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文檔簡介
設(shè)備和材料除微生物試驗(yàn)室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外,其它設(shè)備和材料以下:2.1冰箱:2℃~5℃。2.2恒溫培養(yǎng)箱:36℃±1℃,42℃±1℃。2.3均質(zhì)器。2.4振蕩器。2.5電子天平:感量0.1g。2.6無菌錐形瓶:容量500mL,250mL。2.7無菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸頭。2.8無菌培養(yǎng)皿:直徑90mm。2.9無菌試管:3mm×50mm、10mm×75mm。2.10無菌毛細(xì)管。2.11pH計(jì)或pH比色管或精密pH試紙。2.12全自動(dòng)微生物生化判定系統(tǒng)。沙門氏菌的檢測鑒專家講座第1頁3培養(yǎng)基和試劑3.1緩沖蛋白胨水(BPW)。3.2四硫磺酸鈉煌綠(TTB)增菌液。3.3亞硒酸鹽胱氨酸(SC)增菌液。3.4亞硫酸鉍(BS)瓊脂。3.5HE瓊脂:見附錄A中A.5。3.6木糖賴氨酸脫氧膽鹽(XLD)瓊脂。3.7沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基。3.8三糖鐵(TSI)瓊脂。3.9蛋白胨水、靛基質(zhì)試劑。3.10尿素瓊脂(pH7.2)。3.11氰化鉀(KCN)培養(yǎng)基。3.12賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基。3.13糖發(fā)酵管。3.14鄰硝基酚β-D半乳糖苷(ONPG)培養(yǎng)基。3.15半固體瓊脂。3.16丙二酸鈉培養(yǎng)基。3.17沙門氏菌O和H診療血清。3.18生化判定試劑盒。沙門氏菌的檢測鑒專家講座第2頁A.1緩沖蛋白胨水(BPW)A.1.1成份蛋白胨10.0g氯化鈉5.0g磷酸氫二鈉(含12個(gè)結(jié)晶水)9.0g磷酸二氫鉀1.5g蒸餾水1000mLpH7.2±0.2A.1.2制法將各成份加入蒸餾水中,攪混均勻,靜置約10min,煮沸溶解,調(diào)整pH,高壓滅菌121℃,15min。沙門氏菌的檢測鑒專家講座第3頁A.2四硫磺酸鈉煌綠(TTB)增菌液A.2.1基礎(chǔ)液蛋白胨10.0g、牛肉膏5.0g、氯化鈉3.0g、碳酸鈣45.0g、蒸餾水1000mL、pH7.0±0.2除碳酸鈣外,將各成份加入蒸餾水中,煮沸溶解,再加入碳酸鈣,調(diào)整pH,高壓滅菌121℃,20min。A.2.2硫代硫酸鈉溶液硫代硫酸鈉(含5個(gè)結(jié)晶水)50.0g,餾水加至100mL,高壓滅菌121℃,20min。A.2.3碘溶液碘片20.0g、碘化鉀25.0g、蒸餾水加至100mL,將碘化鉀充分溶解于少許蒸餾水中,再投入碘片,振搖玻瓶至碘片全部溶解為止,然后加蒸餾水至要求總量,貯存于棕色瓶內(nèi),塞緊瓶蓋備用。A.2.40.5%煌綠水溶液煌綠0.5g、蒸餾水100mL溶解后,存放暗處,不少于1d,使其自然滅菌。A.2.5牛膽鹽溶液牛膽鹽10.0g,蒸餾水100mL加熱煮沸至完全溶解,高壓滅菌121℃,20min。A.2.6制法基礎(chǔ)液900mL、硫代硫酸鈉溶液100mL、碘溶液20.0mL、煌綠水溶液2.0mL牛膽鹽溶液50.0mL臨用前,按上列次序,以無菌操作依次加入基礎(chǔ)液中,每加入一個(gè)成份,均應(yīng)搖勻后再加入另一個(gè)成份。