【課標要求】

第十單元 生物技術與工程第1課 微生物的培育技術及應用說明在發(fā)酵工程中滅菌是獲得純潔的微生物培育物的前提。說明無菌技術是在操作過程中,保持無菌物品與無菌區(qū)域不被微生物污染的技術。舉例說明通過調整培育基的配方可有目的地培育某種微生物。概述平板劃線法和稀釋涂布平板法是試驗室中進展微生物分別和純化的常用方法。概述稀釋涂布平板法和顯微鏡計數(shù)法是測定微生物數(shù)量的常用方法?！舅仞B(yǎng)目標】把握培育基的成分及其作用,比較平板劃線法和稀釋涂布平板法的異同;把握無菌技術及微生物的純培育。(科學思維)設計試驗探究微生物培育的條件,利用選擇培育基分別細菌,運用相關技術解決生產(chǎn)中有關微生物的計數(shù)。(科學探究)關注有害微生物的掌握及宣傳安康生活等。(生命觀念、社會責任)一、微生物的培育技術培育基的配制:概念按物理性質種類按用途成分 主要成分

人們依據(jù)微生物對養(yǎng)分物質的不同需求,配制出供其生長生殖的養(yǎng)分基質液體培育基固體培育基選擇培育基鑒別培育基水、碳源、氮源和無機鹽-1-特別的培育成分pH、特別養(yǎng)分物質以及特別的培育成分pH、特別養(yǎng)分物質以及O等2(1)概念:在培育微生物的操作中,全部防止雜菌污染的方法。(2)關鍵:防止雜菌污染。比較工程消毒滅菌作用強度較為溫順的物理、化學、生物 猛烈的理化因素因素作用程度殺死物體外表或內部的局部微 比較工程消毒滅菌作用強度較為溫順的物理、化學、生物 猛烈的理化因素因素作用程度殺死物體外表或內部的局部微 殺死物體內外全部的微生物生物芽孢和孢子 一般不能殺滅能殺滅適用對象操作空間、活體生物材料、操 接種用具培育器皿培育基常用方法作者的衣著和雙手 等煮沸消毒法、巴氏消毒法、化 濕熱滅菌法干熱滅菌法灼學藥物消毒法、紫外線消毒法 燒滅菌法(5)常見滅菌方法在操作中的留意事項:滅菌方法滅菌方法物品擺放法不能太擠,以留意事項取物 特別要求降至70℃以下后取滅菌物品不要與干熱滅菌出:①防止燙傷;②防止箱內壁鐵板接觸,以防包裝玻璃器皿炸裂 紙烤焦起火讓溫度自然下降,當壓濕熱滅菌或蒸汽流通法免影響熱空氣力表壓力降為零時翻開排出后,才能密閉升溫升壓,肯定要將鍋內冷空氣徹底排氣閥:防止鍋內壓力突然下降,滅菌容器內液體沖出容器,造成污染否則,可能導致鍋內壓力雖到達設定值而溫度還達不到要求-2-灼燒滅菌接種環(huán)接種針等金屬用具,直接在酒精燈火焰的充分燃燒層(即外法 焰)灼燒,并冷卻后使用微生物的純培育:概念:由單一個體生殖所獲得的微生物群體稱為純培育物,獲得純培育物的過程就是純培育。步驟:配制培育基、滅菌、接種、分別和培育等。(3)酵母菌的純培育。①菌落的概念:由分散的微生物生殖而來的肉眼可見的、有肯定形態(tài)構造的子細胞群體。②接種方法:最常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。③步驟:制備培育基、接種和分別酵母菌、培育酵母菌。,有時還需要參加一些特別的物質。(√)消毒的原則是既殺死材料外表的微生物,又削減消毒劑對細胞的損害。(√)(×)分析:接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應先冷卻,防止殺死菌種。平板劃線法中每一次劃線后都要將接種環(huán)灼燒。(√)需要將一個不接種的培育基放在一樣的條件下培育,以檢驗培育基的滅菌是否合格。(√)二、微生物的選擇培育和計數(shù)微生物篩選的原理:人為供給有利于目的菌生長的條件(包括養(yǎng)分、溫度、pH等),同時抑制或阻擋其他微生物的生長,即依據(jù)不同微生物的特別養(yǎng)分要求或其對某化學、物理因素的抗性不同而制備培育基。