關(guān)于常用免疫學(xué)檢查第1頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月

基本概念

免疫

免疫是指機體接觸“抗原性異物”或“異己成分”的一種特異性生理反應(yīng)，其作用是識別和排除抗原性異物，以此維持機體的生理平衡。這些維持機體穩(wěn)定性的反應(yīng)，通常對機體是有利的：但在某些條件下也可以是有害的。第2頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月現(xiàn)代免疫學(xué)認為：以下幾種生理功能：

(1)免疫防御；指機體排斥外源性抗原異物的能力。這是動物藉以自凈、不受外來物質(zhì)干擾和保持物種純潔的生理機制。

(2)免疫自穩(wěn)；指機體識別和清除自身衰老殘損的組織、細胞的能力，這是機體藉以維持正常內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的重要生理機制。這種自身穩(wěn)定功能失調(diào)時易導(dǎo)致某些生理平衡的紊亂或者自身免疫病。

(3)免疫監(jiān)視：指機體殺傷和清除異常突變細胞的能力，機體藉以監(jiān)視和抑制惡性腫瘤在體內(nèi)生長。一旦功能低下，宿主易患惡性腫瘤。第3頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月

免疫學(xué)檢驗免疫學(xué)檢驗又稱檢驗免疫學(xué)，是研究免疫學(xué)技術(shù)及其在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一門應(yīng)用學(xué)科．

免疫學(xué)檢驗的檢測對象是具有免疫活性的物質(zhì)，內(nèi)容包括檢測方法和臨床意義．免疫學(xué)檢驗可分為細胞免疫檢驗和體液免疫檢驗兩大類。利用抗原抗體反應(yīng)來測定標本中微量物質(zhì)的方法稱為免疫測定。免疫測定具有高度的特異性和敏感性．第4頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月淋巴細胞標志和功能檢測人體內(nèi)的淋巴細胞可分為T細胞、B細胞和包括NK細胞為代表的三群細胞分若干亞群，各有其特異的表面標志和功能，據(jù)此建立相應(yīng)許多相應(yīng)的檢測方法第5頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月T細胞表面標志物的檢測1．特異性抗原檢測用單克隆抗體檢測T細胞表面抗原的方法有兩大類，一類是用標記抗體著染，另一類用抗體致敏的紅細胞作花環(huán)試驗。2．特異性受體的檢測原理T細胞表面有特異性綿羊紅細胞(E)受體，當(dāng)人的T細胞與綿羊紅細胞懸液按一定比例混合后，置4'C至少2小時或過夜，T細胞表面的E受缽可與綿羊紅細胞結(jié)合形成玫瑰花樣的花環(huán)，稱為活性E(Ea)花環(huán)。檢測Ea花環(huán)形成細胞可反映受檢者的細胞免疫水平。第6頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月B細胞表面標志物的檢測

B細胞表面抗原檢測原理B細胞表面的CD19、CD20、CD21CD22和CD29等分化抗原，有些系全部B細胞所共有，而有些僅活化B細胞所特有，因而可用相應(yīng)的CD系列單克隆抗體，通過間接熒光免疫法，酶免疫組化或ABC法加以檢測。第7頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月

腫瘤標志物

腫瘤標志物可被定義為作為腫瘤細胞合成和釋放的生物性物質(zhì)或由宿主響應(yīng)腫瘤組織而產(chǎn)生的物質(zhì)。腫瘤標志物分類大致有兩種:其一按腫瘤標志物的來源，第二個腫瘤標志物本身的化學(xué)特性。按后者的分類主要包括:①腫瘤胚胎性抗原標志物;②糖類標志物;③酶類標志物;④激素類標志物;⑤蛋白質(zhì)類標志物;⑥基因標志物。第8頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月

一種理想的腫瘤標志物應(yīng)具有滿足分析的和臨床的需要兩方面的特性.