沙門氏菌的檢測鑒專家講座第4頁A.3亞硒酸鹽胱氨酸(SC)增菌液A.3.1成份蛋白胨5.0g乳糖4.0g磷酸氫二鈉10.0g亞硒酸氫鈉4.0gL-胱氨酸0.01g蒸餾水1000mLpH7.0±0.2A.3.2制法除亞硒酸氫鈉和L-胱氨酸外,將各成份加入蒸餾水中,煮沸溶解,冷至55℃以下,以無菌操作加入亞硒酸氫鈉和1g/LL-胱氨酸溶液10mL(稱取0.1gL-胱氨酸,加1mol/L氫氧化鈉溶液15mL,使溶解,再加無菌蒸餾水至100mL即成,如為DL-胱氨酸,用量應(yīng)加倍)。搖勻,調(diào)整pH。沙門氏菌的檢測鑒專家講座第5頁A.4亞硫酸鉍(BS)瓊脂A.4.1成份蛋白胨10.0g牛肉膏5.0g葡萄糖5.0g硫酸亞鐵0.3g磷酸氫二鈉4.0g煌綠0.025g或5.0g/L水溶液5.0mL檸檬酸鉍銨2.0g亞硫酸鈉6.0g瓊脂18.0g~20g蒸餾水1000mLpH7.5±0.2A.4.2制法將前三種成份加入300mL蒸餾水(制作基礎(chǔ)液),硫酸亞鐵和磷酸氫二鈉分別加入20mL和30mL蒸餾水中,檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉分別加入另一20mL和30mL蒸餾水中,瓊脂加入600mL蒸餾水中。然后分別攪拌均勻,煮沸溶解。冷至80℃左右時(shí),先將硫酸亞鐵和磷酸氫二鈉混勻,倒入基礎(chǔ)液中,混勻。將檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉混勻,倒入基礎(chǔ)液中,再混勻。調(diào)整pH,隨即傾入瓊脂液中,混合均勻,冷至50℃~55℃。加入煌綠溶液,充分混勻后馬上傾注平皿。注:本培養(yǎng)基不需要高壓滅菌,在制備過程中不宜過分加熱,防止降低其選擇性,貯于室溫暗處,超出48h會(huì)降低其選擇性,本培養(yǎng)基宜于當(dāng)日制備,第二天使用。沙門氏菌的檢測鑒專家講座第6頁注:本培養(yǎng)基不需要高壓滅菌,在制備過程中不宜過分加熱,防止降低其選擇性,貯于室溫暗處,超出48h會(huì)降低其選擇性,本培養(yǎng)基宜于當(dāng)日制備,第二天使用。A.5HE瓊脂(HektoenEntericAgar)A.5.1成份蛋白胨12.0g牛肉膏3.0g乳糖12.0g蔗糖12.0g水楊素2.0g膽鹽20.0g氯化鈉5.0g瓊脂18.0g~20.0g蒸餾水1000mL0.4%溴麝香草酚藍(lán)溶液16.0mLAndrade指示劑20.0mL甲液20.0mL乙液20.0mLpH7.5±0.2沙門氏菌的檢測鑒專家講座第7頁A.5.2制法將前面七種成份溶解于400mL蒸餾水內(nèi)作為基礎(chǔ)液;將瓊脂加入于600mL蒸餾水內(nèi)。然后分別攪拌均勻,煮沸溶解。加入甲液和乙液于基礎(chǔ)液內(nèi),調(diào)整pH。再加入指示劑,并與瓊脂液合并,待冷至50℃~55℃傾注平皿。注:①本培養(yǎng)基不需要高壓滅菌,在制備過程中不宜過分加熱,防止降低其選擇性。②甲液配制硫代硫酸鈉34.0g檸檬酸鐵銨4.0g蒸餾水100mL③乙液配制去氧膽酸鈉10.0g蒸餾水100mL④Andrade指示劑酸性復(fù)紅0.5g1mol/L氫氧化鈉溶液16.0mL蒸餾水100mL將復(fù)紅溶解于蒸餾水中,加入氫氧化鈉溶液。數(shù)小時(shí)后如復(fù)紅褪色不全,再加氫氧化鈉溶液1mL~2mL。沙門氏菌的檢測鑒專家講座第8頁6、木糖賴氨酸脫氧膽鹽(XLD)瓊脂A.6.1成份酵母膏3.0gL-賴氨酸5.0g木糖3.75g乳糖7.5g蔗糖7.5g去氧膽酸鈉2.5g檸檬酸鐵銨0.8g硫代硫酸鈉6.8g氯化鈉5.0g瓊脂15.0g酚紅0.08g蒸餾水1000mLpH7.4±0.2A.6.2制法除酚紅和瓊脂外,將其它成份加入400mL蒸餾水中,煮沸溶解,調(diào)整pH。