選擇培育基:概念:在微生物學中,將允許特定種類的微生物生長,同時抑制或阻擋其他種類微生物生長的培育基,稱為選擇培育基。-3-:篩選土壤中分解尿素的細菌的選擇培育基是以尿素為唯一氮源,按物理性質歸類為固體培育基。篩選方法:稀釋涂布平板法:將菌液進展一系列的梯度稀釋后,將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培育基外表,進展培育。系列稀釋操作。,1~2cm下::圖示 操作0.1mL菌液,滴加到培育基外表將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中,待酒精燃盡、涂布器冷卻后,再進展涂布用涂布器將菌液均勻地涂布在培育基外表。涂布時可轉動培育皿,使涂布均勻培育:待涂布的菌液被培育基吸取后,將平板倒置,30~37℃的恒溫培育箱1~2d。微生物的數(shù)量測定:間接計數(shù)法(活菌計數(shù)法)。-4-①計數(shù)原理:培育基外表生長的一個單菌落,來源于樣品稀釋液中的一個活菌。所以統(tǒng)計結果一般用菌落數(shù)代表活菌數(shù)。②計數(shù)標準:30~300的平板進展計數(shù)。③計數(shù)方法:24h統(tǒng)計一次菌落數(shù)目,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結果,這樣可以防止因培育時間缺乏而導致遺漏菌落的數(shù)目。在同一稀釋度下,至少應3個平板進展重復計數(shù),然后求出平均值。④計算公式:⑤計數(shù)誤差:當兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀看到的只是一個菌落,所以計數(shù)結果一般比實際活菌數(shù)目少。顯微鏡直接計數(shù)法。①計數(shù)原理:利用特定的細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板,,然后再計算肯定體積的樣品中微生物的數(shù)量。②計算公式:每毫升原液所含細菌數(shù)=每小格內平均細菌數(shù)×400×104×稀釋倍數(shù)。③優(yōu)點:是一種常用的、快速直觀的測定微生物數(shù)量的方法。④缺點:統(tǒng)計的結果一般是死菌數(shù)和活菌數(shù)的總和。探究·實踐:土壤中分解尿素的細菌的分別與計數(shù)篩選能分解尿素的細菌所利用的培育基中,尿素是唯一的氮源。(√)選擇培育基可以鑒定某種微生物的種類。(×)分析:選擇培育基可以選擇某種微生物,鑒別培育基可以鑒定某種微生物的種類。在查找目的菌株時,要依據(jù)它對生存環(huán)境的要求,到相應環(huán)境中去查找。(√)-5-只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。(√)分析:脲酶是催化尿素分解的特異性水解酶,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。拓展填寫:微生物是難以用肉眼觀看的微小生物的統(tǒng)稱,包括細菌、真菌、病毒及一些原生生物等。探究延長:無菌技術除用來防止試驗室的培育物被其他外來微生物污染外,還有什么作用?提示:無菌技術還能有效避開操作者自身被微生物感染。探究延長:平板劃線時最終一次劃線不能與第一次劃線相連,緣由是什么?提示:最終一次劃線已經(jīng)將細菌稀釋成單個的細胞,假設與第一次劃線相連,則增加了細菌的數(shù)目,得不到純化的效果。試驗變式:利用稀釋涂布平板法純化分解尿素的細菌時,經(jīng)培育后覺察培育基上消滅多種菌落,可能的緣由有哪些?提示:消滅雜菌污染的可能緣由有:培育基制備過程中被雜菌污染;接種過程中,無菌操作不符合要求;系列稀釋時,無菌操作不符合要求等?！锟键c1 微生物的根本培育技術培育基中成分的含義、作用和主要來源(比較、歸納):養(yǎng)分要素 含義 作用

