分子生物學(xué)預(yù)備實驗2023/4/262005級生物科學(xué)專業(yè)1第1頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一分子生物學(xué)實驗預(yù)備實驗第2頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一一、實驗?zāi)康?.理解實驗室規(guī)則。2.了解各種實驗儀器，學(xué)習(xí)掌握其使用方法。

第3頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一二、實驗內(nèi)容學(xué)習(xí)實驗室規(guī)則。了解相關(guān)的實驗儀器設(shè)備。學(xué)習(xí)相關(guān)實驗儀器的使用方法。了解本學(xué)期課程安排。第4頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一（一）實驗室規(guī)則1.實驗前經(jīng)充分預(yù)習(xí)，認真閱讀實驗指導(dǎo)書，明確實驗任務(wù)及要求，弄清實驗原理。擬定好實驗方案。按時進入實驗室，教師應(yīng)對預(yù)習(xí)情況進行檢查，預(yù)習(xí)通不過不準做實驗。2.使用儀器設(shè)備前，必須熟悉其性能，預(yù)習(xí)操作方法及注意事項，使用時嚴格遵守操作規(guī)程，做到準確操作。非本實驗所用儀器設(shè)備未經(jīng)教師允許不得動用。第5頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一3.實驗中應(yīng)注意觀察現(xiàn)象，認真記錄實驗結(jié)果。實驗記錄經(jīng)老師審閱檢查，簽字登記。4.遵守實驗紀律，注意保持實驗室整潔、安靜。不做與實驗內(nèi)容無關(guān)的事情。5.實驗結(jié)束后，關(guān)掉儀器設(shè)備電源開關(guān)、拉閘，將儀器設(shè)備整理好，實驗現(xiàn)場整理干凈，并報告教師后方可離開實驗室。第6頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一6.實驗過程中如發(fā)生事故，應(yīng)自覺寫事故報告，總結(jié)經(jīng)驗，吸取教訓(xùn)。要服從指導(dǎo)教師對事故的處理。借用器材有損失、丟失，要按實驗室規(guī)定賠償。7.未經(jīng)實驗室管理者或?qū)嶒灷蠋熗?，任何人不得將實驗室?nèi)物品、設(shè)備、標本、藥品、實驗材料帶出室外。8.保持實驗室內(nèi)的整潔與衛(wèi)生，嚴禁隨手亂涂、亂畫、亂扔廢物、紙屑；每次實驗結(jié)束值日生要認真打掃、清洗用具，垃圾倒入垃圾箱。值日的質(zhì)量將直接計入學(xué)期末的實驗課成績。

第7頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一（二）分子生物學(xué)實驗的儀器介紹1.離心機高速冷凍離心機高速臺式離心機低速臺式離心機第8頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一離心機的使用應(yīng)注意保持離心管放置位置的對稱以及離心管中樣品的平衡，離心管放進離心機前應(yīng)先用衛(wèi)生紙擦干，此外應(yīng)注意離心機在離心機內(nèi)的放置方向。第9頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一A.高速冷凍離心機第10頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一B.高速臺式離心機檢查面板上的各種旋鈕是否在規(guī)定的位置上。（電源在關(guān)、調(diào)速旋鈕、定時器在零的位置上。）使用12×1.5ml轉(zhuǎn)頭時，用“1”檔1.6萬rpm；使用10×5ml轉(zhuǎn)頭時，用“2”檔1.2萬rpm。每支試管內(nèi)放等量的樣品，然后將試管對稱放在轉(zhuǎn)頭內(nèi)。擰緊螺帽，蓋好有機玻璃蓋門，然后打開電源。旋轉(zhuǎn)定時器至所需時間。慢慢旋轉(zhuǎn)調(diào)速旋鈕，至所需轉(zhuǎn)速。當?shù)皆O(shè)定時間后，將旋轉(zhuǎn)調(diào)速旋鈕指針回復(fù)到零時，待停機后才能打開蓋子取出試管。第11頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一C.低速臺式離心機