另將瓊脂加入600mL蒸餾水中,煮沸溶解。將上述兩溶液混合均勻后,再加入指示劑,待冷至50℃~55℃傾注平皿。注:本培養(yǎng)基不需要高壓滅菌,在制備過程中不宜過分加熱,防止降低其選擇性,貯于室溫暗處。本培養(yǎng)基宜于當(dāng)日制備,第二天使用。沙門氏菌的檢測鑒專家講座第9頁A.7三糖鐵(TSI)瓊脂A.7.1成份蛋白胨20.0g牛肉膏5.0g乳糖10.0g蔗糖10.0g葡萄糖1.0g硫酸亞鐵銨(含6個(gè)結(jié)晶水)0.2g酚紅0.025g或5.0g/L溶液5.0mL氯化鈉5.0g硫代硫酸鈉0.2g瓊脂12.0g蒸餾水1000mLpH7.4±0.2A.7.2制法除酚紅和瓊脂外,將其它成份加入400mL蒸餾水中,煮沸溶解,調(diào)整pH。另將瓊脂加入600mL蒸餾水中,煮沸溶解。將上述兩溶液混合均勻后,再加入指示劑,混勻,分裝試管,每管約2mL~4mL,高壓滅菌121℃10min或115℃15min,滅菌后置成高層斜面,呈桔紅色。沙門氏菌的檢測鑒專家講座第10頁A.8蛋白胨水、靛基質(zhì)試劑A.8.1蛋白胨水蛋白胨(或胰蛋白胨)20.0g氯化鈉5.0g蒸餾水1000mLpH7.4±0.2將上述成份加入蒸餾水中,煮沸溶解,調(diào)整pH,分裝小試管,121℃高壓滅菌15min。A.8.2靛基質(zhì)試劑A.8.2.1柯凡克試劑:將5g對二甲氨基甲醛溶解于75mL戊醇中,然后遲緩加入濃鹽酸25mL。A.8.2.2歐-波試劑:將1g對二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇內(nèi)。然后遲緩加入濃鹽酸20mL。A.8.3試驗(yàn)方法挑取小量培養(yǎng)物接種,在36℃±1℃培養(yǎng)1d~2d,必要時(shí)可培養(yǎng)4d~5d。加入柯凡克試劑約0.5mL,輕搖試管,陽性者于試劑層呈深紅色;或加入歐-波試劑約0.5mL,沿管壁流下,覆蓋于培養(yǎng)液表面,陽性者于液面接觸處呈玫瑰紅色。注:蛋白胨中應(yīng)含有豐富色氯酸。每批蛋白胨買來后,應(yīng)先用已知菌種判定后方可使用。沙門氏菌的檢測鑒專家講座第11頁9尿素瓊脂(pH7.2)A.9.1成份蛋白胨1.0g氯化鈉5.0g葡萄糖1.0g磷酸二氫鉀2.0g0.4%酚紅3.0mL瓊脂20.0g蒸餾水1000mL20%尿素溶液100mLpH7.2±0.2A.9.2制法除尿素、瓊脂和酚紅外,將其它成份加入400mL蒸餾水中,煮沸溶解,調(diào)整pH。另將瓊脂加入600mL蒸餾水中,煮沸溶解。將上述兩溶液混合均勻后,再加入指示劑后分裝,121℃高壓滅菌15min。冷至50℃~55℃,加入經(jīng)除菌過濾尿素溶液。尿素最終濃度為2%。分裝于無菌試管內(nèi),放成斜面?zhèn)溆?。A.9.3試驗(yàn)方法挑取瓊脂培養(yǎng)物接種,在36℃±1℃培養(yǎng)24h,觀察結(jié)果。尿素酶陽性者因?yàn)楫a(chǎn)堿而使培養(yǎng)基變?yōu)榧t色。沙門氏菌的檢測鑒專家講座第12頁.10氰化鉀(KCN)培養(yǎng)基A.10.1成份蛋白胨10.0g氯化鈉5.0g磷酸二氫鉀0.225g磷酸氫二鈉5.64g蒸餾水1000mL0.5%氰化鉀20.0mLA.10.2制法將除氰化鉀以外成份加入蒸餾水中,煮沸溶解,分裝后121℃高壓滅菌15min。放在冰箱內(nèi)使其充分冷卻。每100mL培養(yǎng)基加入0.5%氰化鉀溶液2.0mL(最終濃度為1:10000),分裝于無菌試管內(nèi),每管約4mL,立刻用無菌橡皮塞塞緊,放在4℃冰箱內(nèi),最少可保留兩個(gè)月。