主要來源無機碳源:NaHCO、CO3 構成生物體細胞的 等3 碳源 能供給所需碳 物質和一些代謝產(chǎn)元素的物質 物,有些是異養(yǎng)生物的能源物質

有機碳源:和蛋白胨等能供給所需氮 合成蛋白質核酸以無機氮源:NH銨鹽硝3氮源 元素的物質 及含氮的代謝產(chǎn)物 酸鹽等;3-6-生長因子生長因子(特別生長必不行少養(yǎng)分物質)的微量有機物水—酶和核酸的組成成分不僅是優(yōu)良的溶劑,而且可維持生物大分子構造的穩(wěn)定有機氮源:蛋白胨等組織提取液等等為微生物供給細胞內的組成成分;無機鹽生理調整物質;某些外的各種重要培育基、大氣等環(huán)境元素,包括某些酶的激活劑化能自養(yǎng)菌的能源;大量元素比較工程 平板劃線法關鍵操作 接種環(huán)在固體平板培育基表比較工程 平板劃線法關鍵操作 接種環(huán)在固體平板培育基表面連續(xù)劃線稀釋涂布平板法①一系列的梯度稀釋②涂布平板法操作留意事項每次劃線前后均需灼燒接種稀釋度要足夠高,為確保試驗環(huán)成功可以增加稀釋度的范圍菌體獵取在具有顯著菌落特征的區(qū)域從適宜稀釋度的平板上的菌的菌落中挑取菌體落中挑取菌體優(yōu)點可以依據(jù)菌落的特點獲得某既可以獲得單細胞菌落,又能缺點種微生物的單細胞菌落不能對微生物計數(shù)對微生物進展計數(shù)操作簡單,需要涂布多個平板平板劃線操作中幾次灼燒接種環(huán)的目的:工程工程第一次劃線前灼其次次及之后燒每次劃線前灼燒劃線完畢灼燒-7-避開接種環(huán)上可目的 能存在的微生物污染培育物【高考警示鐘】

殺死上次劃線完畢后殺死接種環(huán)上殘留接種環(huán)上殘留的菌種,的菌種,避開微生物使下次劃線的菌種均污染環(huán)境和感染操來自上次劃線的末端作者培育物、純培育物、純培育辨析(多項選擇)(2023·南京模擬)化工廠污水池中含有一種有害的難以降解的有機化合物A,爭論人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素等配制的培育基,成功篩選到能高效降解化合物A的細菌(目的菌)試驗的主要步驟如下圖①。以下表達錯誤的選項是( )培育基中參加化合物A作為唯一碳源,目的是篩選目的菌試驗培育過程中進展振蕩培育,可使目的菌和培育液充分接觸C.為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應馬上快速挑取菌落D.將固體培育基得到的目的菌重復屢次上述試驗的目的是獲得大量菌種②【題眼破譯】提升信息轉化力量信息 轉化信息(對接問題)流程圖篩選到能高效降解化合物A的細菌流程-8-信息①培育基中參加化合物A作為唯一碳源,目的是篩選目的菌信息②將固體培育基得到的目的菌重復屢次上述試驗的目的是對“純化”【解析】選C、D。本試驗的目的是“篩選到能高效降解化合物A的細菌”,因此培育基中參加化合物A作為唯一碳源,目的是篩選目的菌,A正確;試驗培育過程中進展振蕩培育,可使目的菌和培育液充分接觸,B正確;為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后需要在火焰旁冷卻后再挑取菌落,否則會導致高溫使菌種死亡,C錯誤;在以化合物A為唯一碳源的培育基中只有能降解化合物A的微生物才能生長生殖,不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源,無法生長生殖,將固體培育基得到的目的菌重復屢次上述試驗的目的是對菌種“純化”,D錯誤。1.