蛋白質(zhì)是由許多不一樣α-氨基酸按一定序列經(jīng)過酰胺鍵（肽鍵）縮合而成，含有較穩(wěn)定構(gòu)象并含有一定生物功效大分子。新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第1頁一、蛋白質(zhì)生物學(xué)意義1.生物體組成成份2.酶3.運輸4.運動5.抗體6.干擾素7.遺傳信息控制8.細(xì)胞膜通透性9.高等動物記憶、識別機構(gòu)新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第2頁二、蛋白質(zhì)元素組成C（50~55%）、H（6~8%）、O（20~23%）、N（15~18%）、S（0~4%）、…N含量平均為16%——凱氏（Kjadehl）定氮法理論基礎(chǔ)新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第3頁三、蛋白質(zhì)氨基酸組成氨基酸是蛋白質(zhì)基本組成單位。從細(xì)菌到人類，全部蛋白質(zhì)都由20種標(biāo)準(zhǔn)氨基酸（20standardaminoacids)組成。（一）氨基酸結(jié)構(gòu)通式：19種氨基酸含有一級氨基（-NH3+）和羧基（-COOH）結(jié)合到α碳原子（Cα），同時結(jié)合到（Cα）上是H原子和各種側(cè)鏈（R）；Pro含有二級氨基（α-亞氨基酸）新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第4頁不帶電形式

H2N—Cα—HCOOHR+H3N—Cα—HCOO-R兩性離子形式Cα如是不對稱C（除Gly），則：含有兩種立體異構(gòu)體[D-型和L-型]2.含有旋光性[左旋（-）或右旋（+）]新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第5頁（二）氨基酸分類依據(jù)R化學(xué)結(jié)構(gòu)（1）脂肪族氨基酸：1）疏水性：Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Met、Cys；2）極性：Arg、Lys、Asp、Glu、Asn、Gln、Ser、Thr（2）芳香族氨基酸：Phe、Tyr（3）雜環(huán)氨基酸：Trp、His（4）雜環(huán)亞氨基酸：Pro依據(jù)R極性（1）極性氨基酸：1）不帶電：Ser、Thr、Asn、Gln、Tyr、Cys；2）帶正電：His、Lys、Arg；3）帶負(fù)電：Asp、Glu（2）非極性氨基酸：Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Phe、Met、Pro、Trp新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第6頁（三）氨基酸主要理化性質(zhì)普通物理性質(zhì)無色晶體，熔點極高（200℃以上），不一樣味道；水中溶解度差異較大（極性和非極性），不溶于有機溶劑。兩性解離和等電點氨基酸在水溶液中或在晶體狀態(tài)時都以離子形式存在，在同一個氨基酸分子上帶有能放出質(zhì)子—NH3+正離子和能接收質(zhì)子—COO-負(fù)離子，為兩性電解質(zhì)。3.化學(xué)性質(zhì)（1）與茚三酮反應(yīng)：Pro產(chǎn)生黃色物質(zhì)，其它為藍(lán)紫色。在570nm（藍(lán)紫色）或440nm（黃色）定量測定（幾μg）。新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第7頁調(diào)整氨基酸溶液pH，使氨基酸分子上—+NH3基和—COO-基解離程度完全相等時，即所帶凈電荷為零，此時氨基酸所處溶液pH值稱為該氨基酸等電點（pI）。H3N—CH—COOHR+在酸性溶液中氨基酸（pH＜pI）H3N—CH—COO-R+在晶體狀態(tài)或水溶液中氨基酸（pH=pI）H2N—CH—COO-R在堿性溶液中氨基酸（pH＞pI）（當(dāng)氨基酸相互連接成蛋白質(zhì)時，只有其側(cè)鏈基團(tuán)和末端α-氨基，α-羧基是能夠離子化。新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第8頁氨基酸等電點確實定：1）酸堿滴定（滴定曲線）2）依據(jù)pK值（該基團(tuán)在此pH二分之一解離）計算：等電點等于兩性離子兩側(cè)pK值算術(shù)平均數(shù)。