流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第1頁(yè)-2-流式細(xì)胞儀和流式細(xì)胞術(shù)－概述流式細(xì)胞儀工作原理和測(cè)量參數(shù)流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和科研中應(yīng)用免疫學(xué)檢測(cè)和科研應(yīng)用血液病檢測(cè)和科研應(yīng)用腫瘤學(xué)檢測(cè)和科研應(yīng)用流式細(xì)胞儀基礎(chǔ)工作原理以及在基礎(chǔ)和臨床科研中應(yīng)用流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第2頁(yè)-3-一、流式細(xì)胞儀和流式細(xì)胞術(shù)基礎(chǔ)概念流式細(xì)胞儀(FlowCytometer，F(xiàn)CM):是集合光電子物理，光電測(cè)量技術(shù)，液流技術(shù)，計(jì)算機(jī)技術(shù)等當(dāng)代高科技技術(shù)為一體細(xì)胞測(cè)量和分析儀器。流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第3頁(yè)-4-一、流式細(xì)胞儀和流式細(xì)胞術(shù)基礎(chǔ)概念流式細(xì)胞術(shù)(FlowCytometry，F(xiàn)CM):是應(yīng)用流式細(xì)胞儀，對(duì)處于快速流動(dòng)液體中細(xì)胞或生物顆粒進(jìn)行多參數(shù)、快速測(cè)量和定量分析，以及分選技術(shù)。流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第4頁(yè)-5-一、流式細(xì)胞儀和流式細(xì)胞術(shù)－特點(diǎn)多參數(shù)測(cè)量和分析（散射光和熒光）；快速測(cè)量和分析每秒可達(dá)1000-10000個(gè)細(xì)胞分選純度可達(dá)99%以上。獲取數(shù)據(jù)分析結(jié)果更含有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；通常測(cè)量對(duì)象如各種細(xì)胞細(xì)胞必須處于單個(gè)細(xì)胞懸液中。另外，也可測(cè)量微生物等生物顆粒，或者工合成微球非生物顆粒，流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第5頁(yè)-6-臺(tái)式機(jī)——FACSCalibur雙激光

488nm 635nm四熒光參數(shù)分選、濃縮系統(tǒng)流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第6頁(yè)7流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第7頁(yè)-8-大型機(jī)——FACSVantageSE科研型八熒光參數(shù)高速分選多路分選流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第8頁(yè)-9-

流式細(xì)胞儀與熒光顯微鏡比較

流式細(xì)胞儀熒光顯微鏡

流動(dòng)細(xì)胞靜止細(xì)胞樣本數(shù)量大數(shù)量少高速分選樣本難以再利用細(xì)胞群體特征量分布可揭示細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)信息流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第9頁(yè)-10-二、流式細(xì)胞儀工作原理和測(cè)量參數(shù)光路系統(tǒng)：

激光光源，光路系統(tǒng)（透鏡、濾光片）電子系統(tǒng)：光電倍增管（PMT），賠償電路液流系統(tǒng)：

鞘液系統(tǒng)，樣品流動(dòng)系統(tǒng)數(shù)據(jù)系統(tǒng)：計(jì)算機(jī)，數(shù)據(jù)測(cè)量和分析軟件。細(xì)胞分選系統(tǒng)（一）流式細(xì)胞儀結(jié)構(gòu)