(2023·南通模擬)在某病原菌均勻分布的平板上,鋪設含有不同種抗生素的紙片后進展培育,在紙片四周會消滅透亮區(qū)域抑菌圈,可測定該病原菌對各種抗生素的敏感性。相關表達正確的選項是( )A.圖中的接種方法可能為平板劃線法或者稀釋涂布平板法B.未消滅抑菌圈可能是病原菌與抗生素接觸后發(fā)生抗性變異C.形成的抑菌圈較小的緣由可能是微生物對藥物較敏感D.不同抗生素在平板上的集中速度不同可能會對試驗結果造成肯定影響【解析】選D。圖示承受的接種方法是稀釋涂布平板法,A錯誤;未消滅抑菌圈可能是病原菌對該抗生素不敏感,B錯誤;形成的抑菌圈較小的緣由可能是微生物對藥物敏感程度較低,C錯誤;在平板上集中速度慢的抗生素,形成的透亮圈可能會比實際結果偏小,因此,不同抗生素在平板上的集中速度不同會對試驗結果造成影響,D正確。2.(多項選擇)隨著原油泄漏危害的擴大,原油泄漏的治理也漸漸受到重視,治理原油泄漏可以承受微生物方法,該方法是通過一種嗜油菌“吃掉”環(huán)境中的烷烴、芳香烴等有害的致癌物質。土壤中有些細菌可以利用原油中的多環(huán)芳烴為碳源,在培育-9-基中形成分解圈。為篩選出能高效降解原油的菌株并投入除污,某科學興趣小組的同學設計了相關試驗,以下有關試驗的表達,正確的選項是( )A.應配制來源于被原油污染土壤的土壤稀釋液備用B.配制以多環(huán)芳烴為唯一碳源的選擇培育基C.將土壤稀釋液滅菌后接種到選擇培育基上D.在選擇培育基上能形成分解圈的即為所需菌種【解析】選A、B、D,首先是取材,應配制來源于被原油污染土壤的土壤稀釋液備用,A正確;其次配制以多環(huán)芳烴為唯一碳源的選擇培育基,B正確;然后進展接種,在無菌環(huán)境下,將土壤稀釋液接種到選擇培育基上,在適宜的條件下進展培育,假設將土壤稀釋液進展滅菌,就不能篩選出能高效降解原油的菌株,C錯誤;在選擇培育基上形成的菌落,假設該菌落四周有分解圈,即為所需菌種,D正確?！炯庸逃柧殹ぐ胃摺?2023·全國Ⅰ卷)一種有機物X(CH兩種元素)不易降解,會造成環(huán)境污染。某小組用三種培育基篩選土壤中能高效降解X的細菌(目標菌)。Ⅰ號培育基:在牛肉膏蛋白胨培育基中參加X(5g/L)。Ⅱ號培育基:氯化鈉(5g/L),硝酸銨(3g/L),其他無機鹽(適量),X(15g/L)。Ⅲ號培育基:氯化鈉(5g/L),硝酸銨(3g/L),其他無機鹽(適量),X(45g/L)。答復以下問題。在Ⅰ號培育基中,為微生物供給氮源的是 。Ⅱ、Ⅲ號培育基中為微生物供給碳源的有機物是 。假設將土壤懸浮液接種在Ⅱ號液體培育基中,培育一段時間后,不能降解X的細菌比例會 ,其緣由是 。Ⅱ號培育基參加瓊脂后可以制成固體培育基,假設要以該固體培育基培育目標菌并對菌落進展計數(shù),接種時,應承受的方法是 。假設從Ⅲ號培育基中得到了能高效降解X的細菌,且該菌能將X代謝為丙酮酸,則在有氧條件下,丙酮酸可為該菌的生長供給 和 ?！窘馕觥看祟}考察微生物的培育與應用的相關學問。-10-氮源是微生物生長需要的一類養(yǎng)分物質,是含氮化合物,可為微生物的生長供給氮元素,,,因此在Ⅰ號培育基中,可為微生物供給氮源的是牛肉膏、蛋白胨。碳源也是微生物生長所需要的一類養(yǎng)分物質,可為微生物的生長供給碳元素,而有機物均含碳元素,ⅡⅢX,因此,ⅡⅢ號培育基為微生物的生長供給碳源的均為有機物X。由于Ⅱ號培育基含有的碳源只有有機物X,所以假設將土壤懸浮液接種在Ⅱ號液體培育基中,培育一段時間后,不能降解X的細菌由于無法獲得碳源而無法增殖導致比例下降。微生物的接種方法很多,最常用的有平板劃線法與稀釋涂布平板法,由于稀釋涂布平板法中,稀釋度足夠高的菌液經(jīng)涂布培育后,在培育基外表形成的一個菌落是由菌液中的一個活菌生殖而來,所以常用來進展微生物的計數(shù)。丙酮酸參與有氧呼吸的其次階段,能被分解產(chǎn)生能量,且丙酮酸可作為很多物質合成的中間產(chǎn)物,所以它可為微生物的生長供給能量和合成其他物質的原料。答案:(1)牛肉膏蛋白胨 X (2)下降 不能降解X的細菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X的細菌能夠增殖 (3)稀釋涂布平板法 (4)能量 合成其他物質的原料★考點2 微生物的選擇培育和計數(shù)微生物的篩選方法(科學思維):方法 特點 舉例利用養(yǎng)分缺陷型通過掌握培育基的養(yǎng)分選擇培育基進展成分,使養(yǎng)分缺陷型微