pI=————pK1+pK22or（pI=————）pK2+pK32新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第9頁（2）與甲醛反應(yīng)：氨基酸甲醛滴定法R—CH—COO-NH3+R—CH—COO-NH2+H+OH-中和滴定HCHOR—CH—COO-NHCH2OHHCHOR—CH—COO-N(CH2OH)2新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第10頁（3）與2,4-二硝基氟苯(DNFB)反應(yīng)NO2FO2N+HN—CH—COOHRNO2O2NHN—CH—COOHR+HF弱堿性DNP-氨基酸新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第11頁H2N—CH—COOH+RNCH3CH3O=S=OCl5-二甲氨基萘磺酰氯（DNS-Cl）pH9.740℃NCH3CH3O=S=OHN—CH—COOHRDNS-氨基酸取代DNFB測定蛋白質(zhì)N端氨基酸，靈敏度高新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第12頁（4）與異硫氰酸苯酯（PITC）反應(yīng)—N=C=S+N—CH—COOHHHRPITC—N—C—N—CH—COOHHHRSPTC-氨基酸—N—CHRSNCCOPTH-氨基酸pH8.3無水HF重復(fù)測定多肽鏈N端氨基酸排列次序，設(shè)計出“多肽次序自動分析儀”新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第13頁（5）與熒光胺反應(yīng)：依據(jù)熒光強度測定氨基酸含量（ng級）。激發(fā)波長λx=390nm，發(fā)射波長λm=475nm。（6）與5,5′-雙硫基-雙（2-硝基苯甲酸）反應(yīng)：新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第14頁H2N—CHCH2SSHNO2HOOCSNO2COOHCOOH+SSNO2NO2HOOCCOOHH2N—CH—COOH+CH2SHpH8.0硫代硝基苯甲酸測定Cys含量（pH8.0λ412nm摩爾消光系數(shù)ε=13600）新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第15頁四、肽——一個氨基酸α-羧基和另一個氨基酸α-氨基脫水縮合而成化合物。氨基酸之間脫水后形成鍵稱肽鍵（酰胺鍵）。當(dāng)兩個氨基酸經(jīng)過肽鍵相互連接形成二肽，在一端依然有游離氨基和另一端有游離羧基，每一端連接更多氨基酸。氨基酸能以肽鍵相互連接形成長、不帶支鏈寡肽（25個氨基酸殘基以下）和多肽（多于25個氨基酸殘基）。多肽依然有游離α-氨基和α-羧基。肽鏈寫法：游離α-氨基在左，游離α-羧基在右，氨基酸之間用“-”表示肽鍵。H2N-絲氨酸-亮氨酸-苯丙氨酸-COOHSer-Leu-Phe（S-L-F）新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第16頁（一）谷光甘肽（GSH）H2N-CHCH2CH2CO—COOHγ-GluNHCHCO—CH2SHCysNHCH2COOHGly2GSHGSSG（二）催產(chǎn)素和升壓素均為9肽，第3位和第9位氨基酸不一樣。催產(chǎn)素使子宮和乳腺平滑肌收縮，含有催產(chǎn)和促使乳腺排乳作用。升壓素促進(jìn)血管平滑肌收縮，升高血壓，降低排尿。新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第17頁（三）促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）39肽，活性部位為第4~10位7肽片段：Met-Glu-His-Phe-Arg-Trp-Gly。（四）腦肽腦啡肽含有強烈鎮(zhèn)痛作用（強于嗎啡），不上癮。Met-腦啡肽Tyr-Gly-Gly-Phe-MetLeu-腦啡肽Tyr-Gly-Gly-Phe-Leuβ-內(nèi)啡肽（31肽）含有較強嗎啡樣活性與鎮(zhèn)痛作用。新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第18頁（五）膽囊收縮素（六）胰高血糖素由胰島α-細(xì)胞分泌（β-細(xì)胞分泌胰島素），29肽。胰高血糖素調(diào)整維持血糖濃度。新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第19頁五、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)是氨基酸以肽鍵相互連接線性序列。在蛋白質(zhì)中，多肽鏈折疊形成特殊形狀（構(gòu)象）（conformation）。在結(jié)構(gòu)中，這種構(gòu)象是原子三維排列，由氨基酸序列決定。蛋白質(zhì)有四種結(jié)構(gòu)層次：一級結(jié)構(gòu)（primary），二級結(jié)構(gòu)（secondary），三級結(jié)構(gòu)（tertiary）和四級結(jié)構(gòu)（quaternary）（不總是有）。（一）蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)（化學(xué)結(jié)構(gòu)）一級結(jié)構(gòu)就是蛋白質(zhì)分子中氨基酸殘基排列次序，即氨基酸線性序列。在基因編碼蛋白質(zhì)中，這種序列是由mRNA中核苷酸序列決定。