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文檔簡介

糖液質(zhì)量的檢測方法1、 糖漿OD值的檢測方法:1ml糖漿樣品(DS%^30%)+9ml無水乙醇,迅速混勻后,在650nm下測其OD值。2、 斐林滴定法測DE值淀粉酶將淀粉水解成短鏈的糊精及少量的葡萄糖。斐林試劑由甲乙液組成,甲液為硫酸銅溶液,乙液為氫氧化鈉與酒石酸鉀鈉溶液。平時甲、乙液分別儲存,測定時才等體積混合,混合時,硫酸銅與氫氧化鈉反應(yīng),生成氫氧化銅沉淀。NaOH+CuSO4-Cu(OH)2+N&SO4生成的氫氧化銅和酒石酸鉀鈉反應(yīng),生成酒石酸鉀鈉與銅的絡(luò)合物,使氫氧化銅溶解。COOK(CHOH)2COONa+Cu(OH)2—COOK(CHO)2CuCOONa+2H2O酒石酸鉀鈉銅絡(luò)合物中的二價銅就是一個氧化劑,能使還原糖氧化,而二價銅被還原成一價的紅色氧化亞銅沉淀:2Cu(OH)2—COOK(CHO)2CuCOONa+CHO(CHOH)4CH2OH+2H2O—2COOK(CHOH)2COONa+COOH(CHOH)4CH2OH+Cu2O剩余的二價銅在酸性調(diào)價下與碘化鉀反應(yīng),生成碘,用硫代硫酸鈉滴定,I2被還原成I-,隨著其緩緩加入,顏色由棕黃色逐漸變成黃色,當(dāng)呈現(xiàn)淡黃色時,2%的淀粉指示劑,緩慢滴加硫代硫酸鈉直至溶液中的藍(lán)色消失,為淺粉色,即為滴定終點。通過這個反應(yīng),能夠測量存在于淀粉水解物中的還原糖含量。用純水代替樣品與斐林試劑反應(yīng),所消耗硫代硫酸鈉的體積為空白值。定義:葡萄糖當(dāng)量濃度(DE)代表淀粉水解的程度,是以葡萄糖計算的還原糖含量占十物質(zhì)的百分率,其數(shù)值的大小與淀粉水解的程度成正比?;瘜W(xué)試劑:NaCO2 3CHOKNa,4HO446 2CuSO4NaOH葡萄糖(Dextrose);HPLC級KII2H2SO4Na2S2O35H2O蒸餾水試劑:試劑配置方法有效期斐林試劑:甲液69.3gCuSO45H2O溶解在大約600ml蒸餾水中,將其轉(zhuǎn)移到1000ml容量瓶中,用水定容至刻度線6個月斐林試劑:乙液346gC4H4O6KNa4H2O和100gNaOH溶解在大約800ml蒸餾水中,將其轉(zhuǎn)移到1000ml容量瓶中,用水定容至刻度線。6個月30%(w/v)KI溶液300gKI溶解到800ml蒸餾水中,加3ml1NNaOH,將其轉(zhuǎn)移到1000ml容量瓶中,用水定容至刻度線,放在棕色瓶中保存。6個月26%硫酸溶液放置大約750ml蒸餾水于一個1L的燒杯中,但上手套和防護(hù)眼鏡,在連續(xù)攪拌的狀態(tài)下,非常緩慢的加入145ml96%的硫酸,攪拌至溶液變涼,將其轉(zhuǎn)移到1000ml容量瓶中,用水定容至刻度線。6個月0.1N硫代硫酸鈉溶解25gNa2S2O35H2O和0.2gNa2CO3在500ml預(yù)先煮沸并冷卻的水中,將其轉(zhuǎn)移到1000ml容量瓶中,用此水定容至刻度線,儲存在棕色試劑瓶中。6個月葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制1、 調(diào)解電磁爐的加熱功率,使45ml,25°C的水在2.75~3.25min分鐘達(dá)到沸騰;2、 水空白值的滴定:加入25ml的蒸餾水,10ml斐林試劑甲液,10ml斐林乙液于250ml的三角瓶中。搖勻后,放在電爐上加熱,沸騰2min后,放在冰箱中將其冷卻到30^以下。加入10ml30%KI和10ml26%HSO搖勻后用1.0NNaSO滴定2 4 223滴定過程中不斷的搖勻,隨著硫代硫酸鈉的緩慢加入,顏色由棕黃色逐漸變?yōu)辄S色,當(dāng)呈現(xiàn)淺黃色時,加入2%的淀粉指示劑,緩慢滴加硫代硫酸鈉至溶液藍(lán)色消失,為淺紅色,即為滴定終點。記錄硫代硫酸鈉的體積,即為空白滴定值。3、 標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液滴定加入20ml蒸餾水,5ml1%的葡萄糖溶液,10ml斐林甲液,10ml斐林乙液試劑于250ml三角瓶中。加入25ml蒸餾水,10ml斐林甲液,10ml斐林乙液試劑與50ml三角瓶中?;靹蚝螅旁陔姞t上加熱,沸騰2分鐘后,放在冰箱中迅速冷卻到30r以下。加入10ml30%KI和10ml26%H2SO4混勻后用0.1N硫代硫酸鈉滴定。滴定過程中不斷的搖勻,隨著硫代硫酸鈉的緩緩加入,顏色由棕黃色逐漸變?yōu)辄S色,但呈現(xiàn)黃色時,加入2%的淀粉指示劑,緩慢加入硫代硫酸鈉直至溶液藍(lán)色消失,為淺粉色,即為滴定終點。記錄硫代硫酸鈉的體積,即為葡萄糖的滴定值。4、 液化液、糖化液DE的測定稱0.2g的液化液(0.1g的糖化液)到250ml三角瓶中,用移液管加24.8ml(或24ml)的蒸餾水,記錄液化液的質(zhì)量。加入10ml斐林甲液,10ml斐林乙液到這個三角瓶中。搖勻后,放在電爐上加熱,沸騰2min后,放在冰箱中迅速冷卻到30r以下。加入10ml30%KI和10ml26%H2SO4搖勻后用0.1N硫代硫酸鈉滴定。滴定過程中不斷的搖勻,隨著硫代硫酸鈉的緩慢加入,顏色由棕黃色變?yōu)辄S色,當(dāng)呈現(xiàn)黃色時,加入2%的淀粉指示劑,緩慢加入硫代硫酸鈉直至溶液藍(lán)色消失,變?yōu)榉凵珪r,即為滴定終點。記錄硫代硫酸鈉的體積,即為樣品滴定值。(^-^)X500 =

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