缺乏氮源的培育基可篩選自生固氮微生物的選擇培育利用某種化學物質進展的選擇培育

生物不能正常生長在培育基中參加某種化學物質,抑制某些微生物,同時選擇所需的微生物

參加青霉素的培育基可抑制細菌,分別出真菌-11-利用培育條件進展的選擇培育

將培育基放在高溫環(huán)境轉變微生物的培育條件中培育,可分別出耐高溫的微生物微生物的鑒別方法(科學探究):菌落特征鑒別法依據(jù)微生物在固體培育基外表形成的菌落的外形、大小、隆起程度和顏色等特征進展鑒別指示劑鑒別法如培育基中參加酚紅指示劑,培育某種微生物后,培育基變紅說明該種微生物能夠分解尿素如利用剛果紅染色法,依據(jù)培育基中消滅以纖維素染色鑒別法 分解菌為中心的透亮圈來篩選分解纖維素的微生物設置比照和重復試驗(科學思維):目的

對 照排解非測試因素對試驗結果的影響空白比照:確定培育基制作是否合格或被雜菌污染;

重 復排解偶然因素對試驗結果的影響同一稀釋度涂布至少3方法 用完全培育基與選擇培育基比照,說明選擇培育基具有選擇作用”

個平板(1)微生物純培育中倒平板時,培育皿蓋不能完全翻開,以免雜菌污染培育基。(2)錐形瓶的瓶口必需通過酒精燈火焰,以防止瓶口的微生物污染培育基?！就卣寡娱L】自養(yǎng)型與異養(yǎng)型微生物培育基的區(qū)分2自養(yǎng)型微生物所需的主要養(yǎng)分物質是無機鹽,CO,氮源2也可由含氮無機鹽供給。,即碳源必需由含碳有機物供給,氮源也主要是由含氮有機物供給的,局部異養(yǎng)型微生物也可以利用無機氮源。-12-(多項選擇)某公司在冠疫情期間推出一款型免洗洗手凝膠,爭論人員檢測了凝膠洗手前后手部細菌的含量(如下圖)()圖示接種方法為平板劃線法①前后細菌含量形成比照,無需空白比照C.該培育基類型為通用固體培育基D.不需用顯微鏡觀看菌落的外形②,可以確定菌種類型【題眼破譯】提升信息轉化力量信息 轉化信息(對接問題)信息①平板劃線無法得知稀釋倍數(shù),不能用于活菌計數(shù)

由于不同種類的菌種形成的菌落形態(tài)特征不同,且菌落肉眼可見【解析】選C、D。平板劃線無法得知稀釋倍數(shù),不能用于活菌計數(shù),故統(tǒng)計洗手前后手部細菌的數(shù)量,選擇的接種方法是稀釋涂布平板法,A錯誤;除圖中操作外,還需要設置一組未接種的空白培育基進展培育,驗證培育基是否被雜菌污染,B錯誤;該培育基類型為通用固體培育基,C正確;由于不同種類的菌種形成的菌落形態(tài)特征不同,且菌落肉眼可見,故初步推斷培育基上菌種的類型,可用肉眼觀看菌落的形態(tài)特征,D正確?！旧疃人伎肌磕惩瑢W在純化土壤中的細菌時,覺察培育基上的菌落連成了一片,最可能的緣由是什么?應當怎樣操作才可避開此種現(xiàn)象?提示:最可能的緣由是菌液濃度過高或劃線時在下一次劃線前未將接種環(huán)灼燒滅菌實行的措施是增大稀釋倍數(shù)或每次劃線前先將接種環(huán)灼燒滅菌。1.