一級結(jié)構(gòu)中包含共價鍵（covalentbonds）主要指肽鍵（peptidebond）和二硫鍵（disulfidebond）新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第20頁HPhe-Val-Asn-Gln-His-Leu-Cys-Gly-Ser-His-Leu-Val-Glu-Ala-Leu-Tyr–Leu-Val-Cys-GlyGlu-Arg-Gly-Phe-Phe-Tyr-Thr-Pro-Lys-AlaOHB鏈15710151920212530HGly-Ile-Val-Glu-Gln-Cys-Cys-Ala-Ser-Val-Cys-Ser-Leu-Tyr-Gln-Leu-Glu-Asn-Tyr-Cys-AsnOH15102015A鏈711621SSSS牛胰島素化學(xué)結(jié)構(gòu)—S————S——新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第21頁一級結(jié)構(gòu)確定標(biāo)準(zhǔn)：將大化小，逐段分析，制成兩套肽片段，找出重合位點，排出肽前后位置，最終確定蛋白質(zhì)完整序列。當(dāng)前往往采取從待測蛋白質(zhì)基因序列反推出蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)。（二）蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)（構(gòu)象、高級結(jié)構(gòu)）——蛋白質(zhì)分子中全部原子在三維空間排列分布和肽鏈走向。新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第22頁因為羰基碳-氧雙鍵靠攏，允許存在共振結(jié)構(gòu)（resonancestructure），碳與氮之間肽鍵有部分雙鍵性質(zhì)，由CO-NH組成肽單元展現(xiàn)相正確剛性和平面化，肽鍵中4個原子和它相鄰兩個α-碳原子多處于同一個平面上。Cα—C—N—CαOH—CN—O-H+CαCα氨基H與羰基O幾乎總是呈反式（trans）而不是順式（cis）。蛋白質(zhì)構(gòu)象穩(wěn)定原因：1）酰胺平面；2）R影響。新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第23頁1.蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)——指蛋白質(zhì)多肽鏈本身折疊和盤繞方式（1）α-螺旋（α-helix）Pauling和Corey于1965年提出。結(jié)構(gòu)關(guān)鍵點：1）螺旋每圈有3.6個氨基酸，螺旋間距離為0.54nm，每個殘基沿軸旋轉(zhuǎn)100°。2）每個肽鍵羰基氧與遠(yuǎn)在第四個氨基酸氨基上氫形成氫鍵（hydrogenbond），氫鍵走向平行于螺旋軸，全部肽鍵都能參加鏈內(nèi)氫鍵形成?！狢—(NH—C—CO)3N—OHHR3.613(ns)新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第24頁3)R側(cè)鏈基團(tuán)伸向螺旋外側(cè)。RRRRRRRRR螺旋橫截面4）ProN上缺乏H，不能形成氫鍵，經(jīng)常出現(xiàn)在α-螺旋端頭，它改變多肽鏈方向并終止螺旋。新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第25頁（2）β-折疊結(jié)構(gòu)（β-pleatedsheet）是一個肽鏈相當(dāng)伸展結(jié)構(gòu)。肽鏈按層排列，依靠相鄰肽鏈上羰基和氨基形成氫鍵維持結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。肽鍵平面性使多肽折疊成片，氨基酸側(cè)鏈伸展在折疊片上面和下面。CαCαCαCαCαCαRRRRRRNNCNNCCC平行反平行β-折疊片中，相鄰多肽鏈平行或反平行（較穩(wěn)定）。新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第26頁（3）β-轉(zhuǎn)角（β-turn）為了緊緊折疊成緊密球蛋白，多肽鏈經(jīng)常反轉(zhuǎn)方向，成發(fā)夾形狀。一個氨基酸羰基氧以氫鍵結(jié)合到相距第四個氨基酸氨基氫上。N—1CH—CC2CHN—HO=C3CHNC—4CH—NRRHOHRROHOβ-轉(zhuǎn)角經(jīng)常出現(xiàn)在連接反平行β-折疊片端頭。新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第27頁（4）自由回轉(zhuǎn)沒有一定規(guī)律渙散肽鏈結(jié)構(gòu)。酶活性部位。2.超二級結(jié)構(gòu)和結(jié)構(gòu)域超二級結(jié)構(gòu)是指若干相鄰二級結(jié)構(gòu)中構(gòu)象單元彼此相互作用，形成有規(guī)則，在空間上能識別二級結(jié)構(gòu)組合體。是蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)至三級結(jié)構(gòu)層次一個過渡態(tài)構(gòu)象層次。