《醫(yī)學(xué)試驗動物學(xué)》試驗課醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第1頁試驗一大、小鼠給藥、采

血、麻醉和解剖醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第2頁試驗?zāi)繕?.掌握大小鼠慣用給藥方法和采血技術(shù)2.掌握大小鼠麻醉方法和解剖步驟3.熟悉大小鼠解剖結(jié)構(gòu)

醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第3頁小鼠抓取和固定醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第4頁醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第5頁注意點抓取小鼠時動作要快速，要輕預(yù)防被小鼠轉(zhuǎn)過頭咬，抓其頸后皮膚要多假如被咬，應(yīng)馬上擠出血液，清水沖洗醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第6頁大鼠抓取與固定醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第7頁小鼠灌胃（給藥方法之一）將試驗小鼠徒手固定灌胃針從嘴角處插入口腔內(nèi)，緊貼咽后壁插入食道（1ml注射器，深度大約為3cm）推進針管給藥（生理鹽水）注意不要插入氣管，不要抓太緊以致小鼠窒息死亡醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第8頁醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第9頁小鼠尾靜脈注射（給藥方法之二）固定器固定小鼠消毒尾部，擴張血管，左右兩側(cè)靜脈將尾巴成一個適宜注射角度，1ml注射器平行向心方向刺入靜脈血管干棉球壓迫止血注意排除氣泡注射點由尾部遠端尾靜脈醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第10頁醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第11頁小鼠眼底靜脈叢采血一人徒手固定小鼠于桌面上，使眼球充分向外突出將注射器針頭從內(nèi)眼角位置插入眼球和眼眶之間，進針約0.5cm（1ml注射器）另一人慢慢抽動針管采血注意要將小鼠固定好，預(yù)防其頭動醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第12頁小鼠麻醉方法腹腔麻醉：進針點為右下腹腔，進針角度為與身體成45度，深度約1cm。麻藥：麻醉藥為3.5%水合氯醛，劑量按小鼠體重0.1ml/10g，20g小鼠為0.2ml醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第13頁小鼠心臟采血右下腹腔麻醉（麻醉藥為3.5%水合氯醛，劑量按0.1ml/10g)待其麻醉后，仰臥位固定在解剖板上胸骨左側(cè)，腋窩平行線下2-3肋骨間，小鼠心搏動最強處斜行刺入（1ml注射器）遲緩抽動針管采血取血量多時采?。ㄒ粯舆m合用于大鼠）醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第14頁大鼠心臟采血麻醉：右下腹腔，麻醉藥為33.5%水合氯醛，劑量按大鼠體重0.1ml/10g，心臟采血方法同小鼠醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第15頁大鼠心臟采血醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第16頁大致解剖觀察及繪圖1.將SD大鼠用33.5%水合氯醛腹腔麻醉，按0.1ml/10g體重。

2.待大鼠麻醉后，腹部朝上固定于解剖板。

3.用10cm剪刀從下腹部向上剪開皮膚，打開腹腔，觀察腹腔內(nèi)臟器，觀察大鼠肝臟時尤其注意大鼠無膽囊。

4.用14cm剪刀打開胸腔，觀察胸腔臟器。

5.依據(jù)大致解剖所見，繪圖。醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第17頁解剖觀察醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第18頁操作項目小鼠：灌胃、尾靜脈注射、眼底靜脈叢采血大鼠：心臟采血*、麻醉后解剖觀察醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第19頁試驗二

1.模擬腫瘤（組織塊）移植

2.裸鼠與正常小鼠免疫器官比較

醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第20頁試驗?zāi)繕肆私庠囼灺阈∈蠛蚄M鼠胸腔結(jié)構(gòu)了解正常胸腺結(jié)構(gòu)與不增殖胸腺基形態(tài)掌握正確胸腺摘除方式掌握組織塊皮下移植基本技術(shù)醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第21頁試驗原理哺乳動物胸腺是T淋巴細胞分化成熟場所，而T淋巴細胞是參加宿主對異體組織或細胞排斥主要成份，裸鼠胸腺原基從第三咽囊起不能發(fā)育，所以，裸鼠囊狀很小胸腺殘基保持終生。胸腺不增殖造成成熟T淋巴細胞數(shù)大量降低，其結(jié)果是裸鼠機體不能排斥同種異體和異種間組織器官移植。人類腫瘤能在裸鼠體內(nèi)生長，使裸鼠作為一個疾病模型載體，廣泛地利用于研究人類移植性腫瘤生長和轉(zhuǎn)移。醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第22頁影響被移植動物組織或細胞成活原因組織相容性宿主對移植物血供供體組織或細胞活性其它原因醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第23頁模擬移植物選擇腎臟組織是哺乳動物中血供很好、活力較強組織醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第24頁試驗步驟1(麻醉解剖小鼠）分別將裸鼠和KM鼠腹腔注射3.5%水合氯醛，按0.1ml/10g體重。待小鼠麻醉后，腹部朝上固定于小鼠固定板上。以3%碘酒棉球和75%酒精棉球進行皮膚消毒；同時，對裸鼠腋部進行消毒。用直頭剪刀于KM小鼠生殖口上端切一小口，沿腹部兩側(cè)作弧型切開，直至胸膈肌根部。醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第25頁試驗步驟2(觀察胸腺)觀察膈肌形狀后，于兩側(cè)根部分別切一小口，將膈肌橫向切開，絞斷肋骨，直至鎖骨，然后掀起胸骨，暴露整個胸腔。直視心臟，在心臟上部，主動脈弓處，有兩片乳白色蝴蝶狀小片，即為胸腺。醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第26頁試驗步驟3（取腎臟組織）用圓頭鑷將腸道撥向?qū)?cè)，暴露腎臟。用眼科剪刀取下腎臟，剝?nèi)ツI包膜，放入盛有生理鹽水培養(yǎng)皿中。用剪刀將腎臟分解為若干2*3mm組織小塊，取邊緣整齊、色澤紅潤為佳。將一小塊腎組織放入套筒針內(nèi)備用。醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第27頁試驗步驟4（組織移植）選取組織目標區(qū)域，慣用區(qū)域為肋側(cè)（近腋窩處）。在離目標區(qū)域中心點1-2cm處，用眼科小剪刀作一2-3mm切口。用套筒針在切口處刺入皮下直至目標中心區(qū)域，將組織塊推入，并快速拔出。醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第28頁試驗步驟5麻醉、解剖裸鼠，與KM鼠比較胸腺區(qū)分裸鼠胸腺只剩殘基，基本上看不到醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第29頁醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第30頁醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)專家講座第31頁試驗匯報要求:完成試驗指導(dǎo)上第3