病原學標本送檢及采集規(guī)范科室：

主講人：目錄12345總則血培養(yǎng)標本呼吸道標本尿液標本其他標本01總則微生物標本采集的基本原則1234在抗菌藥物使用前采集標本應盡量送檢無菌部位的標本，如血培養(yǎng)有菌部位應避免“正常菌群導致的標本污染”標本的標簽和申請單的信息要填寫完整嚴格無菌操作送檢標本的種類與臨床意義血腦脊液、胸腹水、無菌體液尿膿、傷口分泌物痰、咽拭子（HI、SP除外）糞便、肛拭子微生物標本運送的基本原則12盡快送檢，多數標本兩小時內到達保證必要的運送條件不合格的生物標本標本采集至實驗室接收過程間隔過長，或無標本采集時間，或保存溫度不當。標本運送條件不正確：如厭氧培養(yǎng)標本卻在有氧條件下送檢。容器不規(guī)范：如容器有裂縫或被打破導致標本泄露、容器非無菌等。未貼標簽或貼錯標簽：標本與檢驗目的不符合，如痰培養(yǎng)送檢尿標本患者信息與標本不符，如女性患者送檢前列腺標本。標本明顯被污染，如痰標本中混有食物殘渣等。拭子上的標本已經干涸標本不符合檢驗要求，如痰標本以唾液為主。標本量太少。納入病原學送檢率的檢驗項目無菌體液細菌涂片合格標本細菌培養(yǎng)肺炎鏈球菌尿抗原軍團菌抗原/抗體檢驗真菌涂片及培養(yǎng)血清真菌G實驗或GM試驗血清降鈣素原檢驗（PCT）02血培養(yǎng)標本血培養(yǎng)采血指征可以感染患者出現以下任一指征體溫＞38℃或＜36℃呼吸頻率＞20次/分PCO2＜32mmhg寒戰(zhàn)心率＞90次/分血培養(yǎng)采血指征可以感染患者出現以下任一指征皮膚黏膜出血多器官功能衰竭昏迷血壓降低血培養(yǎng)采血指征可以感染患者出現以下任一指征白細胞增多（>10×10^9/L，特別有“核左移”未成熟的或帶狀的白細胞增多）粒細胞減少（成熟的多核白細胞<1×10^9/L）血小板減少炎癥指標如：CRP、PCT增高血培養(yǎng)采血指征以下情況需多次采集血培養(yǎng)凡原因未明的發(fā)熱，持續(xù)在1周以上，伴有心臟雜音或心臟超聲發(fā)現贅生物，或原有心臟基礎疾病、人工心臟瓣膜植入患者感染性心內膜炎凡原因未明的發(fā)熱，持續(xù)在1周以上，伴有心臟雜音或心臟超聲發(fā)現贅生物，或原有心臟基礎疾病、人工心臟瓣膜植入患者導管相關血流感染導管相關血流性感染血培養(yǎng)留取方法短期外周導管血培養(yǎng)導管尖端培養(yǎng)1-2套外周血培養(yǎng)中心靜脈導管血培養(yǎng)保留導管不保留導管1套導管血培養(yǎng)導管尖端培養(yǎng)1-2套外周血培養(yǎng)1-2套外周血培養(yǎng)血培養(yǎng)采血要求采血時間采血套數采血量寒戰(zhàn)或發(fā)熱初起時采集抗菌藥物使用前采集每人每次采集2-3套每次從不同穿刺點采集兒童一般僅采集需氧瓶成人每瓶采集量8-10ml注射器采集先注入厭氧瓶蝶形針采集先注入需氧瓶血培養(yǎng)采血要求對于成人血培養(yǎng)，1個需氧瓶和1個厭氧瓶為1套，在體位一側采集至少10-20ml血液分別注入1套血培養(yǎng)瓶中，每瓶5-10ml血液；同時在另一側采集至少10-20ml血液注入第2套血培養(yǎng)瓶，如果抽取的血液量很少時，應首先滿足需氧瓶。采用雙側雙瓶培養(yǎng)檢測提高陽性率，快速鑒別是污染菌還是感染菌，只做需氧菌不做厭氧菌培養(yǎng),將有19%的菌株不能被發(fā)現,另有5%的血培養(yǎng)延遲1天報告陽性結果。