結(jié)構(gòu)域是球狀蛋白質(zhì)折疊單位。多肽鏈在超二級結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上深入繞波折疊成緊密近似球行結(jié)構(gòu)，含有部分生物功效。對于較大蛋白質(zhì)分子或亞基，多肽鏈往往由兩個以上結(jié)構(gòu)域締合而成三級結(jié)構(gòu)。新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第28頁3.蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)——指多肽鏈上全部原子（包含主鏈和側(cè)鏈）在三維空間分布。肌紅蛋白4.蛋白質(zhì)四級結(jié)構(gòu)——多肽亞基（subunit）空間排布和相互作用。亞基間以非共價鍵連接。血紅蛋白新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第29頁共價鍵次級鍵化學(xué)鍵肽鍵一級結(jié)構(gòu)氫鍵二硫鍵二、三、四級結(jié)構(gòu)疏水鍵鹽鍵范德華力三、四級結(jié)構(gòu)（三）蛋白質(zhì)分子中共價鍵與次級鍵新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第30頁肌紅蛋白是1957年由JohnKendrew用X射線晶體分析法測定有三維結(jié)構(gòu)第一個蛋白質(zhì)。它是經(jīng)典球形蛋白質(zhì)，高度折疊成緊密結(jié)構(gòu)，疏水氨基酸殘基大部分埋藏在分子內(nèi)部，極性殘基在表面。肌紅蛋白中有8條α-螺旋。由多肽折疊形成疏水空隙內(nèi)是血紅素輔基，經(jīng)過肽鏈上His殘基與肌紅蛋白分子內(nèi)部相連，它對肌紅蛋白生物活性是必需（與O2結(jié)合）。新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第31頁六、蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與功效關(guān)系蛋白質(zhì)分子含有多樣生物學(xué)功效，需要一定化學(xué)結(jié)構(gòu)，還需要一定空間構(gòu)象。（一）蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)與功效關(guān)系1.種屬差異蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)種屬差異十分顯著，但相同部分氨基酸對蛋白質(zhì)功效起決定作用。依據(jù)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)上差異，能夠斷定它們在親緣關(guān)系上遠(yuǎn)近。2.分子病——蛋白質(zhì)分子一級結(jié)構(gòu)氨基酸排列次序與正常有所不一樣遺傳病。新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第32頁鐮狀細(xì)胞貧血（sick-cellanemia）從患者紅細(xì)胞中判定出特異鐮刀型或月牙型細(xì)胞。β-鏈1234567Hb-AVal-His-Leu-Thr-Pro-Glu-Lys…Hb-SVal-His-Leu-Thr-Pro-Val-Lys…Val取代Glu含氧-HbAO2O2粘性疏水斑點含氧HbS脫氧HbS疏水位點血紅蛋白分子凝集新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第33頁（二）蛋白質(zhì)構(gòu)象與功效關(guān)系別（變）構(gòu)作用：含亞基蛋白質(zhì)因為一個亞基構(gòu)象改變而引發(fā)其余亞基和整個分子構(gòu)象、性質(zhì)和功效發(fā)生改變作用。因別構(gòu)而產(chǎn)生效應(yīng)稱別構(gòu)效應(yīng)。血紅蛋白是別構(gòu)蛋白，O2結(jié)合到一個亞基上以后，影響與其它亞基相互作用。肌紅蛋白血紅蛋白在肺部O2壓力在毛細(xì)血管中O2壓力飽和度00.5120406080100120O2壓力新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第34頁24681012140.51.01.52.0OH-加入當(dāng)量pHpK1pIpK2（3）（2）（1）Gly滴定曲線OH-OH-+H3N—C—COOHHH（1）+H3N—C—COO-HH（2）H2N—C—COO-HH（3）Gly解離作用新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第35頁七、蛋白質(zhì)性質(zhì)（一）蛋白質(zhì)相對分子量蛋白質(zhì)相對分子量在10000~1000000之間。測定分子量主要方法有滲透壓法、超離心法、凝膠過濾法、聚丙烯酰胺凝膠電泳等。最準(zhǔn)確可靠方法是超離心法（Svedberg于1940年設(shè)計）：蛋白質(zhì)顆粒在25~50*104g離心力作用下從溶液中沉降下來。沉降系數(shù)（s）：單位（cm）離心場里沉降速度。