同時(shí),將不加氰化鉀培養(yǎng)基作為對照培養(yǎng)基,分裝試管備用。A.10.3試驗(yàn)方法將瓊脂培養(yǎng)物接種于蛋白胨水內(nèi)成為稀釋菌液,挑取1環(huán)接種于氰化鉀(KCN)培養(yǎng)基。并另挑取1環(huán)接種于對照培養(yǎng)基。在36℃±1℃培養(yǎng)1d~2d,觀察結(jié)果。如有細(xì)菌生長即為陽性(不抑制),經(jīng)2d細(xì)菌不生長為陰性(抑制)。注:氰化鉀是劇毒藥,使用時(shí)應(yīng)小心,切勿沾染,以免中毒。夏天分裝培養(yǎng)基應(yīng)在冰箱內(nèi)進(jìn)行。試驗(yàn)失敗主要原因是封口不嚴(yán),氰化鉀逐步分解,產(chǎn)生氫氰酸氣體逸出,以致藥品濃度降低,細(xì)菌生長,因而造成假陽性反應(yīng)。試驗(yàn)時(shí)對每一步驟都要尤其注意。沙門氏菌的檢測鑒專家講座第13頁A.11賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基A.11.1成份蛋白胨5.0g酵母浸膏3.0g葡萄糖1.0g蒸餾水1000mL1.6%溴甲酚紫-乙醇溶液1.0mLL-賴氨酸或DL-賴氨酸0.5g/100mL或1.0g/100mLpH6.8±0.2A.11.2制法除賴氨酸以外成份加熱溶解后,分裝每瓶100mL,分別加入賴氨酸。L-賴氨酸按0.5%加入,DL-賴氨酸按1%加入。調(diào)整pH。對照培養(yǎng)基不加賴氨酸。分裝于無菌小試管內(nèi),每管0.5mL,上面滴加一層液體石蠟,115℃高壓滅菌10min。A.11.3試驗(yàn)方法從瓊脂斜面上挑取培養(yǎng)物接種,于36℃±1℃培養(yǎng)18h~24h,觀察結(jié)果。氨基酸脫羧酶陽性者因?yàn)楫a(chǎn)堿,培養(yǎng)基應(yīng)呈紫色。陰性者無堿性產(chǎn)物,但因葡萄糖產(chǎn)酸而使培養(yǎng)基變?yōu)辄S色。對照管應(yīng)為黃色。沙門氏菌的檢測鑒專家講座第14頁A.12糖發(fā)酵管A.12.1成份牛肉膏5.0g蛋白胨10.0g氯化鈉3.0g磷酸氫二鈉(含12個(gè)結(jié)晶水)2.0g0.2%溴麝香草酚藍(lán)溶液12.0mL蒸餾水1000mLpH7.4±0.2A.12.2制法A.12.2.1葡萄糖發(fā)酵管按上述成份配好后,調(diào)整pH。按0.5%加入葡萄糖,分裝于有一個(gè)倒置小管小試管內(nèi),121℃高壓滅菌15min。A.12.2.2其它各種糖發(fā)酵管可按上述成份配好后,分裝每瓶100mL,121℃高壓滅菌15min。另將各種糖類分別配好10%溶液,同時(shí)高壓滅菌。將5mL糖溶液加入于100mL培養(yǎng)基內(nèi),以無菌操作分裝小試管。注:蔗糖不純,加熱后會(huì)自行水解者,應(yīng)采取過濾法除菌。A.12.3試驗(yàn)方法:從瓊脂斜面上挑取小量培養(yǎng)物接種,于36℃±1℃培養(yǎng),普通2d~3d。遲緩反應(yīng)需觀察14d~30d。沙門氏菌的檢測鑒專家講座第15頁A.13ONPG培養(yǎng)基A.13.1成份鄰硝基酚β-D半乳糖苷(ONPG)(O-Nitrophenyl-β-D-galactopyranoside)60.0mg0.01mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5)10.0mL1%蛋白胨水(pH7.5)30.0mLA.13.2制法將ONPG溶于緩沖液內(nèi),加入蛋白胨水,以過濾法除菌,分裝于無菌小試管內(nèi),每管0.5mL,用橡皮塞塞緊。