血培養(yǎng)采集方法采集靜脈血手衛(wèi)生去除培養(yǎng)瓶塑料瓶帽75%酒精消毒瓶口，自然干燥60s戴無菌手套固定靜脈血培養(yǎng)采集方法首先確定靜脈穿刺點（不建議動脈），用75％酒精消毒靜脈穿刺點30秒；用1-2%碘酊從穿刺點由內向外擦拭消毒30秒，待干；消毒后不要再次觸摸穿刺部位血培養(yǎng)瓶的消毒方法：打開培養(yǎng)瓶頂塑料帽，用75％乙醇消毒瓶頂橡皮塞，待干60秒；將血液注入培養(yǎng)瓶（不需要更換針頭），先需氧瓶后厭氧瓶，然后蓋上塑料帽手衛(wèi)生血培養(yǎng)采集方法及時送檢：血培養(yǎng)瓶在常溫保存，無須冷藏；接種標本后請在2小時內送到檢驗科上機檢測，如果不能及時送檢，可以放室溫保存（不要冷藏或放孵箱內）03呼吸道標本咽拭子標本臨床意義：咽部拭子細菌培養(yǎng)能分離出致病菌，有助于白喉、化膿性扁桃體炎、急性咽喉炎等的診斷。如在痰及咽拭子分泌物中檢測出致病菌，則視為呼吸道感染。采樣指征：突發(fā)的咽痛、淋巴結腫大、頸部或頜下淋巴結腫痛，常伴有發(fā)熱，通常沒有咳嗽或明顯鼻涕。咽拭子標本采集方法1．查對醫(yī)囑，標簽貼于標本容器上，攜用物至病人床旁。2．核對病人，解釋取咽拭子培養(yǎng)的目的和方法。3.囑病人張口發(fā)“啊”音，暴露咽喉，取出無菌長棉簽以靈敏而輕柔的動作擦拭兩側腭弓和咽、扁桃體上的分泌物。4．然后將棉簽插入試管，塞緊。5．及時送檢。痰標本臨床意義：痰液是肺泡、支氣管和氣管的分泌物。痰液檢查對呼吸系統(tǒng)疾病如肺結核、肺吸蟲、肺腫瘤、支氣管哮喘、慢性支氣管炎、支氣管擴張等疾病的診斷、療效觀察和預后判斷有一定價值。采樣指征：咳嗽、膿性痰，伴有發(fā)熱，影像學檢查出現新的或擴大的浸潤影；氣道開放患者，出現膿痰或血性痰。考慮下呼吸道感染患者采集痰液標本，同時送血培養(yǎng)標本。痰標本采集要求爭取首劑抗菌藥物治療使用前及更換抗菌藥物前采集標本采集后保證2小時內送達實驗室并得到接種只要有可能得到合格的痰標本，應馬上采集、送檢宜在醫(yī)護人員直視下留取合格痰標本送檢痰標本后三天內不主張再次送檢痰標本采集流程（1）目的：用于檢查痰液的一般性狀，做涂片經特殊染色查細菌、蟲卵和癌細胞，以協(xié)助診斷。（2）用物：痰盒。（3）操作方法1）護士核對醫(yī)囑，備齊用物，貼好標簽，注明科別、病室、床號、姓名、住院號、檢驗目的、送檢日期等。2）備齊用物，攜至床旁，核對病人，說明留取痰標本的目的及方法，以取得病人合作，消除緊張心理。3）囑病人早晨起來在未進食前，先用清水漱口，去除口腔雜質，以清潔口腔。4）在深呼吸后，用力咳出氣管深處的第一口痰，留于痰盒中。5）漱口，必要時作口腔護理。6）再次查對，安置病人，整理床單位，清理用物。7）洗手，記錄痰液的性狀、外觀，將標本連同檢驗單及時送檢。痰標本采集方法第一步：用清水反復漱口三次。痰標本采集方法第二步：深吸氣2-3次用力呼出。痰標本采集方法第三步：從肺部深處將痰咳出。痰標本采集方法第四步：將打開的無菌痰杯靠近嘴邊，吐出痰液，擰緊杯蓋。注意：不能將鼻涕和唾液吐入痰杯。痰標本運輸標本采集后需盡快送到實驗室，不能超過2小時不及時運送可導致肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌由于不適應外界環(huán)境和自溶現象而死亡不能及時送達或待處理標本應置于4℃冰箱保存，以免雜菌生長。（疑為肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌不在此列）冰箱保存不能超過24小時實驗室拒收標準1.質量不合格標本：顯微鏡下細胞學檢查發(fā)現標本受口咽部菌群污染。合格痰標本應鱗狀上皮細胞<10個/低倍視野，白細胞>25個低倍視野，或白細胞：鱗狀上皮細胞>2.52.沒有標簽或標簽貼錯；3.標識信息不明，未提供采集時間及送檢目的等；4.超過2小時送達實驗室，且沒有正確保存的標本；5.運送容器有滲漏。6.同一天同一項目重復送檢的痰標本。04尿液標本尿標本臨床意義：尿液來自血液,身體任何系統(tǒng)病變影響血液成分改變時,均可引起尿液成分的改變.通過尿液檢驗,不僅可測知腎及尿路感染疾病,還可測知心,肝,內分泌及其他臟器功能,對各種疾病的診斷有重要作用。尿標本采樣指征：