(2023·泰州模擬)現(xiàn)有兩種固體培育基,其配制時所加的成分如表所示,用這兩種培育基分別去分別土壤中的兩種微生物,它們適于分別的是( )-13-含量0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%0.6%2%含量0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%--成分KHSOMgSO成分KHSOMgSO·47HO4NaClNaSO·CaCO2242HO23葡萄糖純淀粉甲培養(yǎng)基甲培育基適于分別異養(yǎng)型自生固氮菌,乙培育基適于分別自養(yǎng)型自生固氮菌C.甲培育基適于分別自養(yǎng)型自生固氮菌,乙培育基適于分別異養(yǎng)型自生固氮菌D.甲培育基適于分別異養(yǎng)型共生細菌,乙培育基適于分別異養(yǎng)型共生固氮菌【解析】選B。固氮菌中能獨立生存的是自生固氮菌,甲培育基中含有葡萄糖和淀粉,可以作為碳源,由此推出該培育基適于分別異養(yǎng)型的自生固氮菌;乙培育基中不含有機碳源,所以可用來分別培育自養(yǎng)型的自生固氮菌,B正確。2.將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸肯定時間,過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中參加肯定量蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培育基。答復以下問題:M培育基假設用于真菌的篩選,則培育基中應參加鏈霉素以抑制 生長,參加了鏈霉素的培育基屬于 培育基。M培育基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長供給了多種養(yǎng)分物質,養(yǎng)分物質類型除氮源外還有 出兩點即可)氮源進入細胞后,可參與合成的生物大分子有 (答出兩點即可)。假設在M培育基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培育,平板上長出菌落后可通過參加顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。參加的顯色劑是 ,該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是 。甲、乙兩位同學用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量,在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結果:甲同學涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是110、140和149,取平均值133;乙同學涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176,取平均值124。有人認為這兩位同學的結果中,乙同學的結果可信度低,其緣由是 。-14-【解析】(1)鏈霉素是抗生素,可抑制細菌生長,故參加鏈霉素的M培育基可作為選擇培育基,篩選出真菌。(2)培育基中的養(yǎng)分成分一般包括碳源、氮源、水和無機鹽等。細胞中含有氮元素的生物大分子有蛋白質、核酸等,故參加的氮源可參與以上物質的合成。(3)能產(chǎn)生淀粉酶的微生物可將淀粉水解,淀粉遇碘液變藍,向加有淀粉的培育基中參加碘液后培育基呈現(xiàn)藍色,產(chǎn)淀粉酶的菌落四周的淀粉被水解,形成透亮圈,(4)統(tǒng)計菌落數(shù)時,30~300的平板進展計數(shù),3個平板中的菌落數(shù)在正常范圍內且差距不大,比較準確;3個平板中,1個平板的計數(shù)2個相差懸殊,結果的重復性差。答案:(1)細菌 選擇 (2)碳源、無機鹽 蛋白質、核酸碘液 淀粉遇碘液顯藍色,產(chǎn)淀粉酶的菌落四周淀粉被水解,形成透亮圈乙同學的結果中,12個相差懸殊,結果的重復性差角度一從科學探究角度,考察微生物的選擇培育1.