臨床的需要

對疾病的高靈敏度(沒有假陰性結(jié)果，能檢測微轉(zhuǎn)移)

對疾病的高特異性(沒有假陽性結(jié)果，在無病個體中陰性)

水平應(yīng)反映出腫瘤的大小

在病情穩(wěn)定的患者中水平應(yīng)保持相對地恒定并且沒有波動

在完全緩解的患者中應(yīng)該檢測不到或是低的

在病情穩(wěn)定的患者中應(yīng)能預(yù)測結(jié)果

第9頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月

常見的腫瘤標志物及其應(yīng)用評價腫瘤胚胎性抗原標志物

(1)癌胚抗原(CEA):CEA是由胎兒胃腸道上皮組織、胰和肝的細胞所合成，通常在妊娠前6個月內(nèi)CEA含量最高，出生后血清中含量已很低下，健康成年人血清中CEA濃度小于2·5ug/L。在臨床上，當(dāng)CEA大于6Oug/L時，可見于結(jié)腸癌、胃癌和肺癌。

(2)甲胎蛋白(AFP):妊娠的婦女的血和尿中AFP含量會持續(xù)增高，從妊娠6周開始合成，至12~15周達高峰。胎兒血漿中的AFP值可達到3mg/ml，出生后，AFP合成很快受抑制，其含量降至5Oug/L，周歲末嬰兒的濃度接近成人水平，一般健康成人血漿AFP濃度低于25ug/L。

AFP是原發(fā)性肝癌的最靈敏、最特異的腫瘤標志，血清AFP測定結(jié)果大于5OOug/L以上，或含量有不斷增高者，更應(yīng)高度警惕。肝癌患者血清AFP含量變化的速率和程度與腫瘤組織分化程度高低有一定相關(guān)性。分化程度較高的腫瘤AFP含量常大于200ug/L。第10頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月

糖類抗原標志物

糖類抗原標志物，腫瘤標志物相關(guān)物質(zhì)是指由腫瘤細胞表面的抗原物質(zhì)或者是腫瘤細胞所分泌的物質(zhì)，這類物質(zhì)又是單克隆抗體，故又稱為糖類抗原(CA)。(l)CAl25:CAl25是上皮性卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌的標志物，漿液性子宮內(nèi)膜樣癌、未分化卵巢癌患者的CAl25含量可明顯升高。

(2)CAl5-3:正常健康者血清CAl5-3含量(RIA法)小于28kM/L。30%~50%乳腺癌患者的CAl5-3明顯升高，肺癌、胃腸癌、卵巢癌及宮頸癌患者的血清CAl5-3也可升高，應(yīng)予以鑒別。(3)CAl9-9:正常人群的CAl9-9血清含量為(RIA法)2~16KM/L。Cal9-9是胰腺癌和結(jié)、直腸癌的標志物。如胰腺炎和黃疽，Cal9-9濃度也可增高，但往往呈"一過性"，必須加以鑒別。第11頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月

酶類標志物前列腺特異性抗原(PSA)

PSA是前列腺癌的特異性標志物，目前少數(shù)器官特異性腫瘤標志物之一。前列腺癌是男性泌尿系統(tǒng)的主要囊性腫瘤，前列腺癌的診斷特異性達90%~97%。

血清PSA除了作為檢測和早期發(fā)現(xiàn)前列腺癌，還可用于治療后的監(jiān)控，90%術(shù)后患者的血清PSA值可降至不能檢出的痕量水平。若術(shù)后血清PSA值升高，放療后療效顯著者，50%以上患者在2個月內(nèi)血清PSA降至正常。第12頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月第13頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月第14頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月第15頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月第16頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月第17頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月第18頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月第19頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月