流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第10頁(yè)-11-流式細(xì)胞儀－光路系統(tǒng)激光(Laser)是一個(gè)相干光源，它能提供單一波長(zhǎng)、單一方向、同時(shí)穩(wěn)定光照激光波長(zhǎng):488nm,635nm光搜集系統(tǒng)是由若干組透鏡,濾波片,小孔組成，將產(chǎn)生光信號(hào)引導(dǎo)至檢測(cè)器流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第11頁(yè)-12-光路系統(tǒng)流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第12頁(yè)-13-InjectorTip流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第13頁(yè)-14-InjectorTipFluorescencesignalsFocusedlaserbeamSheathfluid流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第14頁(yè)-15-流式細(xì)胞儀－光學(xué)系統(tǒng)激發(fā)光源與熒光標(biāo)識(shí)物流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第15頁(yè)-16-光學(xué)檢測(cè)信號(hào)流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第16頁(yè)-17-流式細(xì)胞儀光學(xué)系統(tǒng)FACSCalibur流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第17頁(yè)-18-流式細(xì)胞儀－液流系統(tǒng)流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第18頁(yè)-19-液流系統(tǒng)：鞘液系統(tǒng)＋樣品流動(dòng)系統(tǒng)流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第19頁(yè)-20-流式細(xì)胞儀電子系統(tǒng)

信號(hào)檢測(cè)和分析當(dāng)細(xì)胞攜帶熒光素,經(jīng)過(guò)激光照射區(qū),受到激發(fā)產(chǎn)生不一樣波長(zhǎng)、代表細(xì)胞內(nèi)不一樣物質(zhì)熒光信號(hào)熒光信號(hào)由光電接收器接收，轉(zhuǎn)變?yōu)殡娒}沖信號(hào)，電脈沖信號(hào)經(jīng)A/D轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號(hào)數(shù)字信號(hào)傳送到計(jì)算機(jī)，進(jìn)行儲(chǔ)存、作圖和統(tǒng)計(jì)分析流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第20頁(yè)-21-數(shù)據(jù)系統(tǒng)流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第21頁(yè)-22-（二）流式細(xì)胞儀可檢測(cè)細(xì)胞參數(shù)細(xì)胞結(jié)構(gòu)細(xì)胞大小細(xì)胞顆粒性程度細(xì)胞表面面積核漿百分比DNA含量與細(xì)胞周期RNA含量細(xì)胞功效細(xì)胞表面蛋白抗原細(xì)胞胞漿內(nèi)蛋白性抗原細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子細(xì)胞增殖細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度二、流式細(xì)胞儀工作原理和測(cè)量參數(shù)流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第22頁(yè)-23-（二）流式細(xì)胞儀可檢測(cè)細(xì)胞參數(shù)：

散射光信號(hào)前向角散射光（FSC,ForwardScatter）

入射光前向

(5)散射光信號(hào),可反應(yīng)：細(xì)胞相對(duì)大小及其表面積側(cè)向角散射光（SSC,SideScatter）

入射光90角散射光信號(hào)，可反應(yīng)：細(xì)胞顆粒性程度

（胞內(nèi)成份和結(jié)構(gòu)和表面結(jié)構(gòu)復(fù)雜性）流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第23頁(yè)-24-散射光信號(hào)前向角散射光－FSCFALSSensorLaser流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第24頁(yè)-25-散射光信號(hào)側(cè)向角散射光－SSCFALSSensor90LSSensorLaser流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第25頁(yè)-26-流式細(xì)胞基礎(chǔ)信息:“形態(tài)”流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第26頁(yè)-27-流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第27頁(yè)-28-外周全血細(xì)胞（紅細(xì)胞溶解后）

以散射光表示雙參數(shù)點(diǎn)圖流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第28頁(yè)-29-外周全血細(xì)胞（紅細(xì)胞溶解后）

以散射光表示雙參數(shù)點(diǎn)圖中性粒細(xì)胞單核細(xì)胞淋巴細(xì)胞流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第29頁(yè)-30-（二）流式細(xì)胞檢測(cè)細(xì)胞參數(shù):

特征信息－熒光（Fluorescence）信號(hào)熒光素吸收激光（激發(fā)光波長(zhǎng)）能量熒光素將吸收能量釋放，轉(zhuǎn)換為釋放較入射光波長(zhǎng)更長(zhǎng)光量子（發(fā)射光波長(zhǎng)）熒光素與特異抗體結(jié)合（熒光抗體）熒光抗體與細(xì)胞抗原結(jié)合越多，產(chǎn)生熒光信號(hào)越強(qiáng) 熒光素與細(xì)胞核酸結(jié)合，熒光強(qiáng)度反應(yīng)核酸含量流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第30頁(yè)-31-（二）流式細(xì)胞檢測(cè)細(xì)胞參數(shù):

