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梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷2023/5/31第一頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日梅毒的概況1梅毒梅毒螺旋體引起的一種慢性系統(tǒng)性性傳播疾病2《中華人民共和國(guó)傳染病防治法》重點(diǎn)管理的乙類傳染病之一3梅毒早期主要侵犯皮膚及粘膜,晚期可侵犯心血管神經(jīng)系統(tǒng)以及全身各個(gè)系統(tǒng),對(duì)人體危害嚴(yán)重,還可以經(jīng)胎盤垂直給胎兒,造成流產(chǎn),死胎或畸形。4梅毒在我國(guó)發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì),中國(guó)疾控規(guī)劃在2010-2020年將增速控制在5%以下2023/5/31第二頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日梅毒的病原體特征
梅毒的病原體是梅毒螺旋體,屬于密螺旋體屬,蒼白密螺旋體蒼白亞種TreponmaPallidum。菌體直徑0.1-0.15um,長(zhǎng)7-8um,8-14個(gè)致密規(guī)則的螺旋,兩端尖直,運(yùn)動(dòng)活潑。
人是梅毒螺旋體的唯一宿主。2023/5/31第三頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日梅毒的免疫性人類對(duì)梅毒無先天性免疫,尚無人工免疫的疫苗感染梅毒2周后可測(cè)的IgM型抗體,梅毒經(jīng)治療后LgM型抗體可以轉(zhuǎn)陰。LgG型抗體在梅毒感染4周左右產(chǎn)生,可以通過胎盤,可以終生存在,但無保護(hù)性,治愈的梅毒可以再次感染。2023/5/31第四頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)
病原體檢測(cè)
核酸檢測(cè)血清學(xué)檢查
2023/5/31第五頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日病原體檢測(cè)
方法
暗視野顯微鏡檢查法鍍銀染色法免疫熒光染色法
標(biāo)本采集
用鈍器刮開下疳或皮疹露出基底組織,擠壓周圍組織,載玻片刮取分泌物滲出物;穿刺淋巴結(jié);研磨剪碎的病灶組織。2023/5/31第六頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日暗視野顯微鏡檢查滲出液和淋巴穿刺液可直接暗視野顯微鏡鏡檢。2023/5/31第七頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日鍍銀染色法利用梅毒螺旋體的嗜銀性,經(jīng)過銀氨溶液染成黑褐色。2023/5/31第八頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日免疫熒光染色通過單克隆抗體熒光標(biāo)記技術(shù)在熒光顯微鏡下觀察有熒光顯色的梅毒螺旋體。2023/5/31第九頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日病原體檢測(cè)評(píng)價(jià):暗視野顯微鏡檢查適用于早期梅毒診斷,簡(jiǎn)單易操作,成本低廉,但檢出率低。鍍銀染色和免疫熒光染色可用于病理組織切片檢查,敏感性比直接鏡檢高。但操作步驟復(fù)雜。2023/5/31第十頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日血清學(xué)檢查
非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)2023/5/31第十一頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)非密螺旋體抗原試驗(yàn)多用牛心肌的心脂質(zhì)作為抗原測(cè)定血清中的反應(yīng)素(抗脂質(zhì)抗體)(感染4-10周左右可測(cè)),可用來評(píng)價(jià)療效和判斷是否再度感染。2023/5/31第十二頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)1性病實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)VDRL2快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡試驗(yàn)RPR3甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)TRUST2023/5/31第十三頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日1性病實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)VDRL心脂質(zhì)加載到膽固醇上,凝集反應(yīng)需要顯微鏡觀察2023/5/31第十四頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日2快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡試驗(yàn)RPRVDRL的改良版,載體使用的是活性炭顆粒,可肉眼觀察2023/5/31第十五頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日3甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)TRUST甲苯胺紅染料顆粒作為標(biāo)記物,可肉眼觀察的凝集反應(yīng),陽性可測(cè)滴度2023/5/31第十六頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)用密螺旋體抗原檢測(cè)血清中的特異性抗體2023/5/31第十七頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)熒光密螺旋體抗體吸收試驗(yàn)FTA-ABS梅毒螺旋體抗體明膠顆粒凝集試驗(yàn)TPPA梅毒螺旋體酶聯(lián)吸附法ELISA-TP梅毒螺旋體時(shí)間分辨法TRFIA-TP免疫印跡法2023/5/31第十八頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日熒光密螺旋體抗體吸收試驗(yàn)FTA-ABS間接免疫熒光抗體技術(shù)。將蒼白密螺旋體抗原固定玻片上,標(biāo)本經(jīng)過Reiter株螺旋體吸收以后,再滴加在抗原片上溫育洗滌,加熒光標(biāo)記的抗人免疫球蛋白,在熒光顯微鏡下觀察。敏感性和特異性高,可以分別檢測(cè)LgM和LgG。2023/5/31第十九頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日抗梅毒螺旋體抗體的血凝檢測(cè)TP-HA通過梅毒螺旋體抗原致敏的紅細(xì)胞凝集反應(yīng)檢測(cè)血清中的梅毒特異性抗體2023/5/31第二十頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日梅毒螺旋體抗體明膠顆粒凝集試驗(yàn)TPPA通過梅毒螺旋體抗原致敏的明膠顆粒檢測(cè)血清中的梅毒螺旋體特異性抗體的凝集反應(yīng)2023/5/31第二十一頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日梅毒螺旋體酶聯(lián)吸附反應(yīng)試驗(yàn)ELISA-TP
血清里面的梅毒螺旋體特異性抗體和包被在反應(yīng)杯里的梅毒螺旋體抗原結(jié)合,加入酶標(biāo)記的抗人免疫球蛋白,通過酶催化底物顯色觀察反應(yīng)。2023/5/31第二十二頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日時(shí)間分辨熒光免疫法檢測(cè)梅毒TRFIA-TP利用可以激發(fā)熒光的鑭系金屬標(biāo)記抗人抗體,檢測(cè)梅毒螺旋體特異性抗體,敏感性特異性高,檢測(cè)下限可達(dá)10-14mol/l2023/5/31第二十三頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日其他方法免疫印跡法快速血清學(xué)試驗(yàn)(免疫層析技術(shù))POCT2023/5/31第二十四頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日核酸檢測(cè)
聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)是梅毒螺旋體檢測(cè)的敏感性極高的方法,檢測(cè)的標(biāo)本可以是體液,分泌物,組織,血液。。。針對(duì)梅毒的特征基因片段有常規(guī)PCR,巢式PCR,熒光PCR等方法,是血清學(xué)方法的有效補(bǔ)充。2023/5/31第二十五頁,共二十六頁,編輯于2023年,星期日梅毒血清學(xué)檢查的解讀TRUSTTP臨床意義陰性陰性排除梅毒(除外窗口期)陽性陽性確診梅毒梅毒婦女所生新生兒謹(jǐn)慎診斷陽性
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