自身免疫疾病的檢測

(一)自身免疫當(dāng)某種原因使自身免疫耐受削弱或破壞時，免疫系統(tǒng)會對自身成分產(chǎn)生免疫應(yīng)答這種現(xiàn)象稱為自身免疫．(二)自身免疫性病的概念及特征健康個體的正常免疫調(diào)節(jié)功能會將自身耐受和自身免疫協(xié)調(diào)在一個相輔相成的合理水平上．當(dāng)某種原因使自身免疫應(yīng)答過分強烈時，也會導(dǎo)致相應(yīng)的自身組織，器官損傷或功能障礙，這種病理狀態(tài)稱為自身免疫病(AID)，包括三個基本特征：1．患者血液中可以檢出高滴度的自身抗體和(或)與自身組織成分起反應(yīng)的致敏淋巴細胞．2．患者組織器官的病理特征為免疫炎癥，并且損傷范圍與自身抗體或致敏淋巴細胞所針對的抗原分布相對應(yīng)。3．動物中可復(fù)制出相似的疾病模型，并能通過血清或淋巴細胞使疾病在同系動物同系動物中轉(zhuǎn)移。第20頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月

類風(fēng)濕因子(RF)

RF是抗變性IgG的自身抗體，主要為IgM，也可見IgG及IgA，可與人或動物的變性IgG結(jié)合，而不與正常IgG發(fā)生凝集，最多見于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者．

RF在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者中的檢出率很高，RF陽性支持早期RA的傾向性診斷，如對年輕女性應(yīng)進行RA和風(fēng)濕熱間的鑒別；而對非活動期RA的診斷，需參考病史。但RF也象ANA一樣，并不是RA獨有的特異性抗體。在SLE患者約有50％RF陽性，在混合性結(jié)締組織病如ss、硬皮病、慢性活動性肝炎以及老年人中均可有不同程度的陽性率第21頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月

病毒性肝炎血清標志物檢測

病毒性肝炎主要有5型，即甲型(HA)、乙型(HB)、丙型(HC)、丁型(HD)和戊型(HE)，它們分別由肝炎病毒甲型(HAv)、乙型(HBV)、丙型(HCV)、丁型(HDV)和戊型(HEV)所引起。

HDV是一種缺損性病毒．依附HBv而存在和復(fù)制?，F(xiàn)知還有己型和庚型肝炎。第22頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月甲型肝炎病毒標志物RNA病毒，糞-口傳播檢測指標：抗HAV抗體（保護性抗體）

HAVAg（糞）

HAV-RNA第23頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月[臨床意義]①HAVAg陽性：見于70.6％～87.5％的甲肝患者。HAVAg于發(fā)病前二周可從糞中排出，其發(fā)病第一周糞便的陽性率為42.9％，1-2周為18.3％，2周后消失；②HAV-RNA陽性：對診斷具有特異性，特別對早期診斷意義更大。甲型肝炎病毒抗體測定機體感染HAV后，可產(chǎn)生lgM、lgA和lgG抗體。HAV-lgM是病毒衣蛋白抗體，HAV—IgA是腸道粘膜分泌的局部抗體，HAV—IgG病愈后可長期存在。①抗HAVIgM陽性：據(jù)觀察，甲肝患者抗HAVIgM的陽性率，在發(fā)病后2周為100％，1個月為76.5％，3個月為23.5％，6個月為5.9％，12個月時可為陰性。所以，抗AVigM陽性說明機體正在感染HAV，它是早期診斷甲肝的特異性指標；②抗HAVIgA陽性：甲肝早期和急性期，由糞便中測得抗HAVIgA呈陽性反應(yīng)，是早期診斷甲肝的指標之一；③抗HAVIgG陽性：提示既往感染，可作為流行病學(xué)調(diào)查的指標。第24頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月乙型肝炎病毒（HBV)的實驗室診斷

HBV為乙型肝炎的病原體，歸類于Hepadna病毒科(1981年Robinson提倡的新病毒科)，為一直徑42nm的球形顆粒，病毒核酸由兩條不完全的環(huán)狀DNA組成，有3200個堿基對。HBV外層為一厚約7nm的包膜，稱為乙型肝炎表面抗原(HBsAg)，內(nèi)層的抗原稱為乙型肝炎核心抗原(HbcAg)和乙型肝炎e抗原(HBeAg)，兩者組成HBV的核心部分，HBeAg是HBcAg的一部分被切斷后由149個氨基酸組成的多膚。核心內(nèi)部還包含有雙股DNA和DNA聚合酶見下圖。第25頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月LaboratoryDiagnosis