特征信息－熒光（Fluorescence）信號(hào)Forwardscatter(FSC)Sidescatter(SSC)FL1（第一熒光）-FITC(異硫氰酸熒光素）FL2（第二熒光）-PE（藻紅蛋白）FL3（第三熒光）-PerCP,PeCy5等PL4（第四熒光）-APC（藻青蛋白）流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第31頁(yè)-32-熒光信號(hào)FluorescenceFALSSensorFluorescencedetector(PMT3,PMT4etc.)流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第32頁(yè)-33-流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第33頁(yè)-34-熒光信號(hào)雙色直接染色流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第34頁(yè)-35-（三）流式細(xì)胞儀分析數(shù)據(jù)常見(jiàn)圖形：

（二維）點(diǎn)陳圖(DotPlot)適合用于：雙參數(shù)分析流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第35頁(yè)-36-（三）流式細(xì)胞儀分析數(shù)據(jù)常見(jiàn)圖形：

直方圖(HistogramPlot)適合用于：?jiǎn)螀?shù)分析僅需要觀察某個(gè)熒光強(qiáng)度改變流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第36頁(yè)-37-流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞熒光標(biāo)識(shí)方法單標(biāo)：

一個(gè)單抗:FL1,FSC,SSC（三參數(shù)）雙標(biāo)：兩種單抗：FL1,FL1,FSC,SSC（四參數(shù)）三標(biāo)：三種單抗：FL1,FL2,FL3,FSC,SSC（五參數(shù)）四標(biāo)－四種熒光標(biāo)識(shí)抗體：四種單抗：FL1,FL2,FL3,FL4,FSC,SSC（六參數(shù)）流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第37頁(yè)-38-淋巴細(xì)胞亞群分析細(xì)胞凋亡

腫瘤學(xué)移植免疫三流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和科研中應(yīng)用血小板其它流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第38頁(yè)-39-淋巴細(xì)胞亞群分析流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第39頁(yè)-40-AdhesionMetabolic流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第40頁(yè)-41-流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第41頁(yè)-42-流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第42頁(yè)-43-

T淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)：

Tcells,Tsubsets,NKcells,Bcells流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第43頁(yè)-44-淋巴細(xì)胞亞群T淋巴細(xì)胞(CD3+)名稱功能CD3+CD4+輔助性/誘導(dǎo)性T細(xì)胞(Th/Ti)輔助和誘導(dǎo)細(xì)胞免疫和體液免疫CD3+CD4+CD29+CD3+CD4+CD29-輔助性T細(xì)胞(Th)誘導(dǎo)性T細(xì)胞(Ti)輔助細(xì)胞免疫和體液免疫誘導(dǎo)細(xì)胞免疫和體液免疫CD3+CD8+抑制性/殺傷性T細(xì)胞(Ts/Tc)抑制免疫反應(yīng)/殺傷異源細(xì)胞CD3+CD8+CD28-CD3+CD4+CD29-抑制性T細(xì)胞(Ts)殺傷性T細(xì)胞(Tc)抑制細(xì)胞和體液免疫細(xì)胞毒性T細(xì)胞CD3+CD4+CD8+活化T細(xì)胞在T細(xì)胞惡性增生時(shí)升高CD3+CD4-CD8-有調(diào)整功效T細(xì)胞,其表示/T細(xì)胞受體(TCR/)CD4+/CD8+比值CD45RA+CD45RO-幼稚/靜止T淋巴細(xì)胞當(dāng)免疫系統(tǒng)沒(méi)有能力更新輔助性或抑制性/細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞祖細(xì)胞時(shí)此細(xì)胞亞群較低CD45RA-CD45RO+記憶性T淋巴細(xì)胞病菌感染時(shí)升高,但在慢性病毒感染,如HIV患者中降低CD45RA+CD45RO+活化T細(xì)胞,感染時(shí)升高感染時(shí)升高流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第44頁(yè)-45-淋巴細(xì)胞亞群活化T淋巴細(xì)胞名稱功能CD3+HLA-DR+活化T細(xì)胞CD4+HLA-DR+活化輔助性/誘導(dǎo)性T細(xì)胞CD8+HLA-DR+活化抑制性/殺傷性T細(xì)胞CD4+CD25+活化輔助性/誘導(dǎo)性T細(xì)胞CD8+CD25+CD8+CD38+HLA-DR+活化抑制性/殺傷性T細(xì)胞在病毒感染患者中增加;其增加意味著HIV患者預(yù)后較差B淋巴細(xì)胞(19+)CD19+CD23+活化B細(xì)胞過(guò)敏患者中升高CD19+CD5+在本身免疫性疾病中升高CD19+CD5+CD23+慢性B細(xì)胞白血病及單克隆B淋巴細(xì)胞NK細(xì)胞CD3+CD(16+56)+本身免疫性疾病時(shí)降低,而病毒感染時(shí)升高CD3+CD57+CMV(巨細(xì)胞病毒)感染強(qiáng)烈征兆流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第45頁(yè)-46-淋巴細(xì)胞亞群與疾病疾病CD3CD4CD8CD4/CD8NK本身免疫性疾病系統(tǒng)性紅斑狼瘡類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎本身免疫性溶血性貧血重癥肌無(wú)力免疫缺點(diǎn)病愛(ài)滋病病毒感染傳染性單核細(xì)胞增多癥慢性活動(dòng)性肝炎活動(dòng)性肝硬化腫瘤消化道癌,肝癌,肺癌再生障礙性貧血粒細(xì)胞降低癥流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第46頁(yè)-47-淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)意義疾病機(jī)理研究

疾病輔助診療移植后免疫檢測(cè)治療方案確實(shí)定及療效評(píng)價(jià)CD25高于正常值5-10%,表明即將或已發(fā)生排斥CD4/CD8比值下降提醒并發(fā)兇險(xiǎn)感染

<0.2時(shí),必須停用免疫抑制劑CD2+HLA-DR+增加5-10%,且不伴有CD25增加,提示巨細(xì)胞病毒感染慢性疲勞,感染后綜合征,纖維肌痛,類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎,過(guò)敏等

疾病預(yù)防流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第47頁(yè)-48-淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)意義

Control（n=20)ActiveSLE(n=17)StableSLE(n=13)CD370.4±5.8765.8±10.968.5±8.95CD435.0±5.7022.1±4.15**34.5±4.23CD827.9±5.7345.7±9.58**32.7±9.01CD4/CD81.27±0.140.43±0.12**1.05±0.26*NK17.8±5.484.37±3.31**7.59±5.01**判別活動(dòng)期和非活動(dòng)期SLE流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第48頁(yè)-49-HIVANDAIDS流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第49頁(yè)-50-Th1/Th2細(xì)胞流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第50頁(yè)-51-Th1/Th2細(xì)胞Th1型細(xì)胞因子介導(dǎo)細(xì)胞免疫反應(yīng)引發(fā)遲發(fā)型過(guò)敏反應(yīng)、巨噬細(xì)胞活化、局部炎癥刺激起源：病毒、一些細(xì)菌Th2型介導(dǎo)體液免疫反應(yīng)引發(fā)B細(xì)胞增殖、分泌多克隆免疫球蛋白、促進(jìn)I型變態(tài)反應(yīng)（過(guò)敏反應(yīng)）刺激起源：多細(xì)胞寄生蟲、過(guò)敏原流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第51頁(yè)-52-Th1/Th2細(xì)胞PMA+Ionomycin刺激4-6hr流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第52頁(yè)-53-流式細(xì)胞儀檢測(cè)胞內(nèi)細(xì)胞因子