A.13.3試驗(yàn)方法自瓊脂斜面上挑取培養(yǎng)物1滿環(huán)接種于36℃±1℃培養(yǎng)1h~3h和24h觀察結(jié)果。假如β-半乳糖苷酶產(chǎn)生,則于1h~3h變黃色,如無此酶則24h不變色。沙門氏菌的檢測鑒專家講座第16頁A.14半固體瓊脂A.14.1成份牛肉膏0.3g蛋白胨1.0g氯化鈉0.5g瓊脂0.35g~0.4g蒸餾水100mLpH7.4±0.2A.14.2制法按以上成份配好,煮沸溶解,調(diào)整pH。分裝小試管。121℃高壓滅菌15min。直立凝固備用。注:供動(dòng)力觀察、菌種保留、H抗原位相變異試驗(yàn)等用。沙門氏菌的檢測鑒專家講座第17頁A.15丙二酸鈉培養(yǎng)基A.15.1成份酵母浸膏1.0g
硫酸銨2.0g磷酸氫二鉀0.6g
磷酸二氫鉀0.4g
氯化鈉2.0g丙二酸鈉3.0g
0.2%溴麝香草酚藍(lán)溶液12.0mL
蒸餾水1000mL
pH6.8±0.2A.15.2制法除指示劑以外成份溶解于水,調(diào)整pH,再加入指示劑,分裝試管,121℃高壓滅菌15min。A.15.3試驗(yàn)方法用新鮮瓊脂培養(yǎng)物接種,于36℃±1℃培養(yǎng)48h,觀察結(jié)果。陽性者由綠色變?yōu)樗{(lán)色。沙門氏菌的檢測鑒專家講座第18頁4檢驗(yàn)程序沙門氏菌的檢測鑒專家講座第19頁5操作步驟5.1前增菌稱取25g(mL)樣品放入盛有225mLBPW無菌均質(zhì)杯中,以8000r/min~10000r/min均質(zhì)1min~2min,或置于盛有225mLBPW無菌均質(zhì)袋中,用拍擊式均質(zhì)器拍打1min~2min。若樣品為液態(tài),不需要均質(zhì),振蕩混勻。如需測定pH值,用1mol/mL無菌NaOH或HCl調(diào)pH至6.8±0.2。無菌操作將樣品轉(zhuǎn)至500mL錐形瓶中,如使用均質(zhì)袋,可直接進(jìn)行培養(yǎng),于36℃±1℃培養(yǎng)8h~18h。如為冷凍產(chǎn)品,應(yīng)在45℃以下不超出15min,或2℃~5℃不超出18h解凍5.2增菌輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)過樣品混合物,移取1mL,轉(zhuǎn)種于10mLTTB內(nèi),于42℃±1℃培養(yǎng)18h~24h。同時(shí),另取1mL,轉(zhuǎn)種于10mLSC內(nèi),于36℃±1℃培養(yǎng)18h~24h。沙門氏菌的檢測鑒專家講座第20頁5.3分離沙門氏菌的檢測鑒專家講座第21頁沙門氏菌的檢測鑒專家講座第22頁沙門氏菌的檢測鑒專家講座第23頁沙門氏菌的檢測鑒專家講座第24頁沙門氏菌的檢測鑒專家講座第25頁5.5血清學(xué)判定5.5.1抗原準(zhǔn)備普通采取1.2%~1.5%瓊脂培養(yǎng)物作為玻片凝集試驗(yàn)用抗原。O血清不凝集時(shí),將菌株接種在瓊脂量較高(如2%~3%)培養(yǎng)基上再檢驗(yàn);假如是因?yàn)閂i抗原存在而阻止了O凝集反應(yīng)時(shí),可挑取菌苔于1mL生理鹽水中做成濃菌液,于酒精燈火焰上煮沸后再檢驗(yàn)。H抗原發(fā)育不良時(shí),將菌株接種在0.55%~0.65%半固體瓊脂平板中央,俟菌落蔓延生長時(shí),在其邊緣部分取菌檢驗(yàn);或?qū)⒕杲?jīng)過裝有0.3%~0.4%半固體瓊脂小玻管1次~2次,自遠(yuǎn)端取菌培養(yǎng)后再檢驗(yàn)。