(2023·山東等級考)解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并,,乙菌菌落四周不變色,以下說法錯誤的選項是()甲菌屬于解脂菌試驗中所用培育基以脂肪為唯一碳源可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進展比照D.該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的力量突破口:脂肪酸會使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{色;甲菌菌落四周呈現(xiàn)深藍色,乙菌菌落四周沒有消滅深藍色?！窘馕觥窟xB。依據(jù)題干信息“甲菌菌落四周呈現(xiàn)深藍色”,說明甲可以分泌脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸,脂肪酸會使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{色,因此甲菌屬于解脂菌,A正確;乙菌落四周沒有消滅深藍色,說明乙菌落不能產(chǎn)生脂肪酶,-15-但乙菌落也可以在培育基上生存,說明該培育基不是以脂肪為唯一碳源,B錯誤;可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進展比照,更加直觀,C正確;可以利用該平板來比較解脂菌分泌脂肪酶的力量,觀看指標為菌落四周深藍色圈的大小,D正確?！緦W問縱橫】(1)選擇培育基:依據(jù)某種微生物的特別養(yǎng)分要求或其對某,使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌,從而提高該菌的篩選率。(2)鑒別培育基:依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培育基中特定試劑或化學藥品反響,產(chǎn)生明顯的特征變化而設計。角度二 從科學思維角度,考察微生物的培育與變異2.(2023·山東等級考)野生型大腸桿菌可以在根本培育基上生長,發(fā)生基因突變產(chǎn)生的氨基酸依靠型菌株需要在根本培育基上補充相應氨基酸才能生長。將甲硫氨酸依靠型菌株M和蘇氨酸依靠型菌株N單獨接種在根本培育基上時,均不會產(chǎn)某同學試驗過程中覺察,將M、N菌株混合培育一段時間,充分稀釋后再涂布到根本培育基上,培育后消滅很多由單個細菌形成的菌落,將這些菌落分別接種到根本培育基上,培育后均有菌落消滅。該同學對這些菌落消滅緣由的分,不合理的是( )A.操作過程中消滅雜菌污染B.M、N菌株互為對方供給所缺失的氨基酸C.混合培育過程中,菌株獲得了對方的遺傳物質D.混合培育過程中,菌株中已突變的基因再次發(fā)生突變突破口:微生物培育的過程中,可能會有雜菌污染,也可能消滅可遺傳變異,且基因突變是不定向的,突變后的基因可以再次發(fā)生突變?！窘馕觥窟xB。此題主要考察生物的變異和微生物培育。依據(jù)題意可知,培育后有菌落消滅,可能緣由是操作過程中有雜菌污染,A項正確;M和N混合培育一段時間后,再涂布到根本培育基上,培育后消滅了很多由單個細菌形成的菌落,說明M和N混合培育過程中不再對相應的氨基酸依靠,這種變化是可以遺傳的,因此MN菌株互為對方供給缺失的氨基酸,B項錯誤;由于兩者不再對氨基酸產(chǎn)生依靠是可以遺傳的,因此可能混合培育過程中發(fā)生了轉化,菌株獲得了對-16-方的遺傳物質,C項正確;基因突變是不定向的,在混合培育過程中,菌株中已發(fā)生突變的基因可能再次發(fā)生突變,D項正確。