1.尿頻、尿急、尿疼等膀胱刺激癥狀，伴有不同程度發(fā)熱、乏力、腰痛等全身不適癥狀。

2.對于兒童患者，除上述典型癥狀外，還包括發(fā)熱、嘔吐、生長發(fā)育障礙、易怒等。

3.生后3個月內的小嬰兒患有泌尿系感染時，常表現出脫水及電解質紊亂。

4.先天性泌尿系統(tǒng)發(fā)育畸形，如腎臟發(fā)育不良、腎盂積水、膀胱輸尿管反流，是泌尿系感染的潛在危險因素。

5.嬰幼兒出現無法解釋的體溫≥38℃的發(fā)熱時，最遲也要在24小時內送檢尿培養(yǎng)。尿標本清潔中段尿清潔的中段尿標本，是泌尿系感染診斷的主要標本；如何避免采集過程中周圍皮膚黏膜及尿道定植菌的污染，是標本采集的關鍵。中段尿標本的采集往往由患者獨立完成，應向患者充分說明留取無污染中段尿的意義和具體采集方法。盡可能在未使用抗菌藥物前送檢，晨尿最佳。尿標本注意事項尿標本留取時應注意一些特殊情況：①女性患者應避免在月經期內留取尿液標本；②肉眼血尿標本不應進行尿液檢查（尿沉渣除外）；③如果服用的藥物影響尿液檢查，應在停藥后留取標本；④如果是乳糜尿，應囑咐患者待尿液澄清后留取。尿標本采集采集方法清潔中段尿采集法1.女性：分開陰唇。男性：縮回包皮。2.清洗：使用肥皂水盡可能認真地清洗外生殖器區(qū)域。3.用手指拿著采樣杯外側，不要接觸杯口邊緣。首先將少量尿液排掉，再用采樣杯采集半杯（5-10+ml）尿液。4.小心將蓋子蓋上，擰緊，做好標識，立即送檢。尿標本采集留置導尿管采集法1.如果需要，可夾閉導尿管采集尿標本，但時間不能超過30分鐘。2.使用酒精拭子清潔導尿管采樣口或導管部位（如果沒有采樣口）。3.將一次性注射器針頭插入采樣管，吸取尿液。4.將尿液轉入無菌尿杯中，蓋好，擰緊，標識完畢后立即送檢。+注意：不要將導管從尿袋上拆下采集標本，嚴禁使用尿袋尿進行培養(yǎng)。帶有留置導管的患者通常在48-72小時之后就會出現定植菌，且常為多種細菌。尿標本采集恥骨上膀胱穿刺如需進行厭氧菌培養(yǎng)或兒童及其他無法配合獲得清潔尿液標本時，應采用恥骨上膀胱穿刺。（1）消毒臍部至尿道之間區(qū)域的皮膚。（2）對穿刺部位進行局部麻醉。（3）在恥骨聯(lián)合和臍部中線部位將針頭插入充盈的膀胱。（4）用無菌注射器從膀胱吸取尿液。（5）無菌操作將尿液轉入無菌螺口杯，盡快送至實驗室培養(yǎng)。（6）厭氧菌培養(yǎng)，可進行床旁接種，將培養(yǎng)平板放入厭氧袋／罐內送檢；或無菌操作直接將注射器中的尿液注入厭氧血培養(yǎng)瓶中，迅速送檢。尿標本運送申請單除應包括患者基本信息外，一定注明患者的臨床診斷、癥狀、是否使用了抗菌藥物、標本留取方式和采集時間。尿杯上的標簽要求有唯一標識號或條碼，注明標本種類和采集時間，此信息尤其重要。尿標本運送1尿標本采集后應立即送檢。2若不能在采集30min內進行培養(yǎng)，應放入4℃冰箱保存，但也不能超過24h。實驗室拒收標準（1）標識不明，未提供采集時間及采集方法。（2）標本類型與標簽信息不符。（3）尿標本采集后超過30min送達實驗室，且未冷藏保存的。（4）患者集尿袋中的尿液標本。（5）申請做厭氧菌培養(yǎng)但未從恥骨弓上穿刺采集尿液。（6）容器破損、尿液滲漏。（7）明顯污染的標本。（8）標本量太少。（9）申請厭氧菌培養(yǎng)，標本未在厭氧條件下送檢。05其他標本腦脊液標本臨床意義：診斷中樞神經系統(tǒng)感染最主要的標本。采樣指征：

