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文檔簡介
高效液相色譜簡介第1頁,共16頁,2023年,2月20日,星期四論文內容色譜分析方法發(fā)展概述分類基本原理流出曲線及有關術語高效液相色譜簡介第2頁,共16頁,2023年,2月20日,星期四1903年Tswett創(chuàng)立色譜法(在碳酸鈣上分離了葉綠素)20世紀四五十年代出現(xiàn)了紙色譜(PC)和薄層色譜法(TLC)1952年James和Martin提出了氣相色譜法(GC)20世紀60年代后期液相色譜法得到了快速發(fā)展論文內容第3頁,共16頁,2023年,2月20日,星期四第4頁,共16頁,2023年,2月20日,星期四第5頁,共16頁,2023年,2月20日,星期四
分配系數(shù)K和分配比kK=(溶質在固定相中的濃度)/(溶質在流動相中的濃度)=Cs/CmK為每一溶質的特征值,僅為固定相和溫度有關,與兩相體積論文內容、柱管特性及儀器無關。k=(組分在固定相中的質量)/(組分在流動相中的質量)=Ms/Mm兩峰間的距離由組分在兩相間的分配系數(shù)決定;峰寬由組分在色譜柱中傳質和擴散行為決定。 兩個理論(塔板理論和速率理論)論文內容第6頁,共16頁,2023年,2月20日,星期四色譜流出曲線示意圖第7頁,共16頁,2023年,2月20日,星期四有關術語1)色譜流出曲線和色譜峰2)基線3)峰高4)保留值(死時間、保留時間、調整保留時間、死體積、保留體積、調整保留體積、相對保留值)
5)區(qū)域寬度(標準偏差σ,半峰寬W1/2,峰底寬度W)第8頁,共16頁,2023年,2月20日,星期四樣品所含組分的最少個數(shù);定性分析(保留值);定量分析(峰高或面積);分離效能(保留值及區(qū)域寬度);兩相選擇的依據(峰間距離)論文內容從色譜流出曲線中可以得出許多重要信息:第9頁,共16頁,2023年,2月20日,星期四高效液相色譜(HPLC)流程示意圖第10頁,共16頁,2023年,2月20日,星期四HPLC組成圖第11頁,共16頁,2023年,2月20日,星期四HPLC組成示例第12頁,共16頁,2023年,2月20日,星期四
高效液相色譜法的特點高壓:一般可以達到150~300kg/cm2高速:一般可以達到1~10mL/min高效:一般可以達到60000理論塔板/米高靈敏度
:微升數(shù)量級的就可以進行全分析第13頁,共16頁,2023年,2月20日,星期四分類:液—液分配色譜液—固分配色譜離子交換色譜排斥色譜
選擇:樣品的分子量范圍溶解度分子結構第14頁,共16頁,2023年,2月20日,星期四高效液相色譜的應用高效液相色譜,特別適用于分離沸點高和熱穩(wěn)定性差的物質,目前已廣泛應用于化工、食品、醫(yī)藥、生化、衛(wèi)生、環(huán)境保護和高能化合物等生產和科研工作中。
第15頁,共16頁,202
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