角度三 微生物的純化培育3.(2023·江蘇高考)為純化菌種,在鑒別培育基上劃線接種纖維素降解細菌,培育結果如下圖。以下表達正確的選項是( )倒平板后需間歇晃動,以保證外表平坦圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細菌數(shù)量均太多,應從Ⅲ區(qū)挑取單菌落C.該試驗結果因單菌落太多,不能到達菌種純化的目的D.菌落四周的纖維素被降解后,可被剛果紅染成紅色突破口:平板劃線法連續(xù)劃線的目的是獲得單菌落,倒平板后不需要晃動。B,A錯誤;Ⅰ區(qū)、Ⅱ區(qū)沒有消滅單菌落,說明細菌數(shù)量太多,故應從Ⅲ區(qū)挑取單菌落,B正確;消滅單菌落即到達了菌種純化的目的,C錯誤;剛果紅是一種染料,它可以與像纖維素這樣的多糖物質形成紅色復合物,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反響,D錯誤。角度四 培育基的分類與微生物的培育4.(2023·山東等級考)含硫蛋白質在某些微生物的作用下產(chǎn)生硫化氫導致生活污水發(fā)臭。硫化氫可以與硫酸亞鐵銨結合形成黑色沉淀。為探究發(fā)臭水體中甲、乙菌是否產(chǎn)生硫化氫及兩種菌的運動力量,用穿刺接種的方法,分別將兩種菌接種在含有硫酸亞鐵銨的培育基上進展培育,如下圖。假設兩種菌生殖速度相,以下說法錯誤的選項是( )-17-乙菌的運動力量比甲菌強為不影響菌的運動需選用液體培育基該試驗不能比較出兩種菌產(chǎn)生硫化氫的量穿刺接種等接種技術的核心是防止雜菌的污染突破口:含硫蛋白質在某些微生物作用下產(chǎn)生硫化氫,硫化氫可以與硫酸亞鐵銨結合形成黑色沉淀;穿刺接種的核心是防止雜菌污染。,依據(jù)題干中的信息“硫化氫可以與硫酸亞鐵銨結合形成黑色沉淀”,所以可依據(jù)形成黑色沉淀的多少,比較兩種菌產(chǎn)生硫化氫的力量?！窘馕觥窟xB。從圖中可以看出,甲菌在試管中分布范圍小于乙菌,說明乙菌的運動力量比甲菌強,A正確;為不影響菌的運動需選用半固體培育基,B錯誤;該試驗可以依據(jù)形成黑色沉淀的多少初步比較細菌產(chǎn)生硫化氫的力量,但不能測定產(chǎn)生硫化氫的量,C正確;微生物接種技術的核心是防止雜菌的污染,D正確。角度五 培育基的分類與微生物的篩選5.(2023·湖南選擇考改編)大熊貓是我國特有的珍稀野生動物,每只成年大熊貓每12~38kg8%27%的半纖維素,爭論人員可從大熊貓糞便和土壤中篩選纖維素分解菌。答復以下問題:纖維素酶是一種復合酶,其化學本質是 。為篩選纖維素分解菌,將大熊貓穎糞便樣品稀釋液接種至以 為唯一碳源的固體培育基上進展培育,該培育基從功能上分類屬于 培育基。配制的培育基必需進展滅菌處理,目的是 檢測固體培育基滅菌效果的常用方法是 。要寫出測定大熊貓穎糞便中纖維素分解菌活菌數(shù)的試驗思路: 。-18-為高效降解農業(yè)秸稈廢棄物,爭論人員利用從土壤中篩選獲得的3株纖維素分解菌,在37℃條件下進展玉米秸稈降解試驗,結果如表所示,在該條件下纖維素酶活力最高的是菌株 ,理由是: 。菌株秸稈總重/g秸稈殘重/g秸稈失重/%纖維素降解率/gA2.001.5124.5016.14B2.001.5323.5014.92C2.001.4229.0023.32突破口:篩選纖維素分解菌應選用選擇培育基,測定活菌數(shù)常用稀釋涂布平板法?！窘馕觥?1)纖維素酶是一種復合酶,其化學本質是蛋白質。選擇培育基的原理是允許特定微生物的生長,,應將大熊貓穎糞便樣品稀釋液接種至以纖維素為唯一碳源的固體培育基上進展培育。滅菌能殺死培育基中的全部微生物(包括芽孢、孢子),因此配制的培育基必需經(jīng)過滅菌處理才可以獲得純潔培育物。為檢測滅菌效果可對培育基進展空白培育