新鮮分離PBMC

加PMA＋I(xiàn)o刺激后6h測(cè)定胞內(nèi)細(xì)胞因子IL-4和IFN-g

檢測(cè)免疫細(xì)胞表型和結(jié)合檢測(cè)胞內(nèi)細(xì)胞因子：操作和分析方法；

流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第53頁(yè)-54-四色標(biāo)識(shí)胞內(nèi)因子FCM檢測(cè)流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第54頁(yè)-55-Th1/Th2失衡相關(guān)疾病嗜酸性細(xì)胞增多和IgE升高相關(guān)疾病

Ommen’sSyndrome(Ommen’s綜合征)HyperosinophilicSyndrome(高嗜曙紅細(xì)胞綜合征)Kimura’sDisease(Kimura’s疾病)Well’sSyndrome(Well’s綜合征)傳染病

病毒性疾病

人類免疫缺點(diǎn)性病毒感染和愛(ài)滋病(AIDS)

麻疹

呼吸道合胞體病毒感染

慢性活動(dòng)性乙型肝炎病毒感染

分枝桿菌和其它細(xì)菌感染

麻瘋病/肺結(jié)核

鳥結(jié)核分枝桿菌復(fù)合感染滑膜炎反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎

淋病和梅毒

流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第55頁(yè)-56-Th1/Th2失衡相關(guān)疾病寄生蟲病

原寄生蟲感染：皮膚和內(nèi)臟利什曼病

蠕蟲?。航z蟲病和血吸蟲病真菌性疾病

過(guò)敏性支氣管肺霉菌病

念珠菌病

隱球菌病

類球孢子菌病球孢子菌病

組織胞漿菌病惡性腫瘤

皮膚基底細(xì)胞和鱗細(xì)胞癌

SezarySyndrome(Sezary綜合征)

淋巴瘤

EBV相關(guān)B細(xì)胞和非何杰金氏淋巴瘤

何杰金氏淋巴瘤

大細(xì)胞退行性(CD30+)淋巴瘤

多發(fā)性骨髓瘤和Castleman’s綜合征

卡氏肉瘤流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第56頁(yè)-57-Th1/Th2失衡相關(guān)疾病變應(yīng)性疾病

皮膚性哮喘

變應(yīng)性哮喘

春季結(jié)膜炎炎性和本身免疫性疾病

巨細(xì)胞(暫時(shí)性)動(dòng)脈炎

系統(tǒng)性紅斑狼瘡

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎

本身免疫性甲狀腺疾病

類肉瘤病

銀屑病(牛皮癬)IgA腎病

多發(fā)性硬化流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第57頁(yè)-58-Th1/Th2細(xì)胞檢測(cè)意義疾病治療發(fā)病機(jī)制研究使用Th1和Th2相關(guān)細(xì)胞因子

IFN-治療麻瘋病

用抗Th1和Th2相關(guān)細(xì)胞因子或其受體抗體

抗IL-4抗體治療真菌和寄生蟲感染

使用調(diào)整Th2/Th2細(xì)胞因子平衡藥品:

薩力多胺(Thaliodomide)治療巨細(xì)胞動(dòng)脈炎疾病治療監(jiān)測(cè)流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第58頁(yè)-59-