癥狀：

①成人：發(fā)熱、頭痛、惡心、嘔吐、頸強直和反射增強

等癥狀，懷疑為腦膜炎的患者。

②兒童：因兒童和新生兒的臨床表現不明確和無特異性，

因此對于嬰兒不明原因發(fā)熱，應懷疑為腦膜炎，采取

腦脊液。

疾?。孩倩撔阅X膜炎②非化膿性腦膜炎腦脊液標本定位腰椎穿刺第3-4腰椎間隙第4-5腰椎間隙收集腦脊液5-10ml標本送檢胸腔積液標本臨床意義為明確胸腔積液的性質，需做胸腔穿刺抽液檢查以助診斷。采樣指征：①癥狀：伴有胸痛、發(fā)熱、胸腔積液;②疾病：結核性胸膜炎，細菌性肺炎引起的胸膜炎，真菌感染引起的胸腔積液。胸腔積液標本1．囑患者取坐位面向椅背，兩前臂置于椅背上，前額伏于前臂上。不能起床者可取半坐位，患側前臂上舉抱于枕部。2．穿刺點選在胸部叩診實音最明顯部位進行，胸液較多時一般常取肩胛線或腋后線第7~8肋間；有時也選腋中線第6~7肋間或腋前線第5肋間為穿刺點。包裹性積液可結合X線或超聲檢查確定，穿刺點用蘸甲紫（龍膽紫）的棉簽在皮膚上標記。3．常規(guī)消毒皮膚，戴無菌手套，覆蓋消毒洞巾。用2%利多卡因在下一肋骨上緣的穿刺點自皮至胸膜壁層進行局部浸潤麻醉4．術者以左手示指與中指固定穿刺部位的皮膚，右手將穿刺針的三通活栓轉到與胸腔關閉處，再將穿刺針在麻醉處緩緩刺入，當針鋒抵抗感突然消失時，轉動三通活栓使其與胸腔相通，進行抽液。助手用止血鉗協(xié)助固定穿刺針，以防刺入過深損傷肺組織。注射器抽滿后，轉動三通活栓使其與外界相通，排出液體。5．抽液結束拔出穿刺針，覆蓋無菌紗布，稍用力壓迫片刻，用膠布固定后囑患者靜臥。腦脊液標本定位選在胸部叩診實音最明顯部位進行，胸液較多時一般常取肩胛線或腋后線第7-8肋間；有時也選腋中線第6-7肋間或腋前線第5肋間為穿刺點。抽取胸水標本送檢糞便常規(guī)標本1.集糞便標本的方法因檢查目的不同而有差別,一般檢驗留取新鮮的、自然排出的糞便3-5g,必要時可肛拭子采取,放入干燥、清潔、無吸水性的有蓋容器內,貼好標識送檢。標本容