCl生長(zhǎng)試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)（二）標(biāo)本采集

血、尿、創(chuàng)傷標(biāo)本和其他拭子。（三）檢驗(yàn)方法1.顯微鏡檢查除血液標(biāo)本外，其他標(biāo)本均可直接涂片作革蘭染色檢查。2.分離培養(yǎng)

血液標(biāo)本增菌培養(yǎng)分離培養(yǎng)（血平板）37℃18～24h

一般標(biāo)本分離培養(yǎng)（血平板）3.鑒定

腸球菌與D群鏈球菌的鑒別Lancefield血清學(xué)鑒定膽汁七葉苷65g/L氯化鈉生長(zhǎng)PYR45℃生長(zhǎng)腸球菌屬D群＋＋＋＋D群鏈球菌D群＋－－－奈瑟菌屬和布蘭漢菌屬一、分類

（一）奈瑟菌屬(Neisseria)共11個(gè)種，腦膜炎奈瑟菌(N.merningitidis)和淋病奈瑟菌(N.gonorrhoeae)為最重要的病原菌。（二）布蘭漢菌亞屬（subgenusBranhamella）

莫拉菌屬（Moraxella）布蘭漢菌亞屬（subgenusBranhamella）共4個(gè)種，僅卡他布蘭漢菌（M.(B.)catarrhalis）對(duì)人類有致病性。二、細(xì)菌特性（一）形態(tài)染色革蘭陰性球菌，腎形、成雙排列，凹面相對(duì)。標(biāo)本直接涂片鏡檢，可位于中性粒細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)、外。無(wú)鞭毛、無(wú)芽胞，新分離株多有莢膜和菌毛。腦膜炎奈瑟菌卡他布蘭漢菌淋病奈瑟菌(二)培養(yǎng)特性1.腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌專性需氧，初次分離培養(yǎng)需要5％～10％CO2。營(yíng)養(yǎng)要求高，最適培養(yǎng)基為巧克力瓊脂平板。菌落較小，圓形凸起、表面光滑濕潤(rùn)、邊緣整齊、透明或半透明、無(wú)色或呈灰白色，似露滴狀，不溶血。有自溶酶。腦膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌專性需氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基上即可生長(zhǎng)。菌落灰白色或紅棕色、光滑、圓形凸起、不透明、不溶血；培養(yǎng)48h，菌落表面干燥，堅(jiān)韌，不平，邊緣不繁齊；如用接種環(huán)推移，整個(gè)菌落可移動(dòng)。

2.卡他布蘭漢菌（三）生化反應(yīng)

三種細(xì)菌均為氧化酶＋、觸酶＋。奈瑟菌和卡他布蘭漢菌的主要生化反應(yīng)菌種氧化酶觸酶葡萄糖麥芽糖蔗糖硝酸鹽還原DNA酶腦膜炎奈瑟菌＋＋＋＋－－－淋病奈瑟菌＋＋＋－－－－卡他布蘭漢菌＋＋－－－＋＋（四）抗原結(jié)構(gòu)腦膜炎奈瑟菌抗原結(jié)構(gòu)模式圖淋病奈瑟菌抗原結(jié)構(gòu)模式圖（五）抵抗力

奈瑟菌的抵抗力非常弱，對(duì)冷熱、干燥、化學(xué)消毒劑均非常敏感?？ㄋ继m漢菌的抵抗力較強(qiáng)二、臨床意義（一）淋病奈瑟菌1.致病物質(zhì)：菌毛、外膜蛋白、內(nèi)毒素等。2.所致疾病人類是淋病奈瑟菌的唯一宿主。性傳播疾病——淋病淋球菌性結(jié)膜炎淋菌性關(guān)節(jié)炎、敗血癥、腦膜炎（偶見）

（二）腦膜炎奈瑟菌1.致病物質(zhì)：莢膜、菌毛、內(nèi)毒素2.所致疾病流行性腦脊髓膜炎皮下出血（出血性紫癜）敗血癥休克和DIC（三）卡他布蘭漢菌

1.致病物質(zhì)：內(nèi)毒素2.所致疾病人類和其他動(dòng)物上呼吸道的正常寄生菌之一，當(dāng)機(jī)體抵抗力下降時(shí)，引起下呼吸道感染和結(jié)膜炎、中耳炎、鼻竇炎、支氣管炎，偶爾引起菌血癥、心內(nèi)膜炎、膿胸、腦膜炎、尿道炎等。

（一）檢驗(yàn)程序

四、微生物檢驗(yàn)（二）標(biāo)本采集標(biāo)本采集后立即送檢，最好床邊接種。腦膜炎奈瑟菌咽拭子、血液、腦脊液、皮膚出血淤斑滲出物淋病奈瑟菌女性：尿道或陰道分泌物；男性：尿道分泌物3.

卡他布蘭漢菌痰液或支氣管灌洗液1.顯微鏡檢查除血液標(biāo)本外，其他標(biāo)本均可直接涂片作革蘭染色檢查。

腦脊液標(biāo)本直接涂片