檢查面板上的各種旋鈕是否在規(guī)定的位置上。（電源在關(guān)、調(diào)速旋鈕、定時器在零的位置上。）每支試管內(nèi)放等量的樣品，然后將試管對稱放在轉(zhuǎn)頭內(nèi)。擰緊螺帽，蓋好有機玻璃蓋門，然后打開電源。旋轉(zhuǎn)定時器至所需時間,不能倒扭。慢慢旋轉(zhuǎn)調(diào)速旋鈕，至所需轉(zhuǎn)速。當?shù)皆O(shè)定時間后，將旋轉(zhuǎn)調(diào)速旋鈕指針回復(fù)到零時，待停機后才能打開蓋子取出試管。第12頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一2.微量加樣器第13頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一微量移液器的使用微量移液器是連續(xù)可調(diào)的，計量和轉(zhuǎn)移液體的專用儀器，其裝有直接讀數(shù)容量計，讀數(shù)由三位撥號數(shù)字組成，在移液容量范圍內(nèi)能連續(xù)調(diào)節(jié)，從上（最大數(shù)）到下（最小數(shù)）讀取。移液器的型號即是其最大容量值。按鈕向下壓以及放的動作,速度要緩慢平穩(wěn)。第14頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一微量移液器的操作1）將微量移液器按鈕輕輕壓至第一停點；2）垂直握持微量移液器，將吸嘴浸入液樣面下幾毫米，千萬別將吸嘴直接插到液體底部；3）緩慢，平穩(wěn)的松開控制按鈕，吸上樣液。否則液體進入吸嘴太快，導(dǎo)致液體倒吸入移液器內(nèi)部，或吸入體積減少；4）等一秒鐘后將吸嘴提離液面；5）平穩(wěn)得把按鈕壓到第一停點，再把按鈕壓至第二停點以排出剩余液體；6）提起微量移液器，讓吸嘴在容器壁擦過；7）然后按吸嘴彈射器除去吸嘴。第15頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一微量移液器操作的注意事項1）未裝吸嘴（tip）的微量移液器絕對不可用來吸取任何液體；2）一定要在允許范圍內(nèi)設(shè)定容量，千萬不要將讀數(shù)的調(diào)節(jié)超出其適用的刻度范圍，否則會造成損壞；3）不要橫放帶有殘余液體吸嘴的移液器；4）不要用大量程的移液器移取小體積樣品。第16頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一3.電子天平第17頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一電子天平的使用?注意在天平的最大稱量范圍內(nèi)使用。?天平應(yīng)放在無振動、無空氣對流處，使用前須先調(diào)節(jié)水平泡至中央位置。?使用后應(yīng)保持儀器的潔凈。第18頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一A.電子天平的使用1.使用前準備：調(diào)節(jié)水平、Max＝210g，

d＝0.01g。2.開機：接通電源，按開機鍵。3.預(yù)熱：初次使用或長時斷電后，需預(yù)熱30min。5.去皮：按清零鍵，去皮清零。6.稱量：放置樣品稱量7.關(guān)機：按關(guān)機鍵。第19頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一B.電子天平的使用開機：

Max＝1200g，

d＝1g。校正：去皮：ZeroOn稱量：關(guān)機：ModeOff第20頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一C.電子天平的使用1.使用前準備：調(diào)節(jié)水平、Max＝210g，d＝0.001g。2.開機：接通電源，按ON/OFF鍵。3.預(yù)熱：初次使用或長時斷電后，需預(yù)熱30min。4.校正：按CAL鍵，放上校正砝碼。5.去皮：按TARE鍵，去皮清零。6.稱量：放置樣品稱量7.關(guān)機：按ON/OFF鍵。第21頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一4.PCR儀第22頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一PCR儀的使用編輯鍵、光標鍵、控制鍵、數(shù)字鍵主菜單Start啟動程序Files編輯OPTIONS系統(tǒng)設(shè)置Lid預(yù)熱熱蓋Incubate溫育第23頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一5.瓊脂糖凝膠電泳系統(tǒng)第24頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一電泳儀的使用設(shè)置工作程序：模式：電壓、電流、時間第25頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一制膠器第26頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一6.紫外透射儀第27頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一7.凝膠成像分析系統(tǒng)第28頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一8.酸度計第29頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一9.二氧化碳培養(yǎng)箱1.必須接上二氧化碳2.接通電源3.按SET鍵,設(shè)定左上側(cè)的溫度。4.再按SET鍵,設(shè)定左下側(cè)的CO2的濃度。5.使用前必須消毒。第30頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一10.恒溫培養(yǎng)箱控制面板說明：1.SP：設(shè)定溫度2.ST：設(shè)定定時時間第31頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一11.恒溫水浴鍋第32頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一12.超聲波清洗機第33頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一13.磁力攪拌器第34頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一14.雙重蒸餾水器第35頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一（三）消毒與滅菌1.物理消毒法：紫外線消毒干熱滅菌濕熱滅菌濾過除菌第36頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一2.化學(xué)消毒法70％（或75％)酒精0.1%新潔爾滅來蘇兒水（媒酚皂溶液）0.5％過氧乙酸37％甲醛加高錳酸鉀第37頁，共38頁，2023年，2月20日，星期一三、參考書現(xiàn)代分子生物學(xué)實驗手冊張維銘主編科學(xué)出版社分子生物學(xué)基本技能和策略周俊宜編著科學(xué)出版社現(xiàn)代實用細胞與分子