5.5.2多價(jià)菌體抗原(O)判定在玻片上劃出2個(gè)約1cm×2cm區(qū)域,挑取1環(huán)待測菌,各放1/2環(huán)于玻片上每一區(qū)域上部,在其中一個(gè)區(qū)域下部加1滴多價(jià)菌體(O)抗血清,在另一區(qū)域下部加入1滴生理鹽水,作為對照。再用無菌接種環(huán)或針分別將兩個(gè)區(qū)域內(nèi)菌落研成乳狀液。將玻片傾斜搖動(dòng)混合1min,并對著黑暗背景進(jìn)行觀察,任何程度凝集現(xiàn)象皆為陽性反應(yīng)。5.5.3多價(jià)鞭毛抗原(H)判定同5.5.2。沙門氏菌的檢測鑒專家講座第26頁5.5.4血清學(xué)分型(選做項(xiàng)目)5.5.4.1O抗原判定用A~F多價(jià)O血清做玻片凝集試驗(yàn),同時(shí)用生理鹽水做對照。在生理鹽水中自凝者為粗糙形菌株,不能分型。被A~F多價(jià)O血清凝集者,依次用O4;O3、O10;O7;O8;O9;O2和O11因子血清做凝集試驗(yàn)。依據(jù)試驗(yàn)結(jié)果,判定O群。被O3、O10血清凝集菌株,再用O10、O15、O34、O19單因子血清做凝集試驗(yàn),判定E1、E2、E3、E4各亞群,每一個(gè)O抗原成份最終確定均應(yīng)依據(jù)O單因子血清檢驗(yàn)結(jié)果,沒有O單因子血清要用兩個(gè)O復(fù)合因子血清進(jìn)行查對。不被A~F多價(jià)O血清凝集者,先用9種多價(jià)O血清檢驗(yàn),如有其中一個(gè)血清凝集,則用這種血清所包含O群血清逐一檢驗(yàn),以確定O群。每種多價(jià)O血清所包含O因子以下:O多價(jià)1A,B,C,D,E,F(xiàn),群(并包含6,14群)O多價(jià)213,16,17,18,21群O多價(jià)328,30,35,38,39群O多價(jià)440,41,42,43群O多價(jià)544,45,47,48群O多價(jià)650,51,52,53群O多價(jià)755,56,57,58群O多價(jià)859,60,61,62群O多價(jià)963,65,66,67群沙門氏菌的檢測鑒專家講座第27頁沙門氏菌的檢測鑒專家講座第28頁不常見菌型,先用8種多價(jià)H血清檢驗(yàn),如有其中一個(gè)或兩種血清凝集,則再用這一個(gè)或兩種血清所包含各種H因子血清逐一檢驗(yàn),以第1相和第2項(xiàng)H抗原。8種多價(jià)H血清所包含H因子以下:H多價(jià)1a,b,c,d,iH多價(jià)2eh,enx,enz15,fg,gms,gpu,gp,gq,mt,gz51H多價(jià)3k,r,y,z,z10,lv,lw,lz13,lz28,lz40H多價(jià)41,2;1,5;1,6;1,7;z6H多價(jià)5z4z23,z4z24,z4z32,z29,z35,z36,z38H多價(jià)6z39,z41,z42,z44H多價(jià)7z52,z53,z54,z55H多價(jià)8z56,z57,z60,z61,z62每一個(gè)H抗原成份最終確定均應(yīng)依據(jù)H單因子血清檢驗(yàn)結(jié)果,沒有H單因子血清要用兩個(gè)H復(fù)合因子血清進(jìn)行查對。檢出第1相H抗原而未檢出第2相H抗原或檢出第2相H抗原而未檢出第1相H抗原,可在瓊脂斜面上移種1
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