乙肝“兩對半”及臨床意義

HBsAg、抗HBsHBeAg、抗HBe

抗HBcHBcAg、乙型肝炎病毒核心抗原(hepatitisBViruscoreantigen，HBcAg)存在于Dane顆粒的核心部位，是一種核心蛋白，其外面被乙型肝炎表面抗原所包裹，所以一般情況下血清中不易檢測到游離的HBcAg。

[臨床意義]HBcAg陽性，提示病人血清中有感染性的HBV存在,表示復(fù)制活躍，傳染性強，預(yù)后較差。約有78％的陽性病例病情惡化。第26頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月1.乙肝五項標志物的臨床意義：1）HBsAg陽性可見于急性乙肝的潛伏期、急性期、慢性期、無癥狀HBsAg攜帶者、部分肝硬化和肝癌的血清中及受HBV感染的肝細胞胞漿中，是乙肝的感染指標之一。2）Anti-HBs是特異性抗體，能中和體液中的

HBV，可見于乙肝恢復(fù)期，HBV既往感染者和乙肝疫苗免疫后,反映機體對HBV具有保護性免疫力，Anti-HBs的效價與保護作用呈平行關(guān)系。第27頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月3）HbeAg在乙肝潛伏期的后期出現(xiàn)，略晚于

HBsAg,HBeAg存在于HBsAg陽性的血清中，其中大多數(shù)伴有血中Dane顆粒、HBVDNA、

DNA多聚酶陽性，具有很強的傳染性，有助于確定乙肝.無癥狀乙肝病毒攜帶者及妊婦的傳染性強弱,HBeAg陽性表示HBV在體內(nèi)復(fù)制。

第28頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月

其傳染性較弱，HBeAg消失前后出現(xiàn)Anti-HBe，即由復(fù)制期轉(zhuǎn)為非復(fù)制期，預(yù)示HBV繁殖中止或減弱，疾病可向好的方面轉(zhuǎn)化，但有部分乙肝病人HBeAg轉(zhuǎn)陰是HBV基因突變所致，故血中仍有HBV顆粒，所以,在乙肝中Anti-HBe不能作為HBV復(fù)制停止的絕對指標，Anti-HBe可存在于無癥狀攜帶者及無活動性肝病患者中，若Anti-HBe存在于慢活肝患者中，則肝病有可能繼續(xù)發(fā)展，并逐步變成肝硬化。

4）Anti-HBe陽性者第29頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月5）Anti-HBc是乙肝病毒核心總抗體

感染乙肝病毒后最早出現(xiàn)的抗體是IgM型核心抗體（Anti-HBcIgM）,它是乙肝急性或近期感染的重要指標.在慢活肝（活動期)也可能呈陽性,核心抗體不是中和抗體,Anti-HBcIgG可持續(xù)多年不消退,是既往受過HBV感染的血清學(xué)指標。第30頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月HBV抗原抗體系統(tǒng)檢測臨床意義HBsAgHBeAg抗-HBe抗-HBc抗-HBs臨床意義IgMIgG+-----感染或無癥狀攜帶者++-+--（大三陽）（有傳染）++--+-（大三陽）（有傳染）+-++-（小三陽）--+-++恢復(fù)期（傳染性低）-----+既往感染或接種疫苗------未感染，無免疫力第31頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月乙型肝炎病毒DNA測定乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)呈雙股環(huán)形,是HBV的基因物質(zhì)，也是乙型肝炎的直接診斷證據(jù)。[參考值]HBV—DNA斑點雜交試驗和聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)為陰性。[臨床意義]HBV-DNA陽性是診斷乙型肝炎的佐證，表明HBV復(fù)制及有傳染性。菌素也用于監(jiān)測應(yīng)用HBsAg疫苗后垂直傳播的阻斷效果，若HBV—DNA陽性表明疫苗阻斷效果不佳。第32頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月第33頁，課件共39頁，創(chuàng)作于2023年2月丙型肝炎病毒標志物RNA病毒，血液傳播標志物檢測：HCV-IgG（無保護性）