腫瘤學(xué)流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第59頁(yè)-60-腫瘤發(fā)生發(fā)展流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第60頁(yè)-61-02004006008001000PI熒光強(qiáng)度(DNA含量)DNA含量分析2N4NCountsG0/G1G2/MS異倍體流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第61頁(yè)-62-DNA含量分析70%人類癌癥中存在著異倍體或細(xì)胞周期改變1.RossJS.DNAPloidyandCellCycleAnalysisinPathology.NewYork:Igaku-Shoin;1996:47-60DNA倍體和S期百分比--指導(dǎo)治療[2]卵巢癌，乳腺癌，結(jié)腸癌，子宮內(nèi)膜癌，原發(fā)部位不明癌癥--早期(I/II期)DNA倍體和DNA指數(shù)--預(yù)后長(zhǎng)久和無(wú)病生存期[2]卵巢癌--晚期2.TheRecommendMedicareNationalCoveragePolicyforFlowCytometry.HCFAWebsite,1999流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第62頁(yè)-63-P53/Bcl-2流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第63頁(yè)-64-P53乳腺癌

與病理學(xué)分級(jí)相關(guān),并與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)大腸腫瘤

早期發(fā)覺(jué)大腸癌胃癌

與預(yù)后相關(guān)肝細(xì)胞癌

與組織分級(jí),腫瘤預(yù)后,轉(zhuǎn)移及腫瘤大小親密相關(guān)流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第64頁(yè)-65-Bcl-2Bcl-2在正常組織中表示

造血系統(tǒng)細(xì)胞—淋巴,單核細(xì)胞等受激素或生長(zhǎng)因子調(diào)整腺上皮—前列腺上皮,子宮內(nèi)膜等干細(xì)胞或增值細(xì)胞—皮膚基底細(xì)胞,腸上皮壽命長(zhǎng)分裂細(xì)胞—神經(jīng)元胚胎組織Bcl-2在腫瘤組織中表示

腎臟腫瘤—腎癌,腎盂乳頭瘤,Wilms瘤,腎嗜酸細(xì)胞瘤前列腺癌

B細(xì)胞性淋巴瘤乳腺癌(43%)

甲狀腺癌流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第65頁(yè)-66-nm23nm23與各種腫瘤轉(zhuǎn)移及預(yù)后相關(guān)

肝細(xì)胞癌甲狀腺腫瘤乳腺癌結(jié)腸癌肉瘤流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第66頁(yè)-67-CD44(CD44s/CD44v)流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第67頁(yè)-68-腫瘤多藥耐藥性(MDR)檢測(cè)P-gp在腫瘤組織中表示

乳腺癌,膀胱癌,胃癌,食管癌,卵巢癌,前列腺癌等化療前高表示化療后高表示

腎細(xì)胞癌,結(jié)腸癌,肝癌,腎上腺皮質(zhì)癌,胰腺癌等化療前低表示

非何杰金氏淋巴瘤,成神經(jīng)細(xì)胞瘤,急性髓白血病等化療不敏感化療敏感化療不敏感流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第68頁(yè)-69-乳腺癌石蠟切片脫臘ER(雌激素受體)ER抗體染色酶解流式檢測(cè)固定(多聚甲醛)破膜(70%甲醇)細(xì)胞流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第69頁(yè)-70-Cyclin(細(xì)胞周期蛋白)流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第70頁(yè)-71-細(xì)胞凋亡流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第71頁(yè)-72-細(xì)胞凋亡分析

流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第72頁(yè)-73-DNA斷裂流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第73頁(yè)-74-乳腺癌Fas/FasL與疾病慢性病毒性肝炎惡性腫瘤細(xì)胞-黑色素瘤、結(jié)腸癌、肺癌、肝癌等腦缺血后細(xì)胞凋亡本身免疫性疾病—系統(tǒng)性紅斑狼瘡Fas/FasL(CD95/CD95L)流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第74頁(yè)-75-乳腺癌Caspases早期細(xì)胞凋亡AnnexinV/PI流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第75頁(yè)-76-移植免疫流式細(xì)胞儀在臨床檢測(cè)和臨床科研中的應(yīng)用第76頁(yè)-77-CD25高于正常值5-10%,表明即將或已發(fā)生排斥CD4/CD8比值下降提醒并發(fā)兇險(xiǎn)感染

<0.2時(shí),必須停用免疫抑制劑CD2+HLA-DR+增加5-10%,且不伴有CD25增加