s=————vω2xv=沉降速度（dx/dt）ω=離心機轉(zhuǎn)子角速度（弧度/s）x=蛋白質(zhì)界面中點與轉(zhuǎn)子中心距離（cm）沉降系數(shù)單位慣用S，1S=1×10-13（s）新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第36頁蛋白質(zhì)分子量（M）與沉降系數(shù)（s）關(guān)系M=——————RTsD（1－Vρ）R——氣體常數(shù)（8.314×107ergs·mol-1·度-1）T——絕對溫度D——擴散常數(shù)（蛋白質(zhì)分子量很大，離心機轉(zhuǎn)速很快，則忽略不計）V——蛋白質(zhì)微分比容（m3·g-1）ρ——溶劑密度（20℃，g·ml-1）s——沉降系數(shù)新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第37頁（二）蛋白質(zhì)兩性電離及等電點蛋白質(zhì)在其等電點偏酸溶液中帶正電荷，在偏堿溶液中帶負(fù)電荷，在等電點pH時為兩性離子。電泳：帶電顆粒在電場中移動現(xiàn)象。分子大小不一樣蛋白質(zhì)所帶凈電荷密度不一樣，遷移率即異，在電泳時能夠分開。1.自由界面電泳：蛋白質(zhì)溶于緩沖液中進(jìn)行電泳。2.區(qū)帶電泳：將蛋白質(zhì)溶液點在浸了緩沖液支持物上進(jìn)行電泳，不一樣組分形成帶狀區(qū)域。（1）紙上電泳：用濾紙作支持物。新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第38頁（2）凝膠電泳：用凝膠（淀粉、瓊脂糖、聚丙烯酰胺）作支持物。1）圓盤電泳：玻璃管中進(jìn)行凝膠電泳。+—2）平板電泳：鋪有凝膠玻板上進(jìn)行電泳。-+新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第39頁等電聚焦電泳：當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)在其等電點時，凈電荷為零，在電場中不再移動。++－－－－+－－－－－5.06.07.0穩(wěn)定pH梯度5.06.07.0穩(wěn)定pH梯度通電++－－－－+－－－－－++－－－－+－－－－－++－－－－+－－－－－++－－－－+－－－－－新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第40頁（三）蛋白質(zhì)膠體性質(zhì)布郎運動、丁道爾現(xiàn)象、電泳現(xiàn)象，不能透過半透膜，含有吸附能力蛋白質(zhì)溶液穩(wěn)定原因：1）表面形成水膜（水化層）；2）帶相同電荷。++++++新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第41頁（四）蛋白質(zhì)沉淀反應(yīng)1.加高濃度鹽類（鹽析）：加鹽使蛋白質(zhì)沉淀析出。分段鹽析：調(diào)整鹽濃度，可使混合蛋白質(zhì)溶液中幾個蛋白質(zhì)分段析出。血清球蛋白（50%(NH4)2SO4飽和度），清蛋白（飽和(NH4)2SO4)。2.加有機溶劑3.加重金屬鹽4.加生物堿試劑單寧酸、苦味酸、鉬酸、鎢酸、三氯乙酸能沉淀生物堿，稱生物堿試劑。新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第42頁（五）蛋白質(zhì)變性天然蛋白質(zhì)受物理或化學(xué)原因影響，其共價鍵不變，但分子內(nèi)部原有高度規(guī)律性空間排列發(fā)生改變，致使其原有性質(zhì)發(fā)生部分或全部喪失，稱為蛋白質(zhì)變性。變性蛋白質(zhì)主要標(biāo)志是生物學(xué)功效喪失。溶解度降低，易形成沉淀析出，結(jié)晶能力喪失，分子形狀改變，肽鏈渙散，反應(yīng)基團(tuán)增加，易被酶消化。變性蛋白質(zhì)分子相互凝集為固體現(xiàn)象稱凝固。有些蛋白質(zhì)變性作用是可逆，其變性如不超出一定程度，經(jīng)適當(dāng)處理后，可重新變?yōu)樘烊坏鞍踪|(zhì)。新版蛋白質(zhì)化學(xué)專業(yè)知識講座第43頁反應(yīng)名稱試劑顏色反應(yīng)相關(guān)基團(tuán)有此反應(yīng)蛋白質(zhì)或氨基酸雙縮脲反應(yīng)NaOH、CuSO2紫色或粉紅色二個以上肽鍵全部蛋白質(zhì)米倫反應(yīng)HgNO3、Hg(NO3)2及HNO3混合物紅色

Tyr黃色反應(yīng)濃HNO3及NH3黃色、橘色

Tyr、Phe乙醛酸反應(yīng)(Hopking-Cole反應(yīng))乙醛酸試劑及濃H2SO4紫色

Trp坂口反應(yīng)(Sakaguchi反應(yīng))α-萘酚、NaClO紅色胍基Arg酚試劑反應(yīng)(Folin-Cioculteu反應(yīng))堿性CuSO4及磷鎢酸-鉬酸藍(lán)色酚基、吲哚基Tyr茚三酮反應(yīng)茚三酮